Disulfiram作為銅離子載體在銅死亡與細(xì)胞焦亡中的應(yīng)用

Disulfiram（雙硫侖，TETD，AbMole，M3390）作為一種經(jīng)典小分子化合物，在基礎(chǔ)科研中展現(xiàn)出多靶點(diǎn)調(diào)控特性：Disulfiram（CAS No.：97-77-8）首先是一種醛脫氫酶（ALDH）的抑制劑，可用于酒精中毒相關(guān)的研究；Disulfiram還是一種銅離子載體，在其與銅離子形成復(fù)合物后可干擾細(xì)胞內(nèi)銅離子的穩(wěn)態(tài)，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生銅死亡。此外，Disulfiram（Tetraethylthiuram disulfide）與銅離子螯合后，還能共價(jià)修飾Gasdermin D（GSDMD，一種細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵執(zhí)行蛋白）以阻斷細(xì)胞焦亡；Disulfiram還能誘導(dǎo)活性氧（ROS）產(chǎn)生與氧化應(yīng)激，并抑制NLRP3炎癥小體活化，以及激活自噬通路。Disulfiram（15 μM）在LLC-PK1細(xì)胞中可以抑制TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，其機(jī)制涉及Disulfiram對(duì)線粒體膜電位的穩(wěn)定、活性氧的抑制以及半胱天冬酶-3活性的抑制[1]。

Disulfiram（50 μM）能抑制非小細(xì)胞肺癌的增殖，并且還發(fā)現(xiàn)Disulfiram與銅離子形成的復(fù)合物能減少肺癌細(xì)胞群落和球狀體形成，以及通過抑制ALDH來阻斷肺癌干細(xì)胞的生成[2]。類似地，在乳腺癌模型中，Disulfiram（雙硫侖，TETD，AbMole，M3390）通過抑制ROS–MAPK和NFκB通路，能清除具有干細(xì)胞特性的乳腺癌細(xì)胞[3]。Disulfiram（Tetraethylthiuram disulfide）還具有抗菌活性，對(duì)金黃色葡萄球菌的多個(gè)耐藥菌株的最低抑制濃度達(dá)8-16 mg/L，并且還能清除耐藥菌形成的生物膜[4]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，Disulfiram（TETD）在C57BL/6小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型中每日灌胃200 mg/kg持續(xù)3個(gè)月可抑制斑塊進(jìn)展[5]；在小鼠金黃色葡萄球菌感染模型中，50mg/kg的劑量顯著降低了小鼠腿部的細(xì)菌數(shù)量[4]。Disulfiram（雙硫侖，TETD，AbMole，M3390）還在裸鼠腎透明細(xì)胞癌（ccRCC）異種移植模型中，與Sunitinib（SU 11248，舒尼替尼）聯(lián)用顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。

范例詳解
Biomed Pharmacother. 2025 Jul;188:118228.

AbMole的 Disulfiram（雙硫侖，TETD，AbMole，M3390）和 葡萄糖酸銅（Copper(II) Gluconate，AbMole，M9228）被用于探究在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞系中的腫瘤抑制潛力，結(jié)果顯示Disulfiram與葡萄糖酸銅的組合可抑制腫瘤生長(zhǎng)，IC50值為52.37 nM，并Disulfiram還與RTK激酶抑制劑表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)包括 AZD3759（EGFR抑制劑，AbMole，M5164）、Dacomitinib（泛ErbB抑制劑，AbMole，M1869）、Foretinib（c-Met和VEGFR抑制劑，AbMole，M1758）。

 圖1. The cytotoxic activity of AZD3759, Dacomitinib, and Foretinib for the U3042 cell line.

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)參考
細(xì)胞系：U251
方法： For the monotherapy treatment, the stock solution concentration was 20 mM for AZD3759, Foretinib, and Dacomitinib, 50 mM for Chlorpromazine, 10 mM for Disulfiram, and 250 mM for Temozolomide.
濃度：10 mM
處理時(shí)間：24 h.
參考文獻(xiàn)：Biomed Pharmacother. 2025 Jul;188:118228.
* 上述方法來自公開文獻(xiàn)，僅供相同目的實(shí)驗(yàn)參考。如實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、材料、方法不同，�?qǐng)參考其他文獻(xiàn)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)參考
動(dòng)物模型：BALB/c mice 
配制：Saline
劑量：50 mg/kg
給藥處理：Intraperitoneal injection
參考文獻(xiàn)：Int J Antimicrob Agents. 2019 Jun;53(6):709-715.  
* 上述方法來自公開文獻(xiàn)，僅供相同目的實(shí)驗(yàn)參考。如實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、材料、方法不同，�?qǐng)參考其他文獻(xiàn)。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的工作液，建議現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過超聲和（或）加熱的方式助溶。
切勿一次性將產(chǎn)品全部溶解。
建議制定動(dòng)物給藥及實(shí)驗(yàn)方案時(shí)，盡量參考已發(fā)表的相關(guān)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)（溶劑種類及配比眾多，簡(jiǎn)單地溶解目的化合物，并不能解決動(dòng)物給藥依從性、體內(nèi)生物利用度、組織分布等相關(guān)問題，未必能保證目的化合物在動(dòng)物體內(nèi)充分發(fā)揮生物學(xué)效用）。

參考文獻(xiàn)
[1] Zhao, A.; Wu, Z.-Q.; Pollack, M.; et al. DISULFIRAM INHIBITS TNF-α-INDUCED CELL DEATH. Cytokine 2000, 12 (9), 1356-1367.
[2] Wickström, M.; Danielsson, K.; Rickardson, L.; et al. Pharmacological profiling of disulfiram using human tumor cell lines and human tumor cells from patients. 2007, 73 (1), 25-33.
[3] Yip, N.; Fombon, I.; Liu, P.; et al. Disulfiram modulated ROS–MAPK and NFκB pathways and targeted breast cancer cells with cancer stem cell-like properties. 2011, 104 (10), 1564-1574.
[4] Thakare, R.; Shukla, M.; Kaul, G.; et al. Repurposing disulfiram for treatment of Staphylococcus aureus infections. International journal of antimicrobial agents 2019, 53 (6), 709-715.
[5] Taranta, A.; Elmonem, M. A.; Bellomo, F.; et al. Benefits and Toxicity of Disulfiram in Preclinical Models of Nephropathic Cystinosis. Cells 2021, 10 (12).