多因子檢測的樣本要求、方案設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析等實(shí)操指南

樣本量少僅幾十 ul，想測的指標(biāo)又不少，一次測全，又怕方案不靠譜？

如果你正在考慮 Luminex / MSD / Olink / CBA / ELISA 等多因子或單因子檢測，這篇將幫你一次性理清下單前的所有關(guān)鍵問題。

一、樣本相關(guān)
Q1 ：做多因子檢測，每個(gè)樣本最少需要多少樣本量？
一般 Luminex / MSD / Olink / CBA一般建議60 μL / 樣本；
單因子ELISA一般建議110 μL / 樣本  

Q2 ：哪些樣本類型可以做多因子檢測？你們經(jīng)驗(yàn)咋樣？
這些全部都做過：

Q3： 樣本需要怎么處理和保存？
采集后盡快離心取上清，-80℃ 保存，避免反復(fù)凍融，運(yùn)輸建議干冰；具體可以和我們溝通，有具體操作樣本指南

Q4 ：樣本已經(jīng)凍了很久了，還能測嗎？
按經(jīng)驗(yàn)6個(gè)月內(nèi)影響不大，不過具體要看樣本特異性，這篇文章可以參考，時(shí)間對因子降解的影響；BMC Immunol. 2009 Sep 28;10:52.

二、指標(biāo) & 方案設(shè)計(jì)
Q5 ：我給你提供我項(xiàng)目需求相關(guān)的一串因子能不能一起測��？我想省錢。
優(yōu)先匹配固定 Panel，做的最多，最成熟，如果覆蓋不了就定制組合，我們會(huì)盡量把多個(gè)指標(biāo)放進(jìn)一個(gè)盒子里同時(shí)檢測（排除因子干擾），給老師節(jié)省預(yù)算；原則：能合就不拆，節(jié)省樣本和成本  

Q6： 哪些指標(biāo)不適合多因子？
分泌型蛋白：適合；
膜蛋白 / 胞內(nèi)蛋白：不適合  

三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) & 板位規(guī)劃
Q8：我樣本數(shù)量少、預(yù)算也不足，做不了一整個(gè)盒子怎么辦？
可以做拼板（和其他老師的項(xiàng)目一起拼一個(gè)盒子），10個(gè)孔起做，節(jié)省成本；

Q9：一塊板能測多少樣本？
一般約 72 個(gè)孔（扣除雙標(biāo)曲16個(gè)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的孔位8個(gè)） 

Q10 ：預(yù)實(shí)驗(yàn)一定要做嗎？
強(qiáng)烈建議，不同刺激條件差異大，除了試劑盒推薦的稀釋倍數(shù)之外，為了對老師的數(shù)據(jù)負(fù)責(zé)，建議做，一般占一排，所以建議預(yù)留 8 個(gè)孔給預(yù)實(shí)驗(yàn)  

Q11 ：多塊板如何一起分析？
一般可以設(shè)置橋接樣本，每塊板加入 2 個(gè)相同樣本，用于板間校正； 

Q12 ：不同批次怎么辦？
盡量同一批測，如果項(xiàng)目設(shè)計(jì)就是要分開不同批次，和Q10邏輯一致，每批保留同一橋接樣本  

四、數(shù)據(jù)與分析
Q13：不會(huì)分析怎么辦？
Labex提供標(biāo)準(zhǔn)化、統(tǒng)計(jì)、可視化支持，結(jié)果可直接用于文章  

Q14：有沒有分析平臺？方便我不定時(shí)自己操作出圖的？
有，免費(fèi)線上分析云平臺+操作使用視頻，方便老師隨時(shí)使用出圖。

樂備實(shí)（上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司旗下全資子公司），是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家，自2018年成立以來，樂備實(shí)不斷尋求突破，公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴(kuò)展到單細(xì)胞測序、空間多組學(xué)、流式檢測、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè)，建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測體系。