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ABDP 493/503中性脂滴熒光探針的原理機(jī)制及在科研疾病研究中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):286 發(fā)布日期:2025-11-10  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

ABDP 493/503是一種非常實(shí)用的中性脂滴熒光探針,它因其高選擇性、良好的光穩(wěn)定性和對(duì)pH不敏感的特性,成為脂代謝研究中的重要工具。

化學(xué)性質(zhì)
化學(xué)名稱(chēng):4,4-二氟-1,3,5,7,8-五甲基-4-硼-3a,4a-二氮雜-s-吲哚烯 (4,4-Difluoro-1,3,5,7,8-pentamethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene)。
CAS號(hào):121207-31-6。
分子式:C₁₄H₁₇BF₂N₂。
分子量:262.1 g/mol。
純度:99%
廠(chǎng)商:AbMole
外觀(guān)與溶解性:通常為固體粉末。易溶于DMSO(例如可達(dá)19.08 mM),在水溶液中溶解度較低。配置溶液時(shí)可能需要加熱和超聲處理以助溶。
光譜性質(zhì):最大激發(fā)波長(zhǎng) 493 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng) 503 nm,發(fā)出明亮的綠色熒光。
穩(wěn)定性與儲(chǔ)存:固體粉末應(yīng)在-20°C下避光保存,以避免熒光淬滅。配制成溶液后,建議分裝凍存,并避免反復(fù)凍融。


原理機(jī)制
ABDP 493/503是一種親脂性熒光染料。其工作原理基于其自身的疏水特性,能夠輕松穿過(guò)細(xì)胞膜,并特異性富集在細(xì)胞內(nèi)的中性脂質(zhì)中,主要是脂滴(Lipid Droplets)疏水的核心區(qū)域。

當(dāng)染料進(jìn)入脂滴的疏水環(huán)境后,其熒光強(qiáng)度會(huì)顯著增強(qiáng)。因此,在熒光顯微鏡下,可以看到脂滴發(fā)出明亮的綠色熒光。與尼羅紅(Nile Red)等其他親脂性染料相比,ABDP 493/503對(duì)環(huán)境的極性和pH值相對(duì)不敏感,在不同生理?xiàng)l件下能保持穩(wěn)定的熒光特性,因此具有更高的選擇性。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
脂滴標(biāo)記與成像:可用于活細(xì)胞或固定細(xì)胞的脂滴標(biāo)記,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、雙光子顯微鏡等多種成像平臺(tái)。它可以清晰顯示脂滴的大小、數(shù)量和分布。

流式細(xì)胞術(shù)分析:結(jié)合流式細(xì)胞術(shù),能夠?qū)?xì)胞群體中脂滴的含量進(jìn)行定量分析,用于研究細(xì)胞脂質(zhì)代謝狀態(tài)或分選特定類(lèi)型的細(xì)胞。

肝脂肪變性研究:在肝臟研究中,該探針被用于評(píng)估高脂肪飲食誘導(dǎo)的肝脂肪變性動(dòng)物模型,幫助區(qū)分微泡性和大泡性脂肪變性,為肝病研究提供重要工具。

脂滴動(dòng)態(tài)過(guò)程研究:憑借其良好的光穩(wěn)定性和細(xì)胞相容性,ABDP 493/503還可用于研究活細(xì)胞中脂滴的形成、融合以及與其他細(xì)胞器的相互作用等動(dòng)態(tài)過(guò)程。

使用建議與注意事項(xiàng)
工作液配置:通常先用DMSO配制1-5 mM的儲(chǔ)存液,使用時(shí)再用適當(dāng)?shù)木彌_液(如PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基)稀釋成1-5 μM的工作液。工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用。

染色步驟:對(duì)于貼壁細(xì)胞,棄去培養(yǎng)基后用PBS清洗,加入染料工作液覆蓋細(xì)胞,37°C避光孵育5-30分鐘。隨后去除染料工作液,用預(yù)溫的培養(yǎng)液或PBS清洗細(xì)胞2-3次后即可觀(guān)察。

設(shè)置對(duì)照:建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照(例如用油酸處理細(xì)胞以誘導(dǎo)脂滴生成)以確保染色效果。

避光操作:所有操作步驟應(yīng)盡量避光進(jìn)行,以減緩熒光淬滅。

圖像采集:使用FITC或GFP的濾光片設(shè)置進(jìn)行圖像采集。

發(fā)布者:AbMole中國(guó)
聯(lián)系電話(huà):021-50967598
E-mail:waltlian@abmole.cn

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