TriiZol作為RNA提取試劑的工作原理及優(yōu)勢(shì)
瀏覽次數(shù):464 發(fā)布日期:2025-11-6
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在分子生物學(xué)研究中,總 RNA 的提取質(zhì)量直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,而一款可靠的提取試劑是實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)。愛(ài)必信 TriiZol 作為總 RNA 抽提試劑,憑借成熟的技術(shù)原理和穩(wěn)定的性能,成為實(shí)驗(yàn)室常用的 RNA 提取工具。
一、核心工作原理
愛(ài)必信 TriiZol 采用與經(jīng)典 TRIzol 試劑完全相似的技術(shù)原理和操作方法,核心成分以苯酚為基礎(chǔ),搭配異硫氰酸胍、β- 巰基乙醇、8 - 羥基喹啉等關(guān)鍵成分發(fā)揮作用。苯酚能有效裂解細(xì)胞,使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)解聚釋放;異硫氰酸胍作為強(qiáng)力蛋白質(zhì)變性劑,可破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),讓核蛋白與核酸快速分離;β- 巰基乙醇能破壞 RNA 酶(RNase)中的二硫鍵,8 - 羥基喹啉則可增強(qiáng)對(duì) RNA 酶的抑制效果,二者協(xié)同維持 RNA 的完整性,避免提取過(guò)程中 RNA 降解。
加入氯仿后,溶液會(huì)自然分層:上層無(wú)色水相含有目標(biāo) RNA,中層為 DNA,下層紅色有機(jī)相則溶解蛋白質(zhì),清晰的分層便于精準(zhǔn)吸取 RNA 相,保障提取效率。
二、適用樣本與處理能力
愛(ài)必信 TriiZol 的適配性極強(qiáng),可廣泛用于人、動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣本,同時(shí)對(duì)細(xì)菌樣本也能實(shí)現(xiàn)高效提取。無(wú)論是少量樣本(50-100mg 組織或 5×10⁶細(xì)胞),還是大量樣本(≥1g 組織或 > 10⁷細(xì)胞),均能達(dá)到理想的分離效果。
針對(duì)凍存樣本,由于凍融過(guò)程中細(xì)胞內(nèi) RNA 酶易釋放導(dǎo)致 RNA 降解,建議無(wú)法及時(shí)提取時(shí),先加入適量 TriiZol 裂解樣本后再凍存,可有效保留 RNA 完整性。

三、提取質(zhì)量與產(chǎn)量表現(xiàn)
1. 高純度保障
提取的 RNA 無(wú) DNA 和蛋白質(zhì)污染,溶于 DEPC 水后,A260/A280 比值穩(wěn)定在 1.8-2.0 之間,符合高質(zhì)量 RNA 的標(biāo)準(zhǔn),可滿(mǎn)足多種精密實(shí)驗(yàn)需求。
2. 穩(wěn)定產(chǎn)量輸出
RNA 產(chǎn)量因樣本類(lèi)型存在差異:每一百萬(wàn)細(xì)胞可提取 5-15μg RNA,每毫克組織可提取 1-10μg RNA。例如從大鼠肝臟提取的 RNA,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),可見(jiàn)清晰的 28S(約 5kb)、18S(約 2kb)核糖體 RNA 條帶,以及低分子量的 tRNA 和 5S RNA 條帶,展現(xiàn)出完整的 RNA 譜帶特征。
四、廣泛的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用場(chǎng)景
愛(ài)必信 TriiZol 提取的 RNA 可直接用于多種常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),包括 Northern 印跡、點(diǎn)雜交、mRNA 純化、體外翻譯、RNA 酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)、cDNA 克隆及 RT-PCR 等。同時(shí),其高質(zhì)量的提取效果也能滿(mǎn)足基因表達(dá)芯片分析、高通量測(cè)序等對(duì) RNA 質(zhì)量要求極高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,為科研人員提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
整個(gè)提取流程操作簡(jiǎn)便,包含勻漿裂解、氯仿分層及異丙醇沉淀等步驟,1 小時(shí)內(nèi)即可完成批量樣品處理,大幅提升實(shí)驗(yàn)效率。
五、使用注意與保存方式
1. 關(guān)鍵注意事項(xiàng)
防 RNA 酶污染:所有離心管、槍頭及溶液需無(wú) RNA 酶污染。耐高溫器物可 180℃烘烤 4 小時(shí)去除 RNA 酶,其他器物可用 0.01% DEPC 水浸泡過(guò)夜后滅菌烘干,溶液需用 DEPC 水配制。
操作防護(hù):試劑含苯酚等有毒物質(zhì),需穿實(shí)驗(yàn)服、戴一次性手套和口罩,建議佩戴防護(hù)眼鏡;操作需在化學(xué)通風(fēng)櫥中進(jìn)行,避免皮膚接觸或吸入蒸氣。若皮膚接觸,需立即用大量去垢劑和水沖洗,不適及時(shí)就醫(yī)。
定量建議:測(cè)量 A260/A280 比值時(shí),建議用 RNA 定量緩沖液稀釋樣品后檢測(cè)。
2. 保存條件
愛(ài)必信 TriiZol 需在 4℃避光密閉條件下保存,保質(zhì)期為 12 個(gè)月,妥善保存可保障試劑性能穩(wěn)定。
六、常見(jiàn)問(wèn)題 FAQ
Q1:愛(ài)必信 TriiZol 與經(jīng)典 TRIzol 試劑有什么區(qū)別?
A:二者原理、抽提方法和步驟完全相同,顏色特性一致(加入氯仿后上層無(wú)色、下層紅色),可實(shí)現(xiàn)無(wú)縫替換,且愛(ài)必信 TriiZol 同樣能保障 RNA 的完整性和純度。
Q2:該試劑適用于細(xì)菌樣本的 RNA 提取嗎?
A:適用。愛(ài)必信 TriiZol 對(duì)動(dòng)植物細(xì)胞、組織及細(xì)菌樣本均有良好的提取效果,能滿(mǎn)足不同來(lái)源樣本的實(shí)驗(yàn)需求。
Q3:提取的 RNA 能用于高通量測(cè)序嗎?
A:可以。愛(ài)必信 TriiZol 提取的 RNA 無(wú) DNA 和蛋白污染,A260/A280 比值在 1.8-2.0 之間,質(zhì)量符合高通量測(cè)序、基因芯片等高精度實(shí)驗(yàn)的要求。
Q4:凍存的組織樣本如何用該試劑提取 RNA?
A:凍存樣本直接提取效果可能較差,建議在樣本采集后若無(wú)法及時(shí)提取,先加入適量 TriiZol 裂解樣本,再進(jìn)行凍存,可有效抑制 RNA 酶活性,減少 RNA 降解。
Q5:試劑開(kāi)封后需要特殊處理嗎?
A:開(kāi)封后仍需遵循 4℃避光密閉保存的要求,每次使用后及時(shí)蓋緊試劑瓶蓋,避免污染和成分揮發(fā),在保質(zhì)期內(nèi)使用即可。
愛(ài)必信 TriiZol 以成熟的技術(shù)、廣泛的適用性和穩(wěn)定的性能,為科研人員提供高效的 RNA 提取解決方案。如需了解更多產(chǎn)品詳情,可訪(fǎng)問(wèn)優(yōu)寧維官方鏈接:https://www.univ-bio.com/trizol-rna/abs60154-100ml.html