前言
光學(xué)顯微鏡作為生命科學(xué)研究中十分基礎(chǔ)也是核心的設(shè)備之一,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、材料科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究等多個(gè)領(lǐng)域。選擇一臺(tái)適合實(shí)驗(yàn)室需求的科研級(jí)顯微鏡不僅直接影響研究成果的質(zhì)量,也是實(shí)驗(yàn)室資源合理配置的關(guān)鍵。
選擇科研級(jí)顯微鏡時(shí),需綜合考慮研究需求、樣本特性、分辨率、預(yù)算與維護(hù)等多方面因素。以下是需要重點(diǎn)關(guān)注的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)和實(shí)際應(yīng)用因素。
樣本特性
考慮樣本是否為活體、大小、厚度等特性;罴(xì)胞觀察需選擇倒置熒光顯微鏡和活細(xì)胞孵育裝置;大樣本和厚樣本則需要能夠自動(dòng)掃描XYZ軸的顯微鏡。
成像模式
根據(jù)研究需求選擇合適的成像模式,如明場(chǎng)成像、熒光成像、共聚焦成像、相差成像等,不同模式提供不同的信息維度。
分辨率要求
根據(jù)研究對(duì)象的尺度和觀察的目的確定所需分辨率,如只看熒光表達(dá)情況,不需要太高的分辨率,但要看細(xì)胞器結(jié)構(gòu)則需要極高的分辨率。
預(yù)算與維護(hù)
光學(xué)顯微鏡雖然大體看起來(lái)差不多,但是模塊化的設(shè)備和一體機(jī)在后期維護(hù)上存在很大差異,一體機(jī)由于集成化高,后期用戶(hù)自己就可以維護(hù),無(wú)需廠(chǎng)家上門(mén),能夠節(jié)省不少費(fèi)用,并且通常比較操作簡(jiǎn)單,人員的培訓(xùn)也不復(fù)雜,大大節(jié)約了時(shí)間和管理成本。
下面我們通過(guò)幾個(gè)問(wèn)題,來(lái)一起看看究竟如何選擇。
你的觀察樣本是什么
選擇顯微鏡時(shí)要考慮的首要因素就是樣本的特性,或者說(shuō)是耗材特性,因?yàn)椴F涂装宓暮穸仁峭耆灰粯拥,玻片通常?jīng)過(guò)蓋玻片觀察,很薄,正置可以進(jìn)行觀察,而孔板、培養(yǎng)皿等培養(yǎng)的細(xì)胞樣本則只能通過(guò)倒置,即物鏡在樣本下方,才能提供足夠的空間和物鏡與樣本所需的接近度。

艾普拜正倒置一體系列顯微鏡完美解決不同樣本不同的觀察需求,正置與倒置自由切換,一臺(tái)滿(mǎn)足您實(shí)驗(yàn)室95%的樣本觀察。

選擇適合你研究的成像模式
明確能夠解決你科研需求的觀察方式,如明場(chǎng)觀察、相差觀察、熒光觀察等,選擇合適的觀察方式,才能正確解決你的問(wèn)題,獲取符合要求的圖像。

你在什么維度上進(jìn)行觀察
常規(guī)顯微鏡往往只在平面進(jìn)行單視野觀察,即XY維度手動(dòng)觀察,但實(shí)際科研實(shí)驗(yàn)中,由于物鏡的景深限制、切片的技術(shù)限制、細(xì)胞的大小、觀察的需求等多種因素,樣本往往存在厚度,這會(huì)導(dǎo)致我們?cè)谶M(jìn)行常規(guī)觀察時(shí)模糊不清。

艾普拜Revolve Generation 2正倒置一體熒光顯微鏡,具備Z軸層掃功能,可以為您提供大景深圖像,解決因樣本不平或較厚導(dǎo)致的模糊不清,為您提供一張清晰圖像。
當(dāng)您想要獲取整個(gè)切片或者整個(gè)孔板的所有信息時(shí),XY軸的電動(dòng)化則必不可少,如果通過(guò)手動(dòng)去拍,不僅拍攝復(fù)雜時(shí)間長(zhǎng),還會(huì)漏掉很多視野和信息。

艾普拜Revolution全自動(dòng)多功能顯微鏡具備超高速XY電動(dòng)載物臺(tái),能夠快速拼接獲取整個(gè)樣本的圖像。
還有一個(gè)維度主要針對(duì)活體成像——時(shí)間維度T。當(dāng)然,對(duì)于活細(xì)胞的成像需要保證系統(tǒng)的穩(wěn)定性和細(xì)胞生長(zhǎng)所需的環(huán)境。因此自動(dòng)掃描、自動(dòng)聚焦、活細(xì)胞孵育裝置都是必不可少的。

艾普拜Revolution和Confocal均可加裝活細(xì)胞孵育裝置,為活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間觀察提供細(xì)胞生長(zhǎng)條件。
更高的分辨率和厚樣本3D信息
厚樣本成像對(duì)于寬場(chǎng)顯微鏡來(lái)說(shuō)是一個(gè)挑戰(zhàn),因?yàn)檎麄(gè)樣本都會(huì)被照明激發(fā),觀察的目標(biāo)區(qū)域可能因?yàn)閬?lái)自失焦面的額外光線(xiàn)的干擾。目前主流的解決方式為使用軟件算法進(jìn)行優(yōu)化,以及使用共聚焦顯微鏡進(jìn)行成像,前者為數(shù)字化提高分辨率,算法至關(guān)重要,但算法優(yōu)化的問(wèn)題,會(huì)導(dǎo)致結(jié)果不一定準(zhǔn)確。而共聚焦顯微鏡通過(guò)共軛裝置,物理上隔絕非焦面雜光的干擾,使圖像更清晰。
另外,對(duì)于3D重構(gòu),焦平面雜光干擾會(huì)顯著降低Z軸的分辨率。所以,一臺(tái)便捷、清晰的激光轉(zhuǎn)盤(pán)共聚焦顯微鏡能夠又快又好的解決問(wèn)題。

艾普拜激光轉(zhuǎn)盤(pán)共聚焦,高速、高清、操作簡(jiǎn)單、低光毒性,對(duì)于活細(xì)胞成像、易淬滅樣本、厚樣本3D重構(gòu)具備極佳效果。
誰(shuí)來(lái)使用顯微鏡
顯微鏡的使用范圍非常廣,且不均勻,尤其是高校等科研單位,經(jīng)常會(huì)有人員變動(dòng),學(xué)生一波接一波,所以需要經(jīng)常進(jìn)行操作培訓(xùn),不僅學(xué)生學(xué)習(xí)困難,很難調(diào)出理想圖像,對(duì)于管理的負(fù)責(zé)人來(lái)說(shuō)也是非常麻煩的,甚至需要親自來(lái)操作,工作量非常大。而艾普拜系列顯微鏡,操作十分簡(jiǎn)單,用戶(hù)僅需簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可自己進(jìn)行調(diào)節(jié)拍攝,無(wú)需專(zhuān)人進(jìn)行操作。