通過小動物在體電標(biāo)測實(shí)驗(yàn)探究活體心臟電生理信號及心肌缺血的影響
小動物在體心臟心外膜電標(biāo)測可在完整生理狀態(tài)下記錄心臟電活動，完整保留心臟正常的神經(jīng)調(diào)節(jié)、血液循環(huán)與血流動力學(xué)真實(shí)環(huán)境，相較于離體心臟標(biāo)測，更貼近機(jī)體生理與病理狀態(tài)，有效規(guī)避了心臟脫離體內(nèi)環(huán)境導(dǎo)致的電活動失真問題。該技術(shù)將電極直接貼附于心外膜表面，信號衰減小、信噪比高，且空間分辨率優(yōu)異，能夠精準(zhǔn)捕捉局部心肌的傳導(dǎo)異常及微小電生理病灶；同時(shí)其操作直觀簡便、穩(wěn)定性強(qiáng)，適配小鼠、大鼠、家兔等多種常用實(shí)驗(yàn)小動物，依托成熟的小動物疾病模型，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好，且飼養(yǎng)與操作成本可控，性價(jià)比突出，能很好滿足基礎(chǔ)科研需求。
這項(xiàng)技術(shù)是心律失常機(jī)制研究的核心手段，可直觀揭示興奮起源、傳導(dǎo)路徑及異常電信號特征，同時(shí)用于藥物臨床前心臟安全性評價(jià)、消融與起搏等療法的在體驗(yàn)證，既為心臟電生理基礎(chǔ)研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)，也成為連接基礎(chǔ)科研與臨床轉(zhuǎn)化的重要橋梁，推動心血管疾病診療技術(shù)的優(yōu)化與創(chuàng)新。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>通過家兔在體心臟心外膜電標(biāo)測技術(shù)，記錄其正常及左前降支結(jié)扎致心肌缺血狀態(tài)下的心臟電生理信號，明確心肌缺血對心臟電傳導(dǎo)的影響。
實(shí)驗(yàn)動物：
小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等（本文以家兔為例）
實(shí)驗(yàn)方法：
Protocol（家兔在體電標(biāo)測實(shí)驗(yàn)案例）
一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
（一）主要試劑
舒泰50、異氟烷、脫毛膏、生理鹽水、碘伏
（二）主要器材
儀器：電子秤、在體心電圖、呼吸麻醉機(jī)（R650+R420）
器械：鈍性彎頭鑷、可撕膠帶、氣管插管（3.0）、喉鏡（80mm）、照明燈、擴(kuò)胸器、止血鉗、家兔保定裝置、恒溫手術(shù)板、手術(shù)剪刀、眼科剪
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 動物稱重與麻醉：
將家兔置于保定裝置中完成體重精準(zhǔn)測量，按5mg/kg劑量計(jì)算舒泰50使用量，經(jīng)肌肉注射實(shí)施基礎(chǔ)麻醉，待家兔翻正反射消失后進(jìn)行后續(xù)操作。
2. 氣管插管與呼吸維持：
采用異氟烷進(jìn)行吸入誘導(dǎo)麻醉（誘導(dǎo)濃度3.0~5.0%），借助喉鏡暴露聲門后進(jìn)行3.0號氣管插管，確認(rèn)插管成功后連接呼吸麻醉機(jī)，根據(jù)家兔體重設(shè)置通氣參數(shù)（潮氣量、呼吸頻率、吸呼比等），維持異氟烷1.5~3.0%濃度進(jìn)行術(shù)中麻醉，將家兔固定于恒溫手術(shù)板上。
3. 術(shù)區(qū)脫毛與備皮：
對家兔左側(cè)胸部術(shù)區(qū)采用剃毛器初步除毛，均勻涂抹脫毛膏作用2~3min后，用無菌棉球輕柔拭去術(shù)區(qū)毛發(fā)，隨后以無菌生理鹽水擦拭脫毛部位，清除殘留脫毛膏，避免皮膚黏膜刺激。
4. 無菌開胸與心臟暴露：
術(shù)區(qū)用碘伏進(jìn)行三次環(huán)形消毒，鋪無菌手術(shù)單；以手術(shù)剪沿左側(cè)第三、四肋間逐層剪開胸壁外皮和肌肉，用眼科剪小心剪開肋間肌，操作中避免損傷肺葉、心肌及大血管；將擴(kuò)胸器置入肋間并緩慢撐開，充分暴露心臟后，用眼科剪剪開心包膜，使心外膜完全暴露。
5. 基礎(chǔ)狀態(tài)在體電標(biāo)測：
將薄膜電極 / PA06408080306 筆式電極緊密貼附于家兔左心房 / 左心室心外膜目標(biāo)區(qū)域，確保電極與心肌接觸良好，啟動多通道電生理標(biāo)測系統(tǒng)，采集并記錄基礎(chǔ)生理狀態(tài)下的心臟電生理信號與傳導(dǎo)數(shù)據(jù)，保存原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
探究活體心臟電生理：小動物在體電標(biāo)測實(shí)驗(yàn)Protocol
6. 左冠狀動脈前降支結(jié)扎造模：
在體視鏡下定位左冠狀動脈前降支，于左心耳根部下方區(qū)域，用持針器夾持6-0帶針縫合線行左前降支結(jié)扎操作；結(jié)扎后同步監(jiān)測體表心電圖，以ST段呈顯著性抬高作為心肌缺血模型構(gòu)建成功的判定標(biāo)準(zhǔn)。
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7. 缺血狀態(tài)在體電標(biāo)測：
模型構(gòu)建成功后，采用同型號電極貼附于左心室 / 左心房原標(biāo)測區(qū)域，保持電極參數(shù)與操作條件一致，再次采集并記錄心肌缺血狀態(tài)下的心臟電生理信號及傳導(dǎo)數(shù)據(jù)，完成基礎(chǔ)與缺血狀態(tài)數(shù)據(jù)的對照采集。
8. 術(shù)區(qū)分層縫合與消毒：
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集完成后，用無菌棉球輕柔擦拭胸腔術(shù)區(qū)，清除積液與血凝塊；采用4-0帶針縫合線對肋間肋骨開口行間斷縫合，再逐層縫合胸壁肌肉層與皮膚層，縫合后對術(shù)區(qū)行碘伏再次消毒，完成術(shù)后處理。
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. 結(jié)扎前后家兔心臟左心室傳導(dǎo)比較
圖1 結(jié)扎后，家兔心臟左心室傳導(dǎo)紊亂、異質(zhì)性增加
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