Necrosulfonamide抑制劑的作用機(jī)制及在細(xì)胞死亡機(jī)制研究中的應(yīng)用

Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）是一種被廣泛用于細(xì)胞死亡機(jī)制研究的小分子抑制劑，其核心作用機(jī)制在于共價(jià)結(jié)合混合譜系激酶結(jié)構(gòu)域樣蛋白（MLKL）的半胱氨酸86位點(diǎn)，阻斷MLKL聚合物形成，從而特異性抑制壞死性凋亡（necroptosis）[1]。同時(shí)，Necrosulfonamide（CAS No.：1360614-48-7）也被證實(shí)可直接靶向結(jié)合并抑制焦亡關(guān)鍵執(zhí)行蛋白Gasdermin D（GSDMD），阻斷其成孔活性以抑制細(xì)胞焦亡（pyroptosis）[2]。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）常以1–10 μM濃度應(yīng)用于多種細(xì)胞模型：在BV2小膠質(zhì)細(xì)胞中用于抑制LPS（Lipopolysaccharides）或poly(I:C) 誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及壞死性凋亡；Necrosulfonamide（NSA）能以2.5和4 μM的濃度在A549與H1299肺癌細(xì)胞中抑制PPVI激活的NLRP3炎癥小體通路[3]。Necrosulfonamide（NSA）還在U937人單核細(xì)胞、HaCaT人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞、原代神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs）、AR42J大鼠胰腺腺泡細(xì)胞、H9c2大鼠心肌細(xì)胞及人星形膠質(zhì)細(xì)胞中，被用于評(píng)估其對(duì)壞死性凋亡或焦亡相關(guān)指標(biāo)（如p-MLKL、IL-1β、LDH釋放、ROS水平）的調(diào)控作用。

范例詳解
JACC Basic Transl Sci. 2023 Aug 30;8(9):1060-1077.
實(shí)驗(yàn)人員使用了AbMole的四款細(xì)胞死亡相關(guān)的抑制劑：Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）、Z-VAD-FMK （凋亡抑制劑，AbMole，M3143）、Disulfiram （焦亡抑制劑，AbMole，M3390） 、Cyclosporine A （線粒體起始的細(xì)胞凋亡抑制劑，CsA, AbMole，M1831）。其中焦亡抑制劑（Disulfiram）能最大比例的恢復(fù)細(xì)胞活力，證實(shí)缺氧誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞死亡主要是通過(guò)焦亡途徑。
 

圖1. Hypoxia induces HUVEC pyroptosis[4]

 
參考文獻(xiàn)及鳴謝
[1] Liu, S.; Liu, H.; Johnston, A.; et al. MLKL forms disulfide bond-dependent amyloid-like polymers to induce necroptosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2017, 114 (36), E7450-e7459.
[2] Menacher, G.; Balszuweit, F.; Lang, S.; et al. Necrosulfonamide - Unexpected effect in the course of a sulfur mustard intoxication. Chemico-biological interactions 2019, 298, 80-85.
[3] Teng, J. F.; Mei, Q. B.; Zhou, X. G.; et al. Polyphyllin VI Induces Caspase-1-Mediated Pyroptosis via the Induction of ROS/NF-kappaB/NLRP3/GSDMD Signal Axis in Non-Small Cell Lung Cancer. Cancers 2020, 12 (1).
[4] Zhang, M.; Chen, Y.; Qiu, Y.; et al. PCSK9 Promotes Hypoxia-Induced EC Pyroptosis by Regulating Smac Mitochondrion-Cytoplasm Translocation in Critical Limb Ischemia. JACC. Basic to translational science 2023, 8 (9), 1060-1077.