C3/C5人源化小鼠模型在助力siRNA與雙抗藥物研發(fā)突破中的應(yīng)用

補(bǔ)體系統(tǒng)是機(jī)體免疫防御的關(guān)鍵組成部分，其異�；罨�與多種炎癥和自身免疫性疾病密切相關(guān)，是極具潛力的新藥靶點(diǎn)。近年來，靶向C3和C5的補(bǔ)體抑制劑在臨床上表現(xiàn)出色，相較于傳統(tǒng)療法存在的給藥頻繁、組織穿透性不足等局限性，雙特異性抗體和siRNA療法等新型治療策略展現(xiàn)出突破性優(yōu)勢(shì)——通過靶向特異性調(diào)控實(shí)現(xiàn)更精準(zhǔn)、持久且高效的補(bǔ)體抑制。以siRNA療法為例，其顯著降低給藥頻率的特性可有效提升患者依從性。為加速這些創(chuàng)新療法的研發(fā)，賽業(yè)生物開發(fā)了C3和C5人源化小鼠模型。這些模型通過精準(zhǔn)基因替換確保人源蛋白表達(dá)，為雙抗、siRNA等新型補(bǔ)體抑制劑及其聯(lián)合治療方案提供高度臨床相關(guān)的研發(fā)平臺(tái)，助力攻克補(bǔ)體相關(guān)疾病的治療瓶頸。

補(bǔ)體系統(tǒng)核心分子C3和C5
補(bǔ)體系統(tǒng)作為固有免疫的重要組成部分，在宿主防御、炎癥調(diào)控及組織穩(wěn)態(tài)維持中發(fā)揮核心作用，其中補(bǔ)體成分C3和C5是該系統(tǒng)的關(guān)鍵效應(yīng)分子。C3作為血漿中含量最豐富的補(bǔ)體蛋白，主要由肝臟合成，在經(jīng)典途徑、旁路途徑和凝集素途徑三條補(bǔ)體激活通路中，均會(huì)被C3轉(zhuǎn)化酶裂解為C3a和C3b。C3a作為強(qiáng)效過敏毒素，可介導(dǎo)促炎反應(yīng)；而C3b不僅具有調(diào)理素功能，能促進(jìn)病原體清除，還可參與形成C5轉(zhuǎn)化酶，進(jìn)一步激活下游補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)。C5同樣由肝臟合成，經(jīng)C5轉(zhuǎn)化酶作用后生成C5a和C5b，前者是強(qiáng)效炎癥介質(zhì)，后者則啟動(dòng)膜攻擊復(fù)合體（MAC）的組裝，介導(dǎo)細(xì)胞裂解等生物學(xué)效應(yīng)。值得關(guān)注的是，當(dāng)C3缺失時(shí)，凝血酶可通過替代途徑激活C5，這一發(fā)現(xiàn)揭示了補(bǔ)體系統(tǒng)與凝血系統(tǒng)之間的新型交互機(jī)制。
 

補(bǔ)體通過經(jīng)典途徑、凝集素途徑和旁路途徑進(jìn)行傳播。^[1]。

siRNA療法與雙特異性抗體成補(bǔ)體靶向治療新焦點(diǎn)
目前針對(duì)補(bǔ)體C3靶點(diǎn)的研發(fā)管線主要聚焦于補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病領(lǐng)域，包括C3腎小球�。–3G）、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿（PNH）、非典型溶血尿毒綜合征（aHUS）和年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）等。該靶點(diǎn)已有成熟的合成多肽抑制劑Pegcetacoplan上市，當(dāng)前研發(fā)熱點(diǎn)轉(zhuǎn)向siRNA藥物，其中進(jìn)展最快的項(xiàng)目已進(jìn)入II期臨床，吸引了多家國內(nèi)外企業(yè)布局 ^[2]。補(bǔ)體C5位于補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)的末端，其裂解產(chǎn)物C5a和C5b-9（膜攻擊復(fù)合物，MAC）是介導(dǎo)炎癥和細(xì)胞損傷的關(guān)鍵效應(yīng)分子。C5異常激活與多種疾病相關(guān)，包括陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿（PNH）、非典型溶血性尿毒癥綜合征（aHUS）、重癥肌無力（gMG）及視神經(jīng)脊髓炎譜系疾�。∟MOSD）等。目前C5靶點(diǎn)已有多個(gè)單抗藥物上市，創(chuàng)新療法中：Gefurulimab（雙特異性納米抗體聯(lián)合albumin）正在gMG領(lǐng)域開展III期臨床；RNAi療法Cemdisiran則在IgA腎病適應(yīng)癥中顯示出潛力并進(jìn)入III期。值得關(guān)注的是，C3和C5雙靶點(diǎn)抑制的雙抗藥物和基因療法藥物也在近期進(jìn)入二期臨床階段，分別用于C3腎小球病和AMD治療 ^[2]。這一趨勢(shì)預(yù)示著未來補(bǔ)體疾病治療可能向多機(jī)制聯(lián)合、更精準(zhǔn)便利的方向發(fā)展。
 

Kriya的AAV基因療法抑制補(bǔ)體C3和C5通路 ^[3]。

ANGPT2/VEGFA人源化小鼠：抗血管生成治療新工具
賽業(yè)生物開發(fā)的C3基因人源化小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：I001135）和C5基因人源化小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：C001824），為補(bǔ)體系統(tǒng)相關(guān)疾病研究提供了重要的臨床前工具。這些模型旨在幫助：
1）加速驗(yàn)證C3和C5作為補(bǔ)體介導(dǎo)疾�。ㄈ鏟NH、aHUS、AMD等）治療靶點(diǎn)的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)價(jià)值；
2）促進(jìn)開發(fā)新型補(bǔ)體靶向藥物（如siRNA療法、雙抗藥物及基因治療策略）；
3）優(yōu)化現(xiàn)有補(bǔ)體抑制劑的臨床前療效評(píng)估，為精準(zhǔn)治療研究提供可靠動(dòng)物模型支持。

部分驗(yàn)證數(shù)據(jù)如下（詳見品系說明書）

B6-hC3小鼠

• 蛋白表達(dá)檢測

ELISA結(jié)果顯示，純合雄性（hC3-Ho-♂）、純合雌性（hC3-Ho-♀）和雜合雌性（hC3-Het-♀）的B6-hC3小鼠的血清中均檢測到人源C3蛋白的顯著表達(dá)。

B6-hC3小鼠和野生型小鼠（WT）血清中人源C3蛋白的表達(dá)。
 

• 視網(wǎng)膜表型檢測

純合B6-hC3小鼠的眼底形態(tài)和視網(wǎng)膜OCT結(jié)果與野生型一致。
*OD (Oculus Dexter)：右眼；OS (Oculus Sinister)：左眼。

8周齡純合B6-hC3小鼠和野生型小鼠（WT）的眼底形態(tài)（Fundus）和光學(xué)相干斷層掃描（OCT）檢測結(jié)果。

• 視網(wǎng)膜電圖（ERG）檢測

結(jié)果顯示，8周齡純合B6-hC3小鼠暗適應(yīng)（Scotopic）和明適應(yīng)（Photopic）的a波、b波振幅幾乎與野生型小鼠相同，表明純合B6-hC3小鼠的視網(wǎng)膜感光器功能正常。

8周齡野生型小鼠（WT）和純合B6-hC3小鼠眼部ERG檢測結(jié)果

 B6-hC5小鼠

• 基因表達(dá)檢測

RT-qPCR分析表明，B6-hC5純合小鼠的肝臟和肺組織中檢測到人源C5基因表達(dá)（鼠源C5未檢出），而野生型（WT）小鼠僅檢測到內(nèi)源性鼠源C5表達(dá)

6周齡純合 B6-hC5小鼠和野生型（WT）小鼠肝臟（Liver）和肺（Lung）的基因表達(dá)檢測。 

• 蛋白表達(dá)檢測

ELISA結(jié)果顯示，B6-hC5小鼠的血清和血漿中存在人源C5和C5a的顯著表達(dá)，而WT中未表達(dá)。本次血清和血漿樣本的檢測結(jié)果無差異。雄性純合B6-hC5小鼠的人源C5和C5a表達(dá)量均顯著高于雌鼠。

6周齡純合B6-hC5小鼠和野生型（WT）小鼠血清（Serum）和血漿（Plasma）中人源C5和C5a蛋白的表達(dá)情況。

• 模型總結(jié)

綜上，賽業(yè)生物開發(fā)的C3人源化小鼠（產(chǎn)品編號(hào)：I001135）和C5人源化小鼠（產(chǎn)品編號(hào)：C001824）精準(zhǔn)重構(gòu)了人類補(bǔ)體系統(tǒng)的關(guān)鍵調(diào)控機(jī)制，為補(bǔ)體介導(dǎo)疾�。ㄈ鏟NH、aHUS、AMD等）的病理研究提供了高度可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。該模型完美模擬人類補(bǔ)體蛋白的表達(dá)特征，使其成為靶向C3/C5藥物開發(fā)（包括siRNA療法、雙抗藥物及其他補(bǔ)體抑制劑）、聯(lián)合治療方案評(píng)估和臨床前藥效驗(yàn)證的理想工具，將顯著推動(dòng)補(bǔ)體靶向治療領(lǐng)域的創(chuàng)新突破。

參考文獻(xiàn)

• Coulthard LG, Hawksworth OA, Woodruff TM. Complement: The Emerging Architect of the Developing Brain. Trends Neurosci. 2018 Jun;41(6):373-384. doi: 10.1016/j.tins.2018.03.009. Epub 2018 Mar 29. PMID: 29606485.
• Conversano E, Vivarelli M. Advances in Complement Inhibitory Strategies for the Treatment of Glomerular Disease: A Rapidly Evolving Field. J Clin Med. 2025 Jun 13;14(12):4204. doi: 10.3390/jcm14124204. PMID: 40565949; PMCID: PMC12194467.
• Kriya Therapeutics. Ophthalmology Pipeline. Available at: https://kriyatherapeutics.com/pipeline/ophthalmology/. Accessed July 3, 2025.