小鼠實驗中他莫昔芬給藥的詳細操作指南及注意事項介紹

想不想像控制開關一樣，隨心所欲地在特定時間、特定組織里“打開”或“關閉”某個基因？CreERT2與Flox小鼠這對“黃金搭檔”就讓這變成了現實，它們已成為探索基因功能的標配工具（原理可查看：小鼠大學問 | Cre-Lox系統(tǒng)核心原理全解析）。然而，理想很豐滿，現實卻�？ㄔ诘谝徊剑寒斈慊ㄙM數月培育出珍貴的實驗小鼠，卻可能在他莫昔芬（Tamoxifen）溶解這一步就犯了難——后續(xù)的給藥劑量、頻率和方式，每一步都有不少萌新“翻車”。本期，小編就化身“通關指導員”，帶你搞定他莫昔芬給藥的那些事兒。

1 他莫昔芬的配置和儲存
他莫昔芬在水中的溶解度極低，常規(guī)操作中需使用玉米油作為溶劑進行配制。建議將其配制為終濃度20mg/mL的溶液，并于37℃條件下振蕩過夜，以確保充分溶解或均勻懸浮。為提高配制成功率并維持體系穩(wěn)定性，單次配制體積建議控制在50mL以內。配制完成后，應將溶液分裝為1mL/管，并于-20℃、避光條件下保存。使用時需注意避免反復凍融，在規(guī)范存儲條件下，溶液可保存一個月，推薦現配現用以獲得最佳效果。

在整個配制和儲存過程中，必須嚴格進行避光操作，因為他莫昔芬對光敏感，光照可能影響其穩(wěn)定性。以下為他莫昔芬和玉米油的常用品牌示例，僅供參考：
Tamoxifen(Sigma‐Aldrich)：CAS # 10540-29-1
玉米油 (Sigma‐Aldrich) CAS# 8001-30-7

2 他莫昔芬的給藥方式
他莫昔芬可以通過腹腔注射、灌胃、飲食或飲水等途徑給藥，應用最廣泛的是腹腔注射給藥，腹腔注射的給藥劑量精準，便于控制。

腹腔注射：正確抓取小鼠，將小鼠的鼻子朝向地面，露出腹部；定位動物的中線并將腹部分成四個象限，特別是動物的右下象限，是腹腔注射的合適位置（右下象限缺少重要的解剖結構）；多次腹腔注射時，應交替注射部位。

灌胃：給藥劑量和頻率與腹腔注射相同，在正式實驗前，建議同學們先反復練習，熟練掌握灌胃給藥的技巧。

飲食/飲水給藥使用較少，主要是他莫昔芬水溶性差，小鼠的給藥劑量不好量化，且需要的誘導時間較長（一般需要幾周進行誘導），在誘導期間往往還伴隨著小鼠體重的下降（約10-15%）。

3 他莫昔芬的給藥方式
對于4周齡級以上的成年小鼠，他莫昔芬的推薦劑量為75mg/kg-120mg/kg。一般注射3-5次，隔天一次。由于小鼠體內各組織誘導效率有所差異，通常我們建議先以120mg/kg，注射5次進行實驗，以盡可能保證敲除的效果。幼鼠注射劑量建議控制在100mg/kg以下；孕鼠及老齡鼠（大于6月齡）的劑量也需要適當減少，具體參考如下^[1]：

*由于他莫昔芬會影響胎兒發(fā)育和生產，建議同時注射孕酮來減少流產概率。

4 其它注意事項

1. 他莫昔芬注射完成后不建議立刻開展實驗，一般來講，停藥后需要繼續(xù)飼養(yǎng)7天，再安排后續(xù)實驗。
2. 對照組小鼠需要同步進行不含他莫昔芬的玉米油溶液給藥。
3. 未處理的小鼠需要和注射他莫昔芬的小鼠分籠飼養(yǎng)，小鼠舐舔到他莫昔芬懸液，梳毛等行為可能導致意外敲除。
4. 加熱不會導致他莫昔芬失效，37℃過夜溶解他莫昔芬是沒有問題的。

最后，需要特別強調的是，最佳的給藥方案（包括劑量、頻率和途徑）會受到實驗設計、小鼠品系以及目標組織器官等多種因素的綜合影響。因此，上文所述的方法僅為一般性參考框架，面對具體實驗時，同學們還應根據參考文獻、實驗經驗先進行預實驗，以確定最佳方案。

Reference：
[1] Feil S, Valtcheva N, Feil R. Inducible Cre mice. Methods Mol Biol. 2009;530:343-63. doi:10.1007/978-1-59745-471-1_18. PMID: 19266339.

關于我們
上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，簡稱"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科創(chuàng)板上市高科技生物公司（股票代碼：688265），始終以編輯基因、解碼生命為己任，專注于模式生物領域，打造了以基因修飾動物模型研發(fā)為核心，涵蓋多物種模型構建、飼養(yǎng)繁育、表型分析、藥物臨床前評價等多個技術平臺，致力于為全球高校、科研院所、制藥企業(yè)等客戶提供全方位、一體化的基因修飾動物模型產品解決方案。

歡迎通過以下方式聯系我們：
💬 微信公眾號「南模生物SMOC」在線咨詢
📞 撥打400-728-0660
📧 發(fā)送郵件至marketing@modelorg.com