實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）模型的建立與評(píng)估

實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）是一種以特異性致敏的CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)為主的自身免疫性疾病，其病理變化與多發(fā)性硬化（MS）類似。EAE模型是研究MS病理過程和發(fā)病機(jī)制的重要工具，在臨床神經(jīng)免疫學(xué)研究中具有重要意義。

 

多種動(dòng)物可用于EAE模型的建立，包括雞、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、羊、犬和猴等。不同種屬或品系的動(dòng)物對(duì)EAE的敏感性存在顯著差異。常用的敏感動(dòng)物包括Lewis和DA大鼠、PL/J和SJL/J小鼠以及Hartley和Strain13豚鼠等。小鼠和大鼠的EAE模型在臨床表現(xiàn)、病理和免疫等方面與人類脫髓鞘疾病較為相似，因此應(yīng)用最為廣泛。

主動(dòng)誘導(dǎo)法是通過將抗原與佐劑混合后注射到動(dòng)物體內(nèi)，經(jīng)過一定時(shí)間的潛伏期誘導(dǎo)EAE的產(chǎn)生。常用的致敏抗原有髓鞘堿性蛋白（MBP）、蛋白脂（PLP）、髓寡樹突細(xì)胞糖蛋白（MOG）等。
1、抗原與佐劑的混合：抗原需與佐劑（如完全弗氏佐劑，CFA）混合制成乳劑。CFA能提高抗原的免疫反應(yīng)強(qiáng)度并延長(zhǎng)免疫時(shí)間，而百日咳毒素（PTX）可增加血管通透性，促進(jìn)T細(xì)胞通過血腦屏障。
2、注射途徑：常用的注射途徑包括皮下、腹腔和尾靜脈等，其中皮下多點(diǎn)注射和腳墊注射的發(fā)病率較高。

被動(dòng)轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)通過將EAE抗原特異反應(yīng)性T細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給同一品系的健康動(dòng)物，使其發(fā)病。這是研究EAE發(fā)病機(jī)制的直接證據(jù)，也是研究治療和預(yù)防措施的良好模型。

 

根據(jù)Kono等提出的標(biāo)準(zhǔn)，神經(jīng)功能評(píng)分分為5級(jí)：1級(jí)為尾部無力，2級(jí)為尾部無力加肢體無力，3級(jí)為肢體輕度麻痹，4級(jí)為肢體嚴(yán)重麻痹，5級(jí)為瀕死狀態(tài)。

通過HE染色等方法檢查中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥和脫髓鞘情況。EAE模型組小鼠脊髓中可見大量炎性細(xì)胞聚集，髓鞘結(jié)構(gòu)松散、崩解，密度降低。

EAE模型組小鼠脊髓中活化的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多，而活化星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少。

EAE模型小鼠中致炎細(xì)胞Th17數(shù)量顯著增加，抑炎細(xì)胞Treg和Breg數(shù)量顯著降低。

EAE模型是研究MS病理機(jī)制和治療方法的重要工具。通過優(yōu)化建模方法和評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，EAE模型為揭示MS的發(fā)病機(jī)制和開發(fā)新的治療策略提供了有力支持。

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