HRP標記二抗助力揭示LCN2與TWEAK協(xié)同促進銀屑病進展新機制研究

銀屑病作為影響全球超 6000 萬人的慢性炎癥性皮膚病，其角質形成細胞異常增殖、炎癥細胞浸潤的核心機制仍待深入挖掘。近日，《Cellular & Molecular Immunology》（2025, 22:760–775）發(fā)表了一項突破性研究，揭示了脂質運載蛋白 2（LCN2）與腫瘤壞死因子樣弱凋亡誘導因子（TWEAK）通過 Fn14 受體協(xié)同促進銀屑病進展的全新機制。在這項高質量研究中，Absin 的 HRP 標記二抗為蛋白表達檢測提供了可靠支持，助力科研團隊解鎖銀屑病發(fā)病的關鍵調控網絡。

文獻標題：Synergistic effects of LCN2 and TWEAK on the progression of psoriasis
發(fā)表期刊：Cellular & Molecular Immunology（IF 19.8）
DOI：https://doi.org/10.1038/s41423-025-01292-9
核心試劑：Goat anti-Rabbit IgG-HRP Antibody

1. 第一步：臨床樣本 + 公共數據，鎖定三者表達相關性
研究首先通過銀屑病患者皮膚 / 血清樣本（n=7 皮膚，n=12 血清）與健康對照（n=4 皮膚，n=10 血清）對比，結合公共單細胞 RNA 測序（scRNA-seq）數據（Cheng et al.、Reynolds et al.），發(fā)現銀屑病病灶中 LCN2、TWEAK、Fn14 表達顯著升高，且在咪喹莫特（IMQ）誘導的銀屑病小鼠模型中驗證了這一趨勢。

2. 第二步：細胞實驗，驗證分子間直接作用與功能
為明確三者的相互作用，團隊通過：

• 表面等離子體共振（SPR）+ 免疫共沉淀（Co-IP）：直接證實 LCN2 與 Fn14 存在特異性結合；
• 細胞刺激實驗：分別在角質形成細胞（HFKs、HaCaT）、巨噬細胞（J774A.1）、中性粒細胞中探究 LCN2/TWEAK 的功能，例如 LCN2 促進巨噬細胞 M1 分化、TWEAK 上調中性粒細胞 LCN2 等。

3. 第三步：基因敲除小鼠，體內驗證關鍵分子必要性
團隊構建 Lcn2⁻/⁻、Fn14⁻/⁻基因敲除小鼠，結合 IMQ 誘導模型，觀察到：

• Lcn2⁻/⁻小鼠皮膚紅斑、脫屑減輕，角質形成細胞增殖標志物（KRT5、KRT14）下調；
• Fn14⁻/⁻小鼠可阻斷 LCN2 與 TWEAK 的促表皮增生作用，MAPK 通路激活減弱。

4. 第四步：組學分析，挖掘下游調控網絡
通過 bulk RNA-seq（角質形成細胞、敲除小鼠皮膚）和 iTRAQ 蛋白組學，進一步確認 LCN2-TWEAK-Fn14 軸可協(xié)同激活炎癥因子（IL-6、IL-23A）、趨化因子（CXCL5、CCL2）及 MAPK 通路，為機制提供轉錄組 / 蛋白組層面證據。

核心成果	關鍵證據	圖片
LCN2 與 Fn14 直接結合，是協(xié)同作用的 “分子基礎”	SPR 顯示兩者特異性結合，Co-IP 驗證相互作用
LCN2 雙向調控炎癥細胞：促巨噬細胞 M1 分化 + 角質形成細胞炎癥	LCN2 刺激后，巨噬細胞 iNOS（M1 標志物）升高、TWEAK 分泌增加；角質形成細胞 p-ERK1/2 激活
TWEAK 反向上調中性粒細胞 LCN2，形成局部 “炎癥放大環(huán)”	TWEAK 刺激后，小鼠中性粒細胞 LCN2 mRNA 及分泌量顯著增加
LCN2+TWEAK 協(xié)同增強角質形成細胞炎癥反應	共刺激后，IL-6、CXCL10 等炎癥因子表達量遠高于單獨刺激，MAPK 通路激活更顯著
Lcn2/Fn14 敲除可緩解銀屑病癥狀	Lcn2⁻/⁻小鼠血清 TWEAK 降低、表皮厚度變�。籉n14⁻/⁻小鼠 KRT5/KRT14 表達下調

1. 場景 1：巨噬細胞功能驗證 —— 捕捉 TWEAK/Fn14 表達變化
研究團隊在 J774A.1 巨噬細胞中檢測 LCN2 刺激后 Fn14、TWEAK、p-NFκB P65 等蛋白的表達，以驗證 LCN2 對巨噬細胞的調控作用。Absin 二抗通過特異性結合抗 Fn14/TWEAK 一抗，利用 HRP 催化底物發(fā)光，精準放大蛋白信號，清晰呈現 “LCN2 濃度依賴性升高 Fn14/TWEAK 表達” 的趨勢。

2. 場景 2：角質形成細胞 MAPK 通路激活 —— 精準檢測磷酸化蛋白
MAPK 通路（ERK1/2、JNK、p38）的激活是 LCN2-TWEAK 協(xié)同促炎癥的關鍵。在檢測角質形成細胞中 p-ERK1/2、p-JNK 等磷酸化蛋白時，Absin 二抗憑借高特異性（無非特異性條帶）和高靈敏度（可檢測低豐度磷酸化蛋白），準確反映了 “LCN2 刺激后通路蛋白磷酸化水平隨時間 / 濃度升高” 的動態(tài)變化，為通路激活提供了直接證據。

3. 場景 3：敲除小鼠皮膚蛋白驗證 —— 可靠區(qū)分表達差異
在 Lcn2⁻/⁻、Fn14⁻/⁻小鼠皮膚樣本中，研究需對比野生型（WT）與敲除型的角蛋白（KRT5、KRT14、KRT17）、信號蛋白（p-ERK1/2）表達差異。Absin 二抗的信號穩(wěn)定性確保了 “敲除后蛋白表達下調” 的趨勢可重復檢測，例如 Lcn2⁻/⁻小鼠皮膚中 KRT6、KRT16 表達顯著降低，為 “LCN2 調控角質形成細胞增殖” 提供了體內實驗依據。