Chloroquine氯喹作用機制及其應用案例分享

 
Chloroquine 氯喹作用機制與應用介紹

自噬與凋亡：氯喹廣泛應用于體外實驗中，通過提高溶酶體 pH 值來阻斷自噬小體的降解，從而抑制自噬通量。這種機制幫助研究人員確定自噬在各種細胞環(huán)境中的作用，尤其是在癌癥研究中，它常與其他抗癌藥物聯(lián)合使用以增強其效果。

細胞生物學與病毒學：作為一種弱堿，氯喹在酸性細胞內區(qū)室（如內體和溶酶體）中積累，增加其 pH 值。這種干擾細胞器酸化的作用被用于研究中介導的內體過程和病毒進入細胞，因為許多病毒需要低 pH 值進行融合和復制。

抗原呈遞與免疫學：在免疫學研究中，氯喹通過干擾這些功能所需的酸性環(huán)境來抑制樹突狀細胞、B 細胞和巨噬細胞中的抗原處理和呈遞。它還調節(jié)細胞因子產生和 Toll 樣受體（TLR）信號通路。

DNA 相互作用：在分子生物學中，氯喹在高濃度下能嵌入雙鏈 DNA，這一特性被用于研究 DNA-配體相互作用及其潛在的細胞毒性效應。

血庫應用：磷酸氯喹（CDP）是血庫實驗室中一種有用的試劑，用于從紅細胞中去除結合的 IgG 抗體，這允許對進行直接抗球蛋白試驗陽性患者的表型進行準確分型和抗體鑒定。

Chloroquine 氯喹實驗數(shù)據(jù)分享

體外研究(In Vitro)

用CQ（30μM）或MG 132（100 nM）預處理A375細胞2小時，然后用CCCP/FeSO 4加甘露糖處理24小時。微管蛋白用于確定負載蛋白的量。

摘要

焦亡是由 gasdermin 家族成員執(zhí)行的一種調節(jié)性細胞死亡。然而，gasdermin 介導的 Pyroptosis 如何負調控仍不清楚。

在這里，我們證明甘露糖（己糖）可通過激活 AMP 激活蛋白激酶（AMPK），抑制 GSDME 介導的焦亡。

在機制上，己糖胺生物合成途徑中的甘露糖代謝會增加代謝物 N - 乙酰葡糖胺 - 6 - 磷酸（GlcNAc-6P）的水平，該代謝物可結合 AMPK，促進其通過 LKB1 磷酸化�；罨�的 AMPK 進而在 Thr 6 位點磷酸化 GSDME，這一過程會阻斷半胱天冬酶 - 3 誘導的 GSDME 切割，從而抑制焦亡。

AMPK 介導的 GSDME 磷酸化的調節(jié)作用，在 AMPK 敲除小鼠以及 GSDMET6 E 或 GSDMET6 A 敲入小鼠中得到了進一步證實。

在小鼠原發(fā)性癌癥模型中，甘露糖給藥可抑制小腸和腎臟中的焦亡，減輕順鉑或奧沙利鉑誘導的組織毒性，且不損害抗腫瘤作用。

甘露糖的保護作用也在一小群接受常規(guī)化療的胃腸道癌癥患者中得到了驗證。

我們的研究揭示了甘露糖通過 GlcNAc-6P 介導的 AMPK 激活來拮抗 GSDME 介導的焦亡的新機制，并表明甘露糖補充劑在減輕化療誘導的副作用中具有臨床應用價值。

2、OTUD6A對CDC6的去泛素化促進腫瘤進展和化療耐藥性

Mol Cancer. 2024 Apr 29;23(1):86.

摘要

背景：CDC6是一種致癌蛋白，其表達水平在細胞周期中波動。雖然已經鑒定了幾種負責泛素介導的CDC6蛋白水解的E3泛素連接酶，但尚未研究CDC6的去泛素化途徑。

方法：采用全蛋白組去泛素化酶（DUB）篩選方法，對CDC 6的潛在調控因子進行鑒定。進行免疫熒光、蛋白質半衰期和去泛素化測定以確定CDC 6的蛋白質穩(wěn)定性。進行了功能獲得和功能喪失實驗，以分析OUTD 6A-CDC 6軸對體外腫瘤生長和化療敏感性的影響。采用N-丁基-N-（4-羥丁基）亞硝胺（BBN）誘導的條件性Otud 6a基因敲除（CKO）小鼠模型和腫瘤異種移植模型分析OTUD 6A-CDC 6軸在體內的作用。使用組織樣本來確定OTUD 6A和CDC 6之間的關聯(lián)。

結果：OTUD 6A通過去除K6-、K33-和K48-連接的多聚泛素化而與CDC 6相互作用、使CDC 6去聚泛素化并穩(wěn)定化。此外，OTUD 6A通過上調CDC 6促進細胞增殖并降低對化療的敏感性。CKO小鼠不太傾向于BBN誘導的BCa腫瘤發(fā)生，并且OTUD 6A的敲低抑制體內腫瘤進展。此外，OTUD 6A蛋白水平與CDC 6蛋白水平呈正相關，并且OTUD 6A和CDC 6蛋白水平高與膀胱癌患者的不良預后相關。

結論：我們揭示了一個重要但缺失的新DUB管理CDC 6穩(wěn)定性。此外，我們的研究結果提出了OTUD 6A-CDC 6軸的模型，為細胞周期和化學敏感性調節(jié)提供了新的見解，這可能成為癌癥治療的潛在生物標志物和有前途的藥物靶點。

參考文獻
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氯喹機制明確、活性廣泛，在自噬調控、抗病毒及腫瘤研究中作用突出，輔以扎實實驗數(shù)據(jù)與應用案例，為相關領域研究及臨床轉化提供重要支撐，具廣闊探索價值。