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八種常見(jiàn)類型抗體分述

瀏覽次數(shù):616 發(fā)布日期:2024-5-7  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
抗體(antibody,Ab)是機(jī)體在體內(nèi)存在的外來(lái)分子、微生物等抗原物質(zhì)刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulins,Ig),主要分布在血清中,也分布于組織液及外分泌液中。下面對(duì)八種常見(jiàn)抗體分述:

1、流式抗體

流式抗體是經(jīng)過(guò)流式實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的,一般是針對(duì)單一種屬的直接帶熒光標(biāo)記的單克隆抗體,檢測(cè)的是單細(xì)胞懸液,結(jié)果通過(guò)流式細(xì)胞儀分析。

2、免疫熒光抗體

免疫熒光抗體是經(jīng)過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的單克隆或者多克隆抗體,抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記,通過(guò)FITC、CY3等熒光標(biāo)記二抗顯色,結(jié)果通過(guò)熒光顯微鏡觀察。


3、免疫組化抗體

免疫組化抗體是經(jīng)過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的單克隆或者多克隆抗體,抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記,通過(guò)酶標(biāo)二抗催化底物顯色,結(jié)果通過(guò)普通光學(xué)顯微鏡觀察。


4、熒光標(biāo)記抗體

熒光標(biāo)記抗體一般指的是帶FITC、CY3等熒光標(biāo)記的二抗,用于免疫熒光實(shí)驗(yàn)中識(shí)別對(duì)應(yīng)的一抗,或者FITC、CY3標(biāo)記的熒光一抗,可用于流式或免疫熒光實(shí)驗(yàn),只有經(jīng)過(guò)流式驗(yàn)證的熒光抗體才能稱為流式抗體。


5、普通抗體

普通抗體一般指不帶標(biāo)記的單克隆或者多克隆抗體,反應(yīng)性和應(yīng)用一般較廣,能做多個(gè)種屬的多種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,最后實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察需要依賴酶催化底物顯色或者發(fā)出熒光后檢測(cè),或者FITC、CY3等熒光標(biāo)記的二抗發(fā)出熒光檢測(cè)。


6、封閉抗體

封閉抗體是流式實(shí)驗(yàn)中用于特異性封閉細(xì)胞表面Fc受體的,不帶熒光標(biāo)記的純抗,如檢測(cè)小鼠的細(xì)胞樣本,封閉抗體為Purified Anti-Mouse CD16/32 Monoclonal Antibody。封閉抗體的作用是減少流式抗體染色過(guò)程中的非特異性染色,如果需檢測(cè)的是某些表面表達(dá)FC受體較豐富的細(xì)胞,如巨噬細(xì)胞,染色前必須使用封閉抗體。


7、WB抗體

流式抗體是經(jīng)過(guò)流式實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的,一般是針對(duì)單一種屬的直接帶熒光標(biāo)記的單克隆抗體,檢測(cè)的是單細(xì)胞懸液,結(jié)果通過(guò)流式細(xì)胞儀分析。

WB抗體是經(jīng)過(guò)WB實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的單克隆或者多克隆抗體,抗體上面一般不帶標(biāo)記,通常情況下是通過(guò)HRP酶標(biāo)二抗催化底物ECL發(fā)出熒光,通過(guò)曝光后顯出條帶。


8、二抗

二抗一般不能直接識(shí)別到抗原,需要通過(guò)結(jié)合能識(shí)別目標(biāo)蛋白的一抗間接偶聯(lián)到目標(biāo)蛋白上。針對(duì)不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用類型,二抗上面可以選擇不同的標(biāo)記,如做WB和IHC實(shí)驗(yàn),通常情況下選擇帶HRP酶的二抗,做IF實(shí)驗(yàn),一般選擇帶FITC、CY3等熒光基團(tuán)的二抗,也有些二抗標(biāo)記biotin,biotin自身并不帶熒光集團(tuán),也不能催化底物顯色或者發(fā)出熒光,因此選擇biotin標(biāo)記的二抗,還需要選擇HRP酶或者熒光標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)到生物素上,進(jìn)一步反應(yīng)才能檢測(cè)到目標(biāo)蛋白。
發(fā)布者:上海博湖生物科技有限公司
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