HaloTag pull-down技術(shù)介紹

蛋白Pull down技術(shù)將目標(biāo)蛋白進(jìn)行體外原核表達(dá)，使標(biāo)簽蛋白（Halo、GST、His等）與目標(biāo)蛋白融合表達(dá)，可以不受抗體、物種限制僅借助標(biāo)簽的親和介質(zhì)將目標(biāo)蛋白純化出來(lái)，目標(biāo)蛋白在純化過(guò)程中可以將與其能夠發(fā)生作用的蛋白“下拉”下來(lái)，進(jìn)而利用蛋膠、Western Blot或者質(zhì)譜鑒定拉下來(lái)的蛋白質(zhì)，這些蛋白即與目標(biāo)蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down實(shí)驗(yàn)還可以通過(guò)外源同時(shí)表達(dá)目標(biāo)蛋白和待測(cè)蛋白，利用Pull down點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的確定它們是否發(fā)生直接的相互作用，也可以僅表達(dá)蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域進(jìn)行蛋白Pull down，確定兩個(gè)蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。
本公司主要提供Halo/GST-tag pull down：Halo-tag pull down是使用體外真核表達(dá)系統(tǒng)來(lái)表達(dá)目的蛋白，表達(dá)的目的蛋白攜帶Halo標(biāo)簽；GST-tag pull down是使用大腸桿菌誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白，表達(dá)的目的蛋白攜帶GST標(biāo)簽，也可以利用其它標(biāo)簽蛋白進(jìn)行pull down實(shí)驗(yàn)。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
1、采用真核無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)，表達(dá)蛋白可進(jìn)行翻譯后修飾，更接近體內(nèi)真實(shí)蛋白狀態(tài)。
2、無(wú)需轉(zhuǎn)化和鑒定，可直接表達(dá)目的蛋白，節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
3、蛋白表達(dá)成功率高，系統(tǒng)模擬真核細(xì)胞折疊環(huán)境、無(wú)活細(xì)胞內(nèi)空間擁擠限制，表達(dá)產(chǎn)物無(wú)包涵體。
送樣要求與交付周期

 

 

技術(shù)流程：

 

結(jié)果示例：