利用靶向癌細(xì)胞的抗體對(duì)γδ T細(xì)胞進(jìn)行化學(xué)工程化以增強(qiáng)腫瘤免疫治療

近日，北京大學(xué)第三醫(yī)院藥學(xué)部林堅(jiān)研究員/陳龍副研究員聯(lián)合北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院陳興教授、北京大學(xué)第三醫(yī)院婦科主任郭紅燕教授在γδ T細(xì)胞腫瘤免疫治療領(lǐng)域取得了新進(jìn)展。相關(guān)研究成果已經(jīng)發(fā)表在國際權(quán)威期刊《National science review》（IF=17.1、一區(qū)期刊）上。

γδ T細(xì)胞作為獨(dú)特的 T 淋巴細(xì)胞亞群，憑借不依賴主要組織相容性復(fù)合體（MHC）識(shí)別腫瘤抗原、可進(jìn)行異體輸注且無移植物抗宿主病風(fēng)險(xiǎn)等優(yōu)勢(shì)，在過繼性細(xì)胞治療領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景，已被證實(shí)能在體外和體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤活性，成為腫瘤免疫治療的研究熱點(diǎn)。然而，傳統(tǒng)體外擴(kuò)增的未工程化 γδ T 細(xì)胞存在明顯瓶頸：一方面，腫瘤靶向效率低，難以精準(zhǔn)定位并作用于腫瘤細(xì)胞；另一方面，輸注細(xì)胞的活化能力有限，導(dǎo)致臨床治療獲益不佳。為突破這些限制，雖有研究嘗試將嵌合抗原受體（CAR）工程化改造應(yīng)用于 γδ T 細(xì)胞，但基因工程技術(shù)不僅成本高昂，還存在大規(guī)模生產(chǎn)耗時(shí)的問題。與此同時(shí)，細(xì)胞表面化學(xué)工程作為調(diào)控免疫細(xì)胞功能的靈活策略，已在自然殺傷細(xì)胞、αβ CAR-T 細(xì)胞等研究中展現(xiàn)潛力，因此，探索通過化學(xué)工程手段為 γδ T 細(xì)胞賦予腫瘤靶向功能，以提升其抗腫瘤活性并簡(jiǎn)化生產(chǎn)流程，成為解決當(dāng)前 γδ T 細(xì)胞治療困境的關(guān)鍵方向。

基于此，本研究成功開發(fā)了一種基于代謝糖標(biāo)記與點(diǎn)擊化學(xué)的 γδ T 細(xì)胞表面化學(xué)工程策略，確定細(xì)胞表面唾液酸（作為細(xì)胞表面聚糖的末端糖）為抗體錨定的最佳位點(diǎn)，并利用快速代謝糖標(biāo)記（fMGL）技術(shù)，將抗 PD-L1 納米抗體（αPD-L1）高效、穩(wěn)定地偶聯(lián)到 γδ T 細(xì)胞表面，構(gòu)建出 αPD-L1-γδ T 細(xì)胞偶聯(lián)物。功能驗(yàn)證顯示，該偶聯(lián)物在體外對(duì) PD-L1 陽性癌細(xì)胞系（如卵巢癌細(xì)胞 OVCAR-8、A2780-DDP 等）及患者來源的原發(fā)性癌細(xì)胞均表現(xiàn)出顯著增強(qiáng)的殺傷活性，機(jī)制上通過結(jié)合 PD-L1 靶向腫瘤細(xì)胞并誘導(dǎo)其焦亡實(shí)現(xiàn)；在卵巢癌腹腔轉(zhuǎn)移小鼠模型中，αPD-L1-γδ T 細(xì)胞能有效抑制腫瘤生長(zhǎng)、延長(zhǎng)小鼠生存期，且可通過 CCR5/CCL5 信號(hào)軸招募并激活 CD8⁺ T 細(xì)胞，重塑腫瘤免疫微環(huán)境，進(jìn)一步強(qiáng)化抗腫瘤免疫應(yīng)答。此外，該化學(xué)工程策略具有良好的通用性，可用于偶聯(lián)不同功能分子（如 GFP、DNA 適配體等），且避免了基因工程的高成本與復(fù)雜性，為 γδ T 細(xì)胞過繼性細(xì)胞治療的優(yōu)化提供了新平臺(tái)，對(duì)推動(dòng)癌癥 “活體藥物” 的發(fā)展具有重要意義。

文章中，為評(píng)估αPD-L1-γδ T 在卵巢癌腹腔轉(zhuǎn)移小鼠模型中對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響，采用了廣州博鷺騰生物科技有限公司的AniView多模式動(dòng)物活體成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，載體（PBS）處理組小鼠體內(nèi)腫瘤生物發(fā)光信號(hào)持續(xù)增強(qiáng)，表明腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)，且小鼠體重隨腫瘤進(jìn)展呈明顯下降趨勢(shì)，反映腫瘤生長(zhǎng)對(duì)小鼠機(jī)體的消耗，導(dǎo)致整體健康狀態(tài)惡化。未工程化γδ T細(xì)胞處理組雖能在一定程度上抑制腫瘤生長(zhǎng)，使生物發(fā)光信號(hào)增強(qiáng)趨勢(shì)減緩，但抑制效果有限；而αPD-L1-γδ T 細(xì)胞處理組小鼠的腫瘤生物發(fā)光信號(hào)顯著弱于前兩組，且隨時(shí)間推移抑制效果更明顯，此外后兩組均維持了更好的體重，這證明αPD-L1-γδ T 細(xì)胞在體內(nèi)對(duì) PD-L1 陽性卵巢癌腹腔轉(zhuǎn)移腫瘤的生長(zhǎng)具有更高效的抑制作用，進(jìn)一步驗(yàn)證了該細(xì)胞偶聯(lián)物的體內(nèi)抗腫瘤活性優(yōu)勢(shì)。

論文鏈接：
https://doi.org/10.1093/nsr/nwaf256