進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè)時(shí),常常會(huì)用到終點(diǎn)法如MTT、CCK8等化合物,來評(píng)估藥物/毒素等對(duì)細(xì)胞存活率的影響。以MTT為例,活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶,能使外源性的MTT還原為水不溶性的藍(lán)色結(jié)晶甲臜,并沉積在細(xì)胞中,死細(xì)胞無此功能。用二甲基亞砜(DMSO)溶解細(xì)胞中的甲臜,用酶標(biāo)儀在490nm處測(cè)定其吸光值,可以間接反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)量。作為檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法,終點(diǎn)法靈敏度高,成本低,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、藥物篩選、生物活性因子檢測(cè)等。
同時(shí)終點(diǎn)法也存在一定弊端,如操作步驟多,反應(yīng)耗時(shí)長(zhǎng),采樣時(shí)間點(diǎn)有限,容易錯(cuò)過細(xì)胞生理變化過程中的重要事件等,其中影響最大的是細(xì)胞在檢測(cè)時(shí)需要被致死處理,其生物學(xué)變化過程被干擾打斷,無法用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),所獲數(shù)據(jù)缺乏連貫性。例如在同一實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)者希望獲取不同濃度毒素作用下的干細(xì)胞存活率,并需要觀測(cè)某一濃度毒素作用下的干細(xì)胞分化過程。又如在藥化實(shí)驗(yàn)中,既希望檢測(cè)細(xì)胞活力,又能保證在獲取到相應(yīng)的細(xì)胞增殖曲線數(shù)據(jù)后,同批細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的蛋白提取操作。這些都需要在細(xì)胞活力檢測(cè)時(shí),采用無損檢測(cè)的方式完成細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn),以及進(jìn)行后續(xù)的各項(xiàng)操作。
zenCELL owl 實(shí)時(shí)活細(xì)胞成像分析儀可以很好的滿足這類需求。該系統(tǒng)基于無標(biāo)記、非侵入方法,原位實(shí)時(shí)記錄細(xì)胞生長(zhǎng)的動(dòng)態(tài)變化過程,以及定量的分析數(shù)據(jù)。zenCELL owl小巧易用,是每個(gè)細(xì)胞間都值得擁有的活細(xì)胞監(jiān)測(cè)設(shè)備。以下是采用zenCELL owl進(jìn)行活細(xì)胞無損增殖監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)視頻,監(jiān)測(cè)間隔為5min,監(jiān)測(cè)總時(shí)長(zhǎng)為2天。細(xì)胞在完成數(shù)據(jù)采集后,還可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。
zenCELL owl進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)
采用zenCELL owl進(jìn)行藥化實(shí)驗(yàn),與傳統(tǒng)終點(diǎn)法相比:
1. 實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)潔,只需細(xì)胞鋪板,用藥物處理后,置于培養(yǎng)箱內(nèi),用zenCELL owl進(jìn)行實(shí)時(shí)活細(xì)胞監(jiān)測(cè),通過電腦終端采集數(shù)據(jù)并查看細(xì)胞動(dòng)態(tài)。中間除更換培養(yǎng)液等常規(guī)必須操作外,無需任何其他操作,最大限度保證細(xì)胞在培養(yǎng)箱內(nèi)原位生長(zhǎng)不受外界影響。
2. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)豐富,如每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞數(shù)量(貼壁、脫壁及總細(xì)胞數(shù))和細(xì)胞匯合度,每個(gè)孔對(duì)應(yīng)的細(xì)胞數(shù)量及細(xì)胞匯合度的曲線,24孔通量自動(dòng)采集數(shù)據(jù)同時(shí)支持分組和分組數(shù)據(jù)的比對(duì),并可導(dǎo)出細(xì)胞生長(zhǎng)的動(dòng)態(tài)視頻。
3. 實(shí)驗(yàn)過程輕松簡(jiǎn)單,整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,每孔的細(xì)胞數(shù)據(jù)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置采集間隔, 實(shí)現(xiàn)高頻次數(shù)據(jù)采集,夜晚,周末也可持續(xù)觀測(cè)。
4. 在整個(gè)數(shù)據(jù)采集期間,細(xì)胞無需進(jìn)行處理,數(shù)據(jù)采集完成后,可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn),如誘導(dǎo)分化,提取蛋白等,保證了數(shù)據(jù)的連續(xù)穩(wěn)定,同時(shí)更高效 。
5. 設(shè)備可連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)箱內(nèi)運(yùn)行,性能穩(wěn)定可靠,滿足實(shí)驗(yàn)周期需求。
zenCELL owl進(jìn)行細(xì)胞藥化/增殖/增殖抑制實(shí)驗(yàn),可一次性獲取豐富的數(shù)據(jù)結(jié)果:通過視頻可清晰的體現(xiàn)細(xì)胞在藥物處理后的形態(tài)以及數(shù)量變化,通過分組對(duì)比數(shù)據(jù)及生長(zhǎng)曲線可對(duì)細(xì)胞增殖/增殖抑制進(jìn)行定量分析,同時(shí)細(xì)胞無需致死處理,同一批細(xì)胞可直接進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn),不僅保證數(shù)據(jù)結(jié)果的連貫性,同時(shí)也可簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程,減少工作量。
德國(guó)InnoME公司的zenCELL owl 實(shí)時(shí)活細(xì)胞成像分析儀,基于無標(biāo)記、非侵入方法,原位記錄細(xì)胞實(shí)時(shí)生長(zhǎng)和定量的圖片、視頻、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)。
* 體型小巧,耐溫耐濕,可在培養(yǎng)箱內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)工作;
* 24個(gè)獨(dú)立通道,對(duì)24個(gè)視野連續(xù)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和圖像獲取;
* 實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖/增殖抑制、細(xì)胞劃痕/遷移/侵襲,細(xì)胞吞噬/殺傷等諸多活細(xì)胞行為動(dòng)態(tài)過程、分組對(duì)比的監(jiān)測(cè);
* 廣泛用于細(xì)胞藥化實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒理研究、藥物研發(fā)、腫瘤免疫研究、細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、類器官研究等領(lǐng)域。