宿主蛋白殘留(HCP)分析服務(wù)

許多生物藥物（抗體、疫苗、重組蛋白等）的制備還是通過生物體系合成的。盡管采用多種純化方式，生物藥物中還是可能會有微量的宿主蛋白殘留（HCP）。生物制品中殘留的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）作為外源蛋白可能會在不同程度上引發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答，最終導(dǎo)致過敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)，因此必須建立合適的檢測HCP的方法來監(jiān)控生物制品的質(zhì)量。

ELISA是目前應(yīng)用最廣泛的HCP檢測方法。該技術(shù)相對簡單、精度良好，方便設(shè)定控制范圍和建立技術(shù)規(guī)范�！吨腥A人民共和國藥典》2010年版三部中的HCP檢測均是要求采用酶聯(lián)免疫法測定。在該檢測方法中，用存在于生物制品中的HCP作為免疫原生產(chǎn)出的抗體質(zhì)量至關(guān)重要。無論是商品化ELISA試劑盒，還是自制的多克隆抗體，如果特異性和適用性不夠高，會帶來漏檢HCP的風(fēng)險，從而對生物制品質(zhì)量安全帶來風(fēng)險。

針對精準(zhǔn)檢測生物藥物可能殘留的宿主蛋白，百泰派克生物提供基于2D DIGE的HCP抗體有效性檢測服務(wù)。我們首先對宿主細(xì)胞全蛋白進(jìn)行提取，將全蛋白和全蛋白抗體分別用不同的熒光標(biāo)記。然后采用2D技術(shù)高效分離宿主細(xì)胞全蛋白，在激光掃描儀中掃描2D膠，得到該通道上宿主細(xì)胞全蛋白掃描圖。再將2D膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至膜上，將膜與全蛋白抗體孵育，然后將膜使用激光掃描儀掃描。由于抗體與抗原的結(jié)合，因此可以得到對應(yīng)通道上抗體對應(yīng)蛋白的掃描圖。將兩張掃描圖進(jìn)行對比，通過軟件的分析，就可以確定抗體的對總蛋白的覆蓋度。

高靈敏度：2D-DIGE所用的樣品量遠(yuǎn)小于2D考染，這對于樣品量少的樣品是很好的方法。
寬動態(tài)范圍：2D DIGE的高靈敏度和寬動態(tài)范圍有利于檢測到含量高或者極低的蛋白質(zhì)，檢測范圍高于2D，結(jié)果更準(zhǔn)確。
操作簡單，重復(fù)性高：在傳統(tǒng)的2D檢測中，需要跑兩塊膠，一塊用于HCP總蛋白的染色，另一塊用于抗體免疫蛋白的染色，然后用兩塊膠的結(jié)果進(jìn)行比較。而2D DIGE只需要在同一塊膠上操作，避免了多次跑膠和比較之間的誤差

宿主蛋白殘留(HCP)分析流程

經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員，可以提供從實驗設(shè)計、樣品檢測、數(shù)據(jù)分析等全套專業(yè)服務(wù)；
流程明確，減少不必要的樣品和時間浪費，交付時間短

HCP蛋白：客戶可以提供菌體沉淀或者細(xì)胞，我們來提取總蛋白，也可以提供已經(jīng)提取好的總蛋白。菌體沉淀不少于1g；細(xì)胞沉淀不少于1×10^7；蛋白溶液或者凍干粉都可以，總量大于1mg，溶液濃度大于1ug/ul。
抗體：抗體總量大于50ug。

2D-DIGE檢測案例展示

2D-DIGE檢測案例示例

生物制藥分析
2D-DIGE定量蛋白質(zhì)組學(xué)