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基于新型納米纖維的LentiHERO在LVV和HSV純化工藝中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù)：687　發(fā)布日期：2025-8-29　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

溶瘤病毒如單純皰疹病毒（HSV）和痘苗病毒因能在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解和觸發(fā)免疫應(yīng)答的能力，而在癌癥治療領(lǐng)域中逐漸受到重視。同樣，慢病毒載體（LVV），如伽利略病毒（GalV）和VSV-G能夠通過實現(xiàn)細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)來增強基因治療效果。這些病毒對下游的純化策略產(chǎn)生了顛覆性影響。

常用于基因治療的病毒載體尺寸示意圖：腺相關(guān)病毒AAV、慢病毒LVV、單純皰疹病毒HSV和痘苗病毒VACV

對于這些尺寸較大的病毒載體，傳統(tǒng)的基于瓊脂糖的層析方法在工藝放大、產(chǎn)量提升以及雜質(zhì)（如HCP等）去除等方面存在局限性。為了解決這些瓶頸問題，Astrea Bioseparations研發(fā)推出的新一代基于納米纖維的層析介質(zhì)LentiHERO為病毒純化提供了新的思路。相比于傳統(tǒng)的瓊脂糖基質(zhì)，LentiHERO不論從結(jié)合載量、雜質(zhì)去除還是工藝放大等方面都具有顯著優(yōu)勢。以下研究將從病毒的結(jié)合能力、回收率、HCP和dsDNA的去除能力、工藝放大等方面充分評估LentiHERO對不同包膜（VSV-G、4070A、GalV）的LVV假病毒和溶瘤病毒HSV的純化性能。

LVV生產(chǎn)和純化工藝流程

LentiHERO對 VSV-G LVV有更高的結(jié)合力與動態(tài)結(jié)合載量

下圖是VSV-G LVV樣品在不同流速下通過LentiHERO（LH）與Q膜流穿液的TU和p24檢測結(jié)果，LentiHERO對LVV的結(jié)合能力顯著高于Q膜。由此表明，LeniHERO在LVV流穿之前能夠處理更大體積的料液。

LentiHERO有更高的動態(tài)結(jié)合載量

提升LVV回收率與純度的優(yōu)化方案

如下圖所示，條件優(yōu)化后LVV回收率提升至82%，收獲的病毒滴度＞2E+9 TU/mL，且HCD/HCP去除率＞90%。

LentiHERO®可大幅減少純化的緩沖液體積

生產(chǎn)規(guī)模所需的緩沖液體積預(yù)估

精氨酸洗脫可以省去洗脫后的稀釋步驟，簡化工藝流程；
低鹽或精氨酸洗脫可顯著減少緩沖液用量并降低處理體積。

使用LentiHERO® 1純化非VSV-G包膜的LVV假病毒

重組慢病毒可以通過不同的包膜蛋白來提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和改變特異性，從而直接影響下游純化策略。

不同類型慢病毒在細(xì)胞和基因治療中的應(yīng)用

LentiHERO® 1對LVV的回收率（TU）

LentiHERO®成功實現(xiàn)了非VSV-G慢病毒（4047A：100%，GalV：36%）的高效純化。
LentiHERO®具備強大的雜質(zhì)去除能力，在不影響載體功能的情況下可去除＞98%的HCP及＞87%的dsDNA殘留

HSV-1溶瘤病毒生產(chǎn)和純化工藝流程

LentiHERO®純化野生型HSV-1（KOS）的結(jié)果

篩選裝置上樣量15ml，測得填料載量為1.5E+10 IU/ml。

感染性HSV回收率為56%，LentiHERO®載量可達9.2E+9 IU/ml，大部分感染性HSV在0.6M NaCl條件下被洗脫。

LentiHERO®純化pBACYAC-HSV-1（KOS）的結(jié)果

篩選裝置上樣量20ml，測得填料載量為3E+8 IU/ml。

用0.8M精氨酸洗脫，HSV回收率可達到69%，LentiHERO®載量可達1.4E+8 IU/ml，同時實現(xiàn)高效的雜質(zhì)去除。

結(jié)論

LentiHERO®弱陰離子納米纖維層析技術(shù)可廣泛應(yīng)用于多種病毒載體的純化，包括不同包膜的慢病毒（4070A，VSV-G，GalV），溶瘤病毒HSV-1；
LentiHERO®純化病毒具有高回收率：4070A: 100%，VSV-G: 82%，GalV: 36%，HSV-1: 69%
LentiHERO®具有高效的宿主蛋白去除效率：HCP去除率＞97%
LentiHERO®可放大形成平臺工藝，適用于工業(yè)化生產(chǎn)
LentiHERO®具備拓展應(yīng)用于其他病毒載體的潛力，如腺病毒，痘苗病毒及病毒樣顆粒（VLPs）等
LentiHERO®支持基因治療及溶瘤病毒生產(chǎn)工藝的優(yōu)化

產(chǎn)品信息

貨號	品名	規(guī)格
NL100100	Nereus LentiHERO	2 unit pack（離心管形式）
LH0001001A	LentiHERO® 1	1 mL（層析柱形式）
LH0010001B	LentiHERO® 10	10 mL（層析柱形式）
LH0010001C	LentiHERO® 100	100 mL（層析柱形式）

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Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗，是世界級層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發(fā)和生產(chǎn)基地，專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時問題，實現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程，完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。

西美杰是Astrea Bioseparations中國區(qū)代理，為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.xmjsci.com了解更多信息。

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