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染色質(zhì)免疫共沉淀ChIP試劑盒的用法及常見實(shí)操問題解答

瀏覽次數(shù):399 發(fā)布日期:2025-11-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
做染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)時(shí),總怕試劑配錯(cuò)、組分漏帶導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中斷?新鮮樣本處理后沒法立馬推進(jìn)實(shí)驗(yàn),擔(dān)心影響 DNA 與蛋白質(zhì)的結(jié)合狀態(tài)?多個(gè)樣本同步處理,怕批間效應(yīng)干擾結(jié)果準(zhǔn)確性?想開展超聲法 ChIP 實(shí)驗(yàn),又不想逐個(gè)準(zhǔn)備緩沖液、抗體等耗材?這款染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)試劑盒,幫您解決這些問題!

本試劑盒又稱 ChIP Kit、超聲法染色質(zhì)免疫共沉淀試劑盒,專為超聲法 ChIP 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),可助力研究 DNA 與蛋白質(zhì)的結(jié)合關(guān)系(如基因調(diào)控相關(guān)的蛋白 - DNA 互作),試劑盒含 26 種完整組分,無需額外采購(gòu)核心試劑,讓實(shí)驗(yàn)流程更順暢。​
 

序號(hào)

名稱

包裝量

保存溫度

1

蛋白 A/G 磁珠

450ul

 

 

 

 

 

2-8℃

 

 

 

 

 

2

ChIP 稀釋緩沖液

12.5ml

3

低鹽洗滌緩沖液

12.5ml

4

高鹽洗滌緩沖液

12.5ml

5

Licl 洗滌緩沖液(A+B)

13(6.5+6.5)ml

6

TE 緩沖液

12.5ml

7

細(xì)胞裂解緩沖液

5ml

8

細(xì)胞核裂解緩沖液

5ml

9

ChIP 洗脫緩沖液(W/O 蛋白酶 K)

5ml

10

10 x 甘氨酸

25ml

11

10 x PBS

60ml

12

離心過濾器 (Gel Recovery Column)

24個(gè)





 

  2-8℃

 

 

 

 

 

 

13

2.0 ml接收管 (2.0 ml Collection Tube)

24個(gè)

14

1.5 ml接收管 (1.5 ml Collection Tube)

24個(gè)

15

激活buffer (Buffer CBS)

7ml

16

結(jié)合緩沖液 (Binding Solution)

12ml

17

WA Solution

12.5ml

18

Wash Solution

6ml

19

Elution Buffer

5ml

20

ddH2O

5ml

21

蛋白酶抑制劑混合物,100x DMSO 儲(chǔ)液

350µl

 

 

 

-20 ℃

 

22

蛋白酶 K(20mg/ml)

60ul

23

核糖核酸酶 A(10mg/ml)

60ul

24

RNA 聚合酶 II 抗體,克隆號(hào) CTD4H8

25ug

25

Normal Mouse IgG

25ug

26

對(duì)照引物

75ul


結(jié)合 Miltenyian 在科研試劑應(yīng)用領(lǐng)域的經(jīng)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)大家在 ChIP 試劑盒實(shí)操中常遇到組分保存、樣本處理等疑問,為此整理了以下 FAQ,幫您提前厘清關(guān)鍵問題、規(guī)避實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn):​
Q1:ChIP 試劑盒能用于哪種實(shí)驗(yàn)?適用研究方向是什么?
A:專為超聲法染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),可用于研究細(xì)胞內(nèi) DNA 與蛋白質(zhì)的特異性結(jié)合關(guān)系,比如基因調(diào)控領(lǐng)域中 “調(diào)控蛋白與基因啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合” 的驗(yàn)證、轉(zhuǎn)錄因子與 DNA 結(jié)合位點(diǎn)的篩選等研究;暫不支持單細(xì)胞樣本的 ChIP 實(shí)驗(yàn),僅適用于組織或細(xì)胞團(tuán)樣本。​
Q2:試劑盒的組分該怎么保存?有效期有多久?
A:需按組分類型分開保存:蛋白 A/G 磁珠、ChIP 稀釋緩沖液、低鹽 / 高鹽洗滌緩沖液、Licl 洗滌緩沖液、TE 緩沖液、細(xì)胞 / 細(xì)胞核裂解緩沖液、離心過濾器、2.0ml/1.5ml 接收管、激活 buffer、結(jié)合緩沖液等大部分組分,需在 2-8℃條件下保存;蛋白酶抑制劑混合物(100x DMSO 儲(chǔ)液)、蛋白酶 K(20mg/ml)、核糖核酸酶 A(10mg/ml)、RNA 聚合酶 II 抗體(克隆號(hào) CTD4H8)、Normal Mouse IgG,需在 - 20℃條件下保存。試劑盒整體有效期為 1 年,需避免組分反復(fù)凍融。​
Q3:使用試劑盒處理樣本時(shí),有什么注意事項(xiàng)?
A:若實(shí)驗(yàn)需切割組織樣本,建議在試劑盒的緩沖液(如細(xì)胞裂解緩沖液)中操作,避免樣本暴露在空氣中導(dǎo)致細(xì)胞損傷;若開展分子生物學(xué)相關(guān)研究(如后續(xù) DNA 測(cè)序),組織樣本大小建議不超過 1cm³,減少細(xì)胞機(jī)械損傷,保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)中染色質(zhì)的完整性;樣本需完全浸沒在對(duì)應(yīng)緩沖液(如細(xì)胞裂解緩沖液)中,避免因液體不足導(dǎo)致局部細(xì)胞失活。​
Q4:試劑盒能支持多少次實(shí)驗(yàn)?有沒有對(duì)照試劑驗(yàn)證結(jié)果?
A:試劑盒配備 24 個(gè)離心過濾器、24 個(gè) 2.0ml 接收管及 24 個(gè) 1.5ml 接收管,按單次實(shí)驗(yàn)使用 1 套耗材計(jì)算,通?芍С 24 次實(shí)驗(yàn)(具體次數(shù)需根據(jù)單次實(shí)驗(yàn)的樣本量調(diào)整,若單次處理多個(gè)樣本,次數(shù)會(huì)相應(yīng)減少);含 75ul 對(duì)照引物,實(shí)驗(yàn)后可通過 PCR 等方法檢測(cè)對(duì)照引物的擴(kuò)增結(jié)果,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)流程是否正確、是否存在非特異性干擾,確保結(jié)果可靠。​
Q5:試劑盒中的酶和抗體有什么作用?是否需要額外準(zhǔn)備?
A:試劑盒已包含完整的酶與抗體組分,無需額外準(zhǔn)備:蛋白酶抑制劑混合物可抑制樣本中蛋白降解酶的活性,保護(hù)目標(biāo)蛋白質(zhì);蛋白酶 K 可降解實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的非目標(biāo)蛋白質(zhì),減少雜質(zhì)干擾;核糖核酸酶 A 可去除樣本中的 RNA,避免 RNA 與 DNA 結(jié)合影響結(jié)果;RNA 聚合酶 II 抗體可特異性結(jié)合 RNA 聚合酶 II(常見研究目標(biāo)蛋白),助力目標(biāo)蛋白 - DNA 復(fù)合物的捕獲;Normal Mouse IgG 作為陰性對(duì)照,用于排除實(shí)驗(yàn)中的非特異性結(jié)合,提升結(jié)果準(zhǔn)確性。​
Q6:若部分組分提前用完,能否單獨(dú)補(bǔ)充?長(zhǎng)期不用的組分該怎么處理?
A:目前試劑盒為完整套裝,暫不提供單獨(dú)組分購(gòu)買服務(wù),建議實(shí)驗(yàn)前根據(jù)樣本數(shù)量規(guī)劃單次用量,避免浪費(fèi);長(zhǎng)期不用的 - 20℃保存組分(如酶、抗體),可按單次實(shí)驗(yàn)用量分裝后密封保存,減少反復(fù)凍融對(duì)活性的影響;2-8℃保存的緩沖液,開封后需注意密封,避免污染,建議 1 個(gè)月內(nèi)使用完畢。
本文章由AI生成,僅用于科普參考。
名稱 貨號(hào) 規(guī)格
OCT包埋劑 abs9756-110mL 110mL
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)試劑盒 abs50034-22T 22T
Series S Sensor Chip CM5, 10-pack 29149603 10片
發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:15921930842
E-mail:yh-wang@univ-bio.com

標(biāo)簽: ChIP
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