賽諾菲的in vivo CAR-T

本文來(lái)源于微信公眾：Bloki 作者：Bloki

In vivo CAR-T賽道火熱，各大藥企紛紛關(guān)注，分享一個(gè)賽諾菲做的in vivo CAR-T，具體內(nèi)容如下：

文章做的是CD8納米抗體修飾的LNP遞送靶向CD22的CAR mRNA：對(duì)離子化脂質(zhì)、PEG脂質(zhì)進(jìn)行了篩選，通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)在LNP表面安裝CD8納米抗體

篩選遞送效率高的離子化脂質(zhì)：LNP遞送GFP mRNA，篩到了脂質(zhì)15

篩遞送效率高的PEG脂質(zhì)：LNP遞送GFP mRNA，篩到了DPG-PEG

篩靶向T細(xì)胞的抗體部分：Dil標(biāo)記的LNP遞送GFP mRNA（攝取、表達(dá)雙角度），篩到納米抗體Nb8（靶向CD3的SP34會(huì)刺激T細(xì)胞分泌IFNr）

納米抗體Nb8修飾的LNP高效介導(dǎo)CD8 T細(xì)胞表達(dá)GFP

人源化納米抗體，得到Nb8-H3，體外，Nb8-H3修飾的LNP除了介導(dǎo)CD8 T細(xì)胞表達(dá)GFP外，還會(huì)介導(dǎo)NKT和NK細(xì)胞表達(dá)GFP

體外，納米抗體修飾的LNP特異性介導(dǎo)CD8 T細(xì)胞表達(dá)CAR

體外，LNP制備出的CAR-T殺B細(xì)胞（22-V4指示靶向CD22的CAR）

體外，LNP制備出的CAR-T特異性殺CD22+靶細(xì)胞（22-V4指示靶向CD22的CAR，m971指示靶向另一個(gè)靶向CD22的CAR，F(xiàn)MC63指示靶向CD19的CAR）

成像流式數(shù)據(jù)說(shuō)明納米抗體修飾的LNP體外介導(dǎo)CD8 T細(xì)胞表達(dá)CAR

成像流式數(shù)據(jù)說(shuō)明納米抗體修飾的LNP體外制備出的CAR-T識(shí)別結(jié)合靶細(xì)胞

納米抗體修飾的LNP體外制備出的CAR-T持續(xù)殺靶細(xì)胞

納米抗體修飾的LNP介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌，暗示有一定免疫原性

mRNA如果不純，其中的dsRNA會(huì)引起細(xì)胞因子分泌，純化后改善 – 暗示mRNA生產(chǎn)工藝很關(guān)鍵

體外實(shí)驗(yàn)完成，開(kāi)始體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：人源化小鼠體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP特異性介導(dǎo)CD8 T細(xì)胞表達(dá)GFP

人源化小鼠體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP特異性介導(dǎo)多部位CD8 T細(xì)胞表達(dá)靶向CD22的CAR

體內(nèi)CAR可長(zhǎng)時(shí)間表達(dá)

體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP“干掉”脾臟B細(xì)胞

體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP不影響小鼠體重、脾臟重量分?jǐn)?shù)

體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP抑瘤

體內(nèi)，納米抗體修飾的LNP干掉肝臟、脾臟B細(xì)胞

各大藥企紛紛入局in vivo CAR-T，技術(shù)路線已經(jīng)相對(duì)成熟（我們分享了很多in vivo CAR-T的文章，mix到一起就是很全面的技術(shù)路線），按部就班的去篩唄。