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解讀正確溶解與稀釋ELISA標(biāo)準(zhǔn)品

瀏覽次數(shù):358 發(fā)布日期:2022-5-31  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子,標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。怎樣正確溶解、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品呢?
1. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。
2. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末完全溶解。
    注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:
(1)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:
若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

(2)耗材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫(xiě)上S1-S7、空白。

(3)梯度稀釋:根據(jù)說(shuō)明書(shū),每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。

(4)空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。
注意:梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度。
標(biāo)準(zhǔn)品溶解、梯度稀釋是ELISA實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn),按以上方法梯度稀釋就可!
發(fā)布者:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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