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化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒助力納米遞藥系統(tǒng)突破胃癌化療耐藥研究

瀏覽次數(shù):252 發(fā)布日期:2026-1-14  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

胃癌作為全球高發(fā)惡性腫瘤,化療耐藥是導(dǎo)致患者預(yù)后差的 “元兇” 之一。近期《Advanced Science》(2025)發(fā)表的一項(xiàng)研究,創(chuàng)新性開(kāi)發(fā)出WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs 納米遞藥系統(tǒng),通過(guò)調(diào)控 Notch 信號(hào)通路與線(xiàn)粒體自噬(Mitophagy),成功逆轉(zhuǎn)胃腺癌(GA)化療耐藥。其中,Absin 的 ECL 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):abs920)為關(guān)鍵機(jī)制驗(yàn)證提供了可靠的蛋白檢測(cè)支持,助力研究成果落地。

文獻(xiàn)標(biāo)題:WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs Mitigate Chemoresistance in Gastric Adenocarcinoma by Modulating the Notch Signaling Pathway and Mitophagy
發(fā)表期刊:Advanced Science(IF 14.1)
DOI:https://doi.org/10.1002/advs.202415840
核心試劑:ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒(abs920)

一、研究思路:精準(zhǔn)靶向,直擊胃癌耐藥核心
研究者針對(duì)胃癌化療耐藥的兩大關(guān)鍵靶點(diǎn) ——Notch 信號(hào)通路異常激活與線(xiàn)粒體自噬過(guò)度激活,設(shè)計(jì)了 “靶向遞藥 + 通路調(diào)控” 雙策略:
1. 載體選擇:采用超順磁性氧化鐵納米顆粒(SPIONs),兼具藥物遞送與 MRI 成像功能,實(shí)現(xiàn) “診療一體化”;
2. 靶向修飾:通過(guò) FA(葉酸)修飾靶向胃癌細(xì)胞高表達(dá)的葉酸受體(FRα),PEG/PEI 修飾提升納米顆粒穩(wěn)定性與生物相容性;
3. 藥物負(fù)載:負(fù)載 WSGC 肽(源自 apoC-III 的 40 氨基酸多肽),特異性抑制 Notch 通路,進(jìn)而下調(diào)線(xiàn)粒體自噬相關(guān)蛋白(LC3、PINK1、Parkin);
4. 驗(yàn)證邏輯:先通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞毒性、攝取、增殖遷移抑制)驗(yàn)證 efficacy,再通過(guò)體內(nèi)裸鼠移植瘤模型驗(yàn)證抑瘤效果與安全性,最后結(jié)合轉(zhuǎn)錄組、Western Blot 等解析機(jī)制。

二、核心研究成果:從納米表征到體內(nèi)抑瘤,層層突破胃癌耐藥
1. 納米顆粒理化性質(zhì)優(yōu)異,滿(mǎn)足靶向遞送需求

如圖 所示,研究者通過(guò) DLS、Zeta 電位、TEM 及 UV/FTIR 等技術(shù),系統(tǒng)表征了 WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs 的理化性質(zhì):
(1)hydrodynamic 直徑:PEG/PEI-SPIONs 為 29.2 nm,修飾 FA 后增至 100.9 nm,負(fù)載 WSGC 后達(dá) 183.1 nm,均在腫瘤靶向遞送的最優(yōu)尺寸范圍(100-200 nm)內(nèi);
(2)Zeta 電位:從 PEG/PEI-SPIONs 的 + 20 mV 逐步降至 - 10 mV,減少體內(nèi)非特異性吸附;
(3)TEM 形態(tài):核心尺寸 10-13 nm,球形分散性好,為高效細(xì)胞攝取奠定基礎(chǔ);
(4)穩(wěn)定性:4℃儲(chǔ)存 28 天粒徑無(wú)顯著變化,pH 5.0(模擬腫瘤微環(huán)境)下 WSGC 釋放率超 82%,實(shí)現(xiàn) “精準(zhǔn)釋放”。

2. 體外實(shí)驗(yàn):強(qiáng)效抑制胃癌細(xì)胞增殖遷移,逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥
(1)細(xì)胞攝取與毒性:靶向遞送效率顯著提升

如圖所示,WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs 通過(guò)葉酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入胃癌細(xì)胞(KATO III、MNK-45):
a.熒光顯微鏡顯示,納米組紅色熒光強(qiáng)度顯著高于游離 WSGC 組,且游離 FA 可競(jìng)爭(zhēng)性抑制攝取,證明靶向特異性;
b.加入 0.15T 磁場(chǎng)后,納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)積累更多, cytotoxicity 進(jìn)一步增強(qiáng),IC50 較游離 WSGC 降低約 15%-20%;
c.載體(PEG/PEI-SPIONs、FA@PEG/PEI-SPIONs)生物相容性?xún)?yōu)異,200 μg/mL Fe 濃度下細(xì)胞存活率仍超 80%。
(2)功能抑制:阻滯細(xì)胞周期,抑制侵襲遷移

如圖所示,納米遞藥系統(tǒng)顯著抑制胃癌細(xì)胞惡性表型:

a.克隆形成:WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs 組克隆數(shù)較對(duì)照組減少 60% 以上;
b.細(xì)胞周期:G0/G1 期細(xì)胞比例增加,S 期減少,實(shí)現(xiàn)周期阻滯;
c.EMT 逆轉(zhuǎn):上皮標(biāo)志物 E-cadherin 表達(dá)升高,間質(zhì)標(biāo)志物 N-cadherin、Snail 降低,抑制細(xì)胞遷移侵襲;
d.FRα 下調(diào):RT-qPCR 顯示納米組 FRα mRNA 表達(dá)降低 40%,減少腫瘤細(xì)胞葉酸依賴(lài)增殖。

3. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn):抑瘤效果顯著,安全性良好

如圖 所示,在 KATO III 裸鼠移植瘤模型中:
a.腫瘤生長(zhǎng)抑制:WSGC@FA@PEG/PEI-SPIONs + 磁場(chǎng)組腫瘤體積較對(duì)照組縮小 72%,重量降低 68%;
b.凋亡誘導(dǎo):TUNEL 染色顯示納米組凋亡細(xì)胞比例增加 5 倍,Caspase-3 活性升高;
c.安全性:心、肝、肺、腎組織 H&E 染色無(wú)異常,血常規(guī)、血清生化指標(biāo)正常,證明無(wú)系統(tǒng)毒性;
d.靶向富集:ICP-OES 顯示磁場(chǎng)組腫瘤部位鐵含量是無(wú)磁場(chǎng)組的 7.2 倍,MRI 成像顯示 T2 信號(hào)顯著降低,驗(yàn)證靶向遞送效率。

4. 機(jī)制解析:Notch-線(xiàn)粒體自噬軸是關(guān)鍵

研究者通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與蛋白檢測(cè),證實(shí) WSGC 的作用機(jī)制:
a. Notch 通路抑制:轉(zhuǎn)錄組顯示納米組 NOTCH1 mRNA 表達(dá)降低 3 倍,Western Blot 檢測(cè)到 NICD(Notch1 活性形式)顯著下調(diào);
b. 線(xiàn)粒體自噬下調(diào):WSGC 通過(guò)抑制 Notch 通路,降低線(xiàn)粒體自噬相關(guān)蛋白 PINK1、Parkin、LC3-II 的表達(dá),增加 p62(自噬底物)積累;
c. 耐藥逆轉(zhuǎn):在順鉑耐藥細(xì)胞(KATO III R-CDDP)中,WSGC 使 EC50 降低 4.2 倍,而 Notch1 過(guò)表達(dá)可逆轉(zhuǎn)此效果,證明 Notch-線(xiàn)粒體自噬軸是耐藥關(guān)鍵。

三、Absin 產(chǎn)品助力:abs920 ECL 試劑盒,為蛋白檢測(cè)保駕護(hù)航

在上述機(jī)制驗(yàn)證中,Western Blot 技術(shù)是核心手段 —— 需精準(zhǔn)檢測(cè) Notch 通路蛋白(NICD、Hey1)、線(xiàn)粒體自噬蛋白(PINK1、Parkin、LC3)及凋亡相關(guān)蛋白(Caspase-3、Bax)的表達(dá)變化。研究者選用了 Absin 的 ECL 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):abs920),其作用與優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在:

1. 產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景
(1)檢測(cè) NICD 蛋白表達(dá)(圖 7A):驗(yàn)證 WSGC 對(duì) Notch 通路的抑制作用;
(2)檢測(cè)線(xiàn)粒體自噬相關(guān)蛋白:證明 PINK1、Parkin 的下調(diào);
(3)檢測(cè) EMT 標(biāo)志物:確認(rèn) E-cadherin/N-cadherin 的表達(dá)變化。

2. 產(chǎn)品核心優(yōu)勢(shì)
(1)高靈敏度:可檢測(cè)低至 pg 級(jí)別的蛋白,滿(mǎn)足 Parkin 等低表達(dá)蛋白的檢測(cè)需求;
(2)信號(hào)穩(wěn)定:發(fā)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)(>2 小時(shí)),便于多次曝光獲取清晰條帶;
(3)兼容性強(qiáng):與 Abcam、CST 等品牌一抗兼容,無(wú)需調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件;
(4)結(jié)果可靠:批次間重復(fù)性好,確保蛋白條帶灰度分析的準(zhǔn)確性,為機(jī)制結(jié)論提供有力支撐。

四、總結(jié)與展望

本研究創(chuàng)新性地將 WSGC 肽與 SPIONs 結(jié)合,構(gòu)建靶向納米遞藥系統(tǒng),通過(guò)抑制 Notch-線(xiàn)粒體自噬軸突破胃癌化療耐藥,為多肽類(lèi)腫瘤療法提供新方向。其中,Absin 的 abs920 ECL 試劑盒憑借高靈敏度與穩(wěn)定性,在蛋白水平驗(yàn)證機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用,助力研究成果發(fā)表于《Advanced Science》。

未來(lái),Absin 將持續(xù)提供更優(yōu)質(zhì)的科研工具(如蛋白檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)試劑),支持腫瘤領(lǐng)域研究者在靶向治療、耐藥機(jī)制等方向的探索,為生命科學(xué)研究貢獻(xiàn)力量!

文中使用產(chǎn)品
貨號(hào) 名稱(chēng) 規(guī)格
abs920 ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 25mL×2/50mL×2/250mL×2

WB 相關(guān)試劑一站式采購(gòu)
類(lèi)別 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格
樣本處理 abs9229 RIPA裂解液(強(qiáng)) 100mL
abs9116 免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 100mL
abs9161 廣譜型蛋白酶抑制劑混合物(不含EDTA,100×DMSO儲(chǔ)液) 1mL
abs9162 廣譜型磷酸酶抑制劑混合物(100×儲(chǔ)液) 1mL
蛋白定量 abs9232 BCA蛋白定量試劑盒 500T
上樣 abs953 上樣緩沖液(2×) 10mL
abs9829 上樣緩沖液(5×) 10mL
Marker abs924 預(yù)染蛋白Marker(10-180kDa) 250uL
abs923 預(yù)染蛋白Marker(10-245kDa) 500uL
abs90004 預(yù)染發(fā)光Western Marker 500uL
電泳 abs951 電泳液(10×) 1L
abs9359 Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液(10×) 500mL
預(yù)制膠 - Plastic gel、Glass gel等多款預(yù)制膠 Plastic gel、Glass gel等多款預(yù)制膠
凝膠試劑盒 abs9367 彩色PAGE快速凝膠試劑盒(10%) 1kit
abs9368 彩色PAGE快速凝膠試劑盒(12%) 1kit
abs9366 彩色PAGE快速凝膠試劑盒(8%) 1kit
轉(zhuǎn)膜 abs932 PVDF膜(0.45μm) 1卷
abs931 PVDF膜(0.22μm) 1卷
abs960 NC膜(0.45μm) 1卷
abs959 NC膜(0.22μm) 1卷
abs950 電轉(zhuǎn)液(10×) 100mL
封閉 abs9175 脫脂奶粉 500g
abs9915 Western Blot快速封閉液 500mL
一抗孵育 abs954 WB專(zhuān)用一抗二抗稀釋液 100mL
- WB一抗(3萬(wàn)余產(chǎn)品,多指標(biāo)覆蓋) WB一抗(3萬(wàn)余產(chǎn)品,多指標(biāo)覆蓋)
內(nèi)參抗體 abs132001 Rabbit anti-β-Actin Polyclonal Antibody 100ug
abs830030 Mouse anti-GAPDH Monoclonal Antibody 1mL
abs830032 Mouse anti-β-Tubulin Monoclonal Antibody 1mL
二抗 abs20040 Goat anti-Rabbit IgG-HRP Antibody 500uL
abs20001 Goat anti-Mouse IgG-HRP Antibody 1mL
顯色 abs9213 DAB顯色試劑盒(紫藍(lán)色,WB) 1kit
abs920 ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 25mL×2
abs9434 超敏型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 25mL×2
abs9435 極敏型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 25mL×2
免責(zé)聲明】本文內(nèi)容基于《Advanced Science》(DOI: 10.1002/advs.202415840)原文獻(xiàn),由 AI 解讀整理;文中涉及的原文獻(xiàn)圖片、數(shù)據(jù)等知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸原期刊及研究團(tuán)隊(duì)所有。若存在侵權(quán)情形,敬請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我方刪除,我方將積極配合處理。
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