Absin轉(zhuǎn)染試劑的分類、特點(diǎn)及應(yīng)用

轉(zhuǎn)染（Transfection）是將外源性基因（DNA或RNA）導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的一種技術(shù)。隨著基因和蛋白功能研究發(fā)展，轉(zhuǎn)染已成為實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常運(yùn)用的基本方法。

根據(jù)導(dǎo)入的核酸在宿主細(xì)胞中的時(shí)間長(zhǎng)短，可以分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染（transient transfection）：指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細(xì)胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組，因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其子代細(xì)胞的基因組中會(huì)同時(shí)保留轉(zhuǎn)染的DNA。

我們今天來介紹下國(guó)產(chǎn)absin 的轉(zhuǎn)染試劑

一、質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染
Lipofect5000 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑。它是在研究了國(guó)外同類產(chǎn)品性能的基礎(chǔ)上開發(fā)的一款高性能通用型核酸轉(zhuǎn)染試劑，適用于將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

特點(diǎn)：

1. 可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞和部分懸浮細(xì)胞等
2. 配置有Trans Buffer，可完全替代無血清培養(yǎng)基，能有效提高質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率，促進(jìn)蛋白表達(dá)
3. 極低的細(xì)胞毒性：采用可降解生物納米材料
4. 在貼壁培養(yǎng)的AAV293細(xì)胞中，Lipofect5000質(zhì)粒DNA（EGFP質(zhì)粒）的轉(zhuǎn)染陽性率可高達(dá)90%以上
5. 較難轉(zhuǎn)染的7細(xì)胞，Lipofect5000的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染陽性率可高達(dá)70%

應(yīng)用：
適用的細(xì)胞系：HeLa，Huh-7，CCD-14Br，SBC-1,A-172，NB-1，COS-7,293T,人肝細(xì)胞，原代大鼠肝細(xì)胞，雞胚胎心肌細(xì)胞，Raw264.7，Neuro-2a，BV2，SH-SY5Y等。

二、RNA轉(zhuǎn)染
1、細(xì)胞
abs60621 easyLNP™ Plus 通用型RNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒

特點(diǎn)：
1.轉(zhuǎn)染機(jī)制獨(dú)特：該脂質(zhì)納米粒與 RNA 混合實(shí)現(xiàn)瞬時(shí)包封，利用 LNP 獨(dú)特的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)和內(nèi)體逃逸機(jī)制，實(shí)現(xiàn)對(duì) RNA 高效遞送。
2.操作方便：該產(chǎn)品與 RNA 形成復(fù)合物后，無需靜置孵育，可立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)。轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基，操作簡(jiǎn)單。
3.安全：本品經(jīng) 0.2μm 微孔濾膜過濾，質(zhì)量穩(wěn)定，采用新型生物可降解脂質(zhì)材料，細(xì)胞毒性極低，同時(shí)不含乙醇，可避免乙醇導(dǎo)致的細(xì)胞失活。

應(yīng)用：
適用于常用細(xì)胞 mRNA 和短鏈 RNA 轉(zhuǎn)染

使用 96 孔板，按每孔 100ng eGFP circRNA 進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染，24h 后進(jìn)行熒光拍攝

特點(diǎn)：

1. 操作方便快捷：無需特定包封儀器，一步即可實(shí)現(xiàn) LNP 包封，無需孵育。
2. 轉(zhuǎn)染高效：微量樣品的包封率可達(dá) 80%以上，轉(zhuǎn)染效果可媲美專業(yè)設(shè)備包封的 LNP。
3. 安全：本品不含乙醇，經(jīng) 2μm 微孔濾膜過濾，質(zhì)量穩(wěn)定，采用新型生物可降解脂質(zhì)材料，對(duì)動(dòng)物毒性極低。

應(yīng)用：
適用于動(dòng)物 mRNA 轉(zhuǎn)染 局部作用

瘤內(nèi)注射：實(shí)現(xiàn) RNA 在腫瘤組織的高效表達(dá)