蛋白標簽的分類、特性、適用實驗及選擇標簽的注意事項介紹

蛋白標簽（protein tag）是指利用DNA體外重組技術(shù)，與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。應(yīng)用場景主要用于蛋白質(zhì)檢測如：WB、ELISA、IP等。

根據(jù)不同的“穿搭風格”又分為：親和標簽，表位標簽，熒光標簽。

親和標簽類
親和標簽指在重組蛋白的N端或C端添加的一段短肽，通常包含幾個到幾百個氨基酸，主要用于蛋白質(zhì)的純化或提高其溶解度，包括：His、GST、MBP、Strep-tag II、SUMO、Halo等。

寶貝名稱：His
寶貝詳情：0.84kDa（大�。�；His-His-His-His-His-His（標簽序列）；尺寸最小，通用性強，對蛋白影響小，能與多種金屬離子發(fā)生特殊的相互作用（優(yōu)點）；特異性低，純化純度低（缺點）；蛋白純化（應(yīng)用）

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寶貝名稱：GST
寶貝詳情：26kDa（大�。�；211種氨基酸（序列）；可增強蛋白可溶性，減少蛋白降解，促進表達（優(yōu)點）；蛋白較大可能影響目標蛋白功能（缺點）；蛋白融合表達和純化，pull-down檢測（應(yīng)用）

寶貝名稱：MBP
寶貝詳情：40kDa（大�。�；大腸桿菌K12的malE基因編碼，包含369個氨基酸（序列）；增加目標蛋白的溶解度和表達水平（優(yōu)點）；標簽非常大對目標蛋白干擾較強，功能研究需通過酶切去除（缺點）；表達易形成包涵體的蛋白（應(yīng)用）

寶貝名稱：Strep-tag II
寶貝詳情：1.06kDa（大�。�；WSHPQFEK（序列）；特異性強、洗脫條件溫和、蛋白活性保持良好，適合對蛋白結(jié)構(gòu)和功能有高要求的實驗（優(yōu)點）；成本高（缺點）；純化目標蛋白表達量低或背景復雜的體系（應(yīng)用）

寶貝名稱：SUMO
寶貝詳情：11.2kDa（大小）；97個氨基酸（序列）；顯著提高融合蛋白的可溶性和穩(wěn)定性增強表達（優(yōu)點）；親和純化時要與其它標簽聯(lián)用（缺點）；親和層析純化，提高蛋白產(chǎn)量（應(yīng)用）

寶貝名稱：Halo
寶貝詳情：33kDa；395個氨基酸（序列）；可以與多種熒光配基或生物素快速形成穩(wěn)定的共價結(jié)合，熒光強度強，特異性高（優(yōu)點）；標簽較大（缺點）；檢測和親和結(jié)合或固相化固定目的蛋白（應(yīng)用）

表位標簽類
表位標簽往往是短肽序列，可以通過特定的抗體與表位結(jié)合，實現(xiàn)對目標蛋白質(zhì)的精準定位和檢測。它們在免疫沉淀、WB、免疫熒光和染色質(zhì)免疫沉淀等應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用‌。最常用的表位標簽有Flag、HA、Myc、V5等。

寶貝名稱：Flag
寶貝詳情：1.01kDa（大�。�；DYKDDDDK（序列）；具有很強的親和力和特異性，可用于快速、高效地檢測和純化目標蛋白（優(yōu)點）；需要高成本的抗Flag親和柱（缺點）；高純度純化和免疫沉淀（應(yīng)用）

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寶貝名稱：HA
寶貝詳情：1.1kDa（大�。�；YPYDVPDYA（序列）；對外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小，抗體普及特異性高（優(yōu)點）；純化應(yīng)用較少（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光和細胞內(nèi)蛋白表達檢測（應(yīng)用）

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寶貝名稱：c-Myc
寶貝詳情：1.2kDa（大小）；EQKLISEEDL（序列）；高特異性的抗Myc單克隆抗體，分子量�。▋�(yōu)點）；需低pH洗脫，影響蛋白活性（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光和細胞內(nèi)蛋白表達檢測（應(yīng)用）

寶貝名稱：V5
寶貝詳情：1kDa（大�。�；GKPIPNPLLGLDST （序列）；抗體特異性好，分子量�。▋�(yōu)點）；應(yīng)用范圍小于HA和myc（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光（應(yīng)用）

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熒光標簽類
熒光標簽可用于活細胞和死細胞檢測，最常用的熒光蛋白包括綠色熒光蛋白、橙色熒光蛋白、紅色熒光蛋白和黃色熒光蛋白。它們被廣泛用于影像學研究，如細胞定位和共表達實驗。

• 參考往期推文鏈接：
  一文揭秘！綠色熒光蛋白的前世今生
  超詳細！熒光蛋白大盤點

基因組標簽計劃
中國科學院分子細胞科學卓越創(chuàng)新中心基因組標簽計劃（GTP）研發(fā)中心通過單倍體干細胞介導的半克隆技術(shù)獲得了數(shù)百種標簽小鼠模型。通過為所感興趣的蛋白賦予標簽進而通過識別標簽研究蛋白質(zhì)的行為，研究者們可以高效便捷的確定蛋白質(zhì)的表達位置和功能互作，追蹤和分析蛋白質(zhì)在小鼠機體內(nèi)的動態(tài)行為。

GTP標簽小鼠模型可在蛋白質(zhì)互作，定位等基因功能研究和生物醫(yī)藥研發(fā)中發(fā)揮重要作用。標簽小鼠品系為中國科學院分子細胞科學卓越創(chuàng)新中心所有，南模生物代為分發(fā)。

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文末溫馨小提示：任何一個融合標簽都不是萬能的，沒有哪一個標簽適合所有蛋白的表達，選擇標簽必須考慮蛋白的性質(zhì)和實驗需求。了解融合標簽的特性，選擇合適的標簽，才能讓重組蛋白表達事半功倍。

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