從選擇標(biāo)準(zhǔn)、放置位置及接觸方式等方面介紹用于病原體監(jiān)測(cè)的哨兵鼠

一直以來(lái)，環(huán)境是影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康的重要因素，其中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量控制是其中的重要一環(huán)。一旦出現(xiàn)傳染性病原體，會(huì)直接實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目造成致命打擊，甚至?xí)�把人畜共患病傳染給人類。為了防止出現(xiàn)病原體的傳播，在動(dòng)物房中，有這樣一群“隱形守護(hù)者”——哨兵鼠，它們不跑實(shí)驗(yàn)，卻 24 h 替我們“嗅”病原：病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)一旦冒頭，第一時(shí)間拉響警報(bào)，避免整棟屏障“團(tuán)滅”。今天，就讓我們一起揭開(kāi)這群幕后英雄的神秘面紗，看看哨兵鼠如何用小小的身體，守住價(jià)值數(shù)百萬(wàn)的科研大廈，讓你的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不再被“隱形感染”偷襲！

哨兵鼠（sentinel mouse）是專門用于監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)病原微生物狀況、但不參與任何實(shí)驗(yàn)的“監(jiān)控鼠”。其核心作用是在不打擾主實(shí)驗(yàn)鼠的前提下，通過(guò)定期檢測(cè)哨兵鼠的血液、糞便、組織等樣本，間接推斷整個(gè)飼養(yǎng)單元是否存在特定病原體污染。

01 哨兵鼠的選擇
哨兵鼠選擇最重要的一點(diǎn)是：來(lái)源穩(wěn)定，可靠，確認(rèn)質(zhì)量合格的動(dòng)物。一般選擇與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物相同的遺傳背景且微生物學(xué)背景清晰的動(dòng)物，避免使用對(duì)特定病原體易感性低的動(dòng)物品系。具體要求如下：

品系

• 封閉群：對(duì)病原體易感但抵抗力強(qiáng)，且能產(chǎn)生很好的免疫學(xué)應(yīng)答。常用的品系包括ICR小鼠和SD大鼠。
• 近交系：多采用BALB/c和C57BL/6兩種近交系小鼠作為哨兵鼠，但成本較高。
• 為避免遺傳污染風(fēng)險(xiǎn)，可利用動(dòng)物的毛發(fā)顏色進(jìn)行區(qū)別。如一個(gè)架子都是白色小鼠，則可以選擇黑色的C57BL/6或其他小鼠進(jìn)行區(qū)分。

性別
一般來(lái)說(shuō)，雌鼠更適合作為哨兵鼠。一是能減少小鼠間打架的概率，另外也能避免意外交配導(dǎo)致的遺傳污染。

周齡
選擇適齡的動(dòng)物，6周齡左右。避免使用周齡過(guò)大的小鼠的動(dòng)物作為哨兵鼠，可能導(dǎo)致血清學(xué)假陰性。

02 哨兵鼠放置位置及接觸方式
為了最大程度捕捉環(huán)境中的病原體，哨兵鼠必須暴露于氣流的最末端。
根據(jù)哨兵鼠與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物的接觸方式分為直接接觸法和間接接觸法。

直接接觸法
將哨兵鼠直接與被監(jiān)測(cè)動(dòng)物混合飼養(yǎng)再同一籠盒中2周以上，使其直接接觸氣溶膠、塵埃粒子及排泄物。優(yōu)點(diǎn)在于能直接快速的檢測(cè)不同的傳播途徑的微生物等感染。但只適用于被監(jiān)測(cè)動(dòng)物較少的情況，且同籠動(dòng)物間打斗等行為會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾，因此使用較少。

間接接觸法（臟墊料法）
使用較少的哨兵鼠監(jiān)測(cè)更多的動(dòng)物，通常一到兩籠哨兵鼠可以監(jiān)測(cè)50-80籠動(dòng)物，將被監(jiān)測(cè)動(dòng)物籠盒中使用過(guò)的墊料每周添加到哨兵鼠籠內(nèi)，建議哨兵鼠飼養(yǎng)籠50％來(lái)源于臟墊料，飼養(yǎng)時(shí)間4周以上，同時(shí)可以將廢氣通入哨兵鼠籠中以增加監(jiān)測(cè)效率。應(yīng)用這種方法在空氣和墊料污染的哨兵鼠中能有效地檢測(cè)到鼠類病原體，但某些病毒例如仙臺(tái)病毒就不能很好的在墊料中傳播，且存在滯后性。該方法監(jiān)測(cè)成本較低，且效率高，是最常用的一種監(jiān)測(cè)方案。

03 檢測(cè)頻率
哨兵鼠檢測(cè)項(xiàng)目主要依據(jù)我國(guó)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》（GB 14922-2022），但在國(guó)際上并沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)數(shù)量不同而有所區(qū)別。通常的檢測(cè)方法主要針對(duì)于細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)等，此外，發(fā)病和死亡的動(dòng)物必須剖檢，剖檢結(jié)果用于指導(dǎo)是否要增加檢測(cè)頻率或者增加被檢動(dòng)物的數(shù)量。普遍來(lái)說(shuō)，哨兵鼠的檢測(cè)頻率為一季度一次，但對(duì)于飼養(yǎng)規(guī)模較大、操作頻繁的設(shè)施，可以提高檢測(cè)頻率。

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