熱門(mén)靶點(diǎn)ANGPT2及VEGFA/ANGPT2雙靶人源化模型的介紹與應(yīng)用

血管生成素-2（ANG2）作為調(diào)控血管穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵因子，其異常表達(dá)與腫瘤和糖尿病視網(wǎng)膜病變等疾病密切相關(guān)，已成為藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)。近年來(lái)，靶向ANG2/VEGF的雙特異性抗體藥物（如羅氏Faricimab）憑借顯著臨床療效迅速成為市場(chǎng)熱點(diǎn)，推動(dòng)了對(duì)高預(yù)測(cè)性動(dòng)物模型的需求。為此，賽業(yè)生物開(kāi)發(fā)了ANGPT2人源化及VEGFA/ANGPT2雙人源化小鼠模型，通過(guò)精準(zhǔn)基因替換實(shí)現(xiàn)人源蛋白表達(dá)調(diào)控，不僅可支持單一靶點(diǎn)藥物評(píng)價(jià)，更能為當(dāng)前熱門(mén)的雙抗藥物及聯(lián)合療法提供高度臨床相關(guān)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，助力突破抗血管生成治療的療效瓶頸。

ANG2：血管穩(wěn)態(tài)與重塑的核心調(diào)控因子
血管生成素-2（ANG2）是由ANGPT2基因編碼的分泌型糖蛋白，通過(guò)特異性結(jié)合TIE2受體調(diào)控血管穩(wěn)定性和病理性重塑。該蛋白以二聚體形式發(fā)揮功能，其濃度依賴性調(diào)控特征表現(xiàn)為：在VEGF存在條件下，低濃度ANG2促進(jìn)血管生成，而高濃度則通過(guò)拮抗TIE2受體信號(hào)通路削弱血管穩(wěn)定性，導(dǎo)致血管滲漏和炎癥反應(yīng)。這種精確調(diào)控依賴于三個(gè)特征性結(jié)構(gòu)域：C端纖維蛋白原樣域直接介導(dǎo)TIE2受體結(jié)合，中央coiled-coil結(jié)構(gòu)域維持蛋白二聚化狀態(tài)，N端超家族域則調(diào)控蛋白分泌和亞細(xì)胞定位。ANGPT2基因表達(dá)失調(diào)與多種病理過(guò)程密切相關(guān)，包括腫瘤血管異常增生、糖尿病視網(wǎng)膜病變微血管損傷以及慢性炎癥性疾病中的血管重塑異常。

圖1. Ang/Tie信號(hào)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制 ^[1]。

VEGFA/ANGPT2：血管生成的雙重調(diào)控樞紐
VEGFA（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A）和ANGPT2是協(xié)同調(diào)控血管生成的核心分子。VEGFA通過(guò)結(jié)合VEGFR2（KDR/Flk-1）直接驅(qū)動(dòng)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，而ANGPT2則通過(guò)調(diào)節(jié)TIE2信號(hào)通路，影響血管成熟和穩(wěn)定性。兩者共同構(gòu)成血管生成的"開(kāi)關(guān)"機(jī)制：VEGFA誘導(dǎo)初始血管出芽，ANGPT2則決定新生血管的命運(yùn)——穩(wěn)定（當(dāng)TIE2活化時(shí)）或退化（當(dāng)ANGPT2抑制TIE2時(shí)）。它們的相互作用依賴微環(huán)境信號(hào)，如缺氧（HIF-1α上調(diào)VEGFA）和炎癥（TNF-α誘導(dǎo)ANGPT2釋放）。在病理狀態(tài)下（如腫瘤、眼底病變），VEGFA/ANGPT2的過(guò)度激活會(huì)導(dǎo)致血管異常增生和滲漏，而雙重靶向抑制（如抗VEGF/抗ANGPT2聯(lián)合療法）可更有效地阻斷病理性血管生成。

圖2. 靶向ANG2和VEGF實(shí)現(xiàn)血管穩(wěn)定化 ^[2]。

ANG2/VEGFA靶向藥物新進(jìn)展
ANG2通路的復(fù)雜性決定了單一靶向治療的局限性，其在血管生成和炎癥調(diào)控中具有多效性和環(huán)境依賴性，甚至可能在不同病理?xiàng)l件下發(fā)揮相反作用。這種生物學(xué)特性促使研究者轉(zhuǎn)向聯(lián)合治療策略，例如同時(shí)靶向VEGFA和ANG2的雙特異性抗體，或?qū)�ANG2抑制劑與免疫檢查點(diǎn)阻斷劑聯(lián)用，通過(guò)多通路協(xié)同干預(yù)來(lái)更有效地調(diào)控血管異常和免疫微環(huán)境，從而克服單藥治療的耐藥性并提升臨床療效。2025年，靶向ANG2和VEGFA的療法在眼底新生血管疾�。ㄈ鏽AMD和DME）及部分實(shí)體瘤治療中持續(xù)發(fā)揮重要作用。

眼科領(lǐng)域，羅氏的Vabysmo（Faricimab）憑借雙靶點(diǎn)抑制優(yōu)勢(shì)，以2024年全球銷售額38.64億瑞士法郎(約46.0億美元)的業(yè)績(jī)領(lǐng)跑市場(chǎng)，其療效持續(xù)得到真實(shí)世界數(shù)據(jù)支持 ^[3]。中國(guó)藥企如康哲藥業(yè)正加速研發(fā)同類四價(jià)雙抗，其納米抗體設(shè)計(jì)具有高親和力、低給藥頻率等優(yōu)勢(shì)，在2025年持續(xù)推進(jìn)針對(duì)nAMD的臨床試驗(yàn)，并在今年3月發(fā)布的2024年年度報(bào)告中提及藥物已完成I期臨床試驗(yàn)，并啟動(dòng)了II期臨床試驗(yàn)的首例患者給藥 ^[4]。

腫瘤領(lǐng)域，雙靶點(diǎn)抑制通過(guò)重塑微環(huán)境促進(jìn)CD8+ T細(xì)胞浸潤(rùn)，成為聯(lián)合免疫治療（如聯(lián)合VEGF和ANG2抑制劑與PD-1抗體）的研究熱點(diǎn)，尤其在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤等難治性腫瘤中探索協(xié)同機(jī)制以克服耐藥性。

當(dāng)前，靶向ANG2和VEGFA的療法在眼科已實(shí)現(xiàn)成熟應(yīng)用，而在腫瘤治療中仍處于機(jī)制深化與臨床突破階段。

圖3. 法瑞西單抗作用機(jī)制概覽——導(dǎo)致血管滲漏減少和新生血管過(guò)程的抑制。 ^[5]。

ANGPT2/VEGFA人源化小鼠：抗血管生成治療新工具
賽業(yè)生物開(kāi)發(fā)的ANGPT2基因人源化小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：C001615）和VEGFA/ANGPT2雙基因人源化小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：C001691），為腫瘤及眼血管疾病研究提供了高效的工具平臺(tái)。這些模型能夠：1）加速驗(yàn)證ANGPT2作為血管及炎癥性疾病治療靶點(diǎn)的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)價(jià)值；2）促進(jìn)開(kāi)發(fā)更高效的VEGFA/ANGPT2雙靶點(diǎn)治療藥物；3）提升現(xiàn)有抗血管生成藥物的臨床療效評(píng)估效率，為創(chuàng)新藥物研發(fā)提供強(qiáng)有力的臨床前研究支持。
 

部分驗(yàn)證數(shù)據(jù)如下（詳見(jiàn)品系說(shuō)明書(shū)）。

mRNA表達(dá)水平檢測(cè)
RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示，純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠體內(nèi)人源ANGPT2基因顯著表達(dá)，鼠源Angpt2基因無(wú)表達(dá)。

圖4. 5周齡雄性純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的Angpt2 mRNA表達(dá)檢測(cè)。

蛋白水平表達(dá)檢測(cè)
Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示，WT小鼠和B6-hANG2(ANGPT2)小鼠血漿中均檢出目的條帶，推測(cè)可能由人鼠同源性過(guò)高所致，B6-hANG2(ANGPT2)小鼠的ANG2蛋白表達(dá)量略高于WT小鼠。

圖5. 8周齡雄性B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的蛋白表達(dá)檢測(cè)。

蛋白水平表達(dá)檢測(cè)
ELISA結(jié)果顯示，B6-hANG2(ANGPT2)小鼠血清和血漿中存在人源ANG2蛋白的顯著表達(dá)，并且血清和血漿中的蛋白含量無(wú)差異，而WT小鼠中未檢測(cè)到人源ANG2蛋白。

圖6. 8周齡雄性B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）血清和血漿中人源蛋白表達(dá)檢測(cè)。

視網(wǎng)膜表型檢測(cè)
純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠的眼底形態(tài)和視網(wǎng)膜OCT結(jié)果與野生型一致。

圖7. 6周齡純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的眼底形態(tài)（Fundus）和光學(xué)相干斷層掃描（OCT）檢測(cè)結(jié)果。

*OD (Oculus Dexter)：右眼；OS (Oculus Sinister)：左眼。

視網(wǎng)膜電圖（ERG）檢測(cè)
6周齡純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠暗適應(yīng)（Scotopic）和明適應(yīng)（Photopic）的a波、b波振幅幾乎與野生型相同。

圖8. 6周齡野生型小鼠（WT）和純合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠眼部ERG檢測(cè)結(jié)果。

模型總結(jié)
綜上，賽業(yè)生物開(kāi)發(fā)的ANGPT2人源化小鼠（產(chǎn)品編號(hào)：C001615）和VEGFA/ANGPT2雙人源化小鼠（產(chǎn)品編號(hào)：C001691）成功模擬了人類血管生成調(diào)控的關(guān)鍵通路，為血管相關(guān)疾�。ㄈ缒[瘤、糖尿病視網(wǎng)膜病變）的機(jī)制研究提供了可靠平臺(tái)。其高度臨床相關(guān)性使其成為靶向ANG2/VEGFA藥物開(kāi)發(fā)、聯(lián)合療法評(píng)估和臨床前藥效驗(yàn)證的理想工具，可顯著加速抗血管生成治療方案的研發(fā)進(jìn)程。

參考文獻(xiàn)

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