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多重染色試劑盒助力解析人類(lèi)早期胚胎原腸胚空間細(xì)胞圖譜與分子機(jī)制

瀏覽次數(shù):95 發(fā)布日期:2026-3-16  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

在人類(lèi)胚胎發(fā)育研究中,原腸胚形成階段(gastrulation)是奠定身體軸線(xiàn)與三胚層分化的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),但由于早期胚胎樣本稀缺且缺乏空間維度信息,相關(guān)研究長(zhǎng)期受限。近期,一項(xiàng)發(fā)表于《Nature Cell Biology》的研究憑借空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)與多重免疫熒光驗(yàn)證的創(chuàng)新組合,首次完整解析了 Carnegie stage(CS)7 人類(lèi)胚胎的空間細(xì)胞圖譜與分子機(jī)制 —— 而 Absin 的多色試劑盒正是該研究免疫熒光驗(yàn)證環(huán)節(jié)的關(guān)鍵支撐。

文獻(xiàn)標(biāo)題:Spatial transcriptomic characterization of a Carnegie stage 7 human embryo
發(fā)表期刊:Nature Cell Biology(IF 19.1)
DOI:https://doi.org/10.1038/s41556-024-01597-3
核心試劑:七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(abs50015)、抗體洗脫液(abs994)

一、研究思路:空間維度 + 分子驗(yàn)證,破解早期胚胎研究瓶頸
傳統(tǒng)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組雖能解析細(xì)胞類(lèi)型,但無(wú)法還原細(xì)胞在胚胎中的空間定位,導(dǎo)致中胚層亞型區(qū)分、關(guān)鍵信號(hào)中心識(shí)別等難題。本研究創(chuàng)新性采用 “空間轉(zhuǎn)錄組(Stereo-seq)+ 多重免疫熒光驗(yàn)證” 的技術(shù)路線(xiàn):
  • 對(duì) CS7 人類(lèi)胚胎進(jìn)行 82 張連續(xù)冷凍切片,通過(guò) Stereo-seq 技術(shù)獲取單細(xì)分辨率的空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù);
  • 整合轉(zhuǎn)錄組與空間信息,進(jìn)行聚類(lèi)分析與 3D 胚胎模型重建;
  • 利用多重免疫熒光實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證關(guān)鍵細(xì)胞類(lèi)型(如 AVE、PGCs)與分子標(biāo)志物的表達(dá)定位,其中核心染色試劑選用 Absin 產(chǎn)品;
  • 結(jié)合調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析、擬時(shí)序分析等,揭示原腸胚形成過(guò)程中的細(xì)胞特化、信號(hào)通訊機(jī)制。

二、核心研究成果:刷新人類(lèi)早期胚胎發(fā)育認(rèn)知
1. 3D 重建 CS7 胚胎空間圖譜,定義 11 大組織簇
研究通過(guò)切片測(cè)序與數(shù)據(jù)整合,成功構(gòu)建了 CS7 胚胎的 3D 模型,精準(zhǔn)識(shí)別出外胚層、中胚層、內(nèi)胚層及羊膜、卵黃囊等 11 個(gè)主要組織簇,清晰呈現(xiàn)細(xì)胞沿前后軸、背腹軸的分布規(guī)律(原文圖 1a、1b)。這一成果解決了此前僅依賴(lài)轉(zhuǎn)錄組無(wú)法區(qū)分空間特異性細(xì)胞亞型的問(wèn)題。

2. 證實(shí)中胚層亞型早期特化,明確空間定位差異
研究發(fā)現(xiàn),CS7 胚胎中已存在軸旁中胚層、側(cè)板中胚層等不同中胚層亞型,它們雖共享經(jīng)典標(biāo)志物(如 TBXT、MESP1),但通過(guò)空間信息可明確其獨(dú)特定位(原文圖 2d、2e),修正了 “該階段中胚層未特化” 的傳統(tǒng)認(rèn)知。

3. 首次證實(shí)人類(lèi)胚胎中 AVE 存在,揭示軸建立機(jī)制
通過(guò)免疫熒光染色驗(yàn)證(原文圖 3f),研究明確了前內(nèi)臟內(nèi)胚層(AVE)在人類(lèi) CS7 胚胎中的存在及其前中央定位。AVE 通過(guò)分泌 BMP、FGF 等信號(hào)分子調(diào)控胚胎前后軸建立,其標(biāo)志物 OTX2、DKK1 的表達(dá)經(jīng) Absin 試劑染色后清晰可辨,為跨物種軸形成機(jī)制保守性提供了關(guān)鍵證據(jù)。

4. 定位原始生殖細(xì)胞,追溯起源線(xiàn)索
研究在連接莖區(qū)域識(shí)別出原始生殖細(xì)胞(PGCs),通過(guò) SOX17、TFAP2C 雙陽(yáng)性染色(原文圖 4d)確認(rèn)其定位,并推測(cè) PGCs 可能起源于外胚層衍生細(xì)胞,為生殖細(xì)胞發(fā)育研究提供了空間參考。

5. 發(fā)現(xiàn)卵黃囊非造血干細(xì)胞依賴(lài)性造血
在卵黃囊區(qū)域,研究識(shí)別出造血內(nèi)皮祖細(xì)胞、紅細(xì)胞前體等 10 個(gè)造血相關(guān)亞群,證實(shí) CS7 階段已啟動(dòng)非造血干細(xì)胞依賴(lài)性造血(原文圖 5d、5e),為造血發(fā)育起源研究提供了新視角。

三、Absin 產(chǎn)品:免疫熒光驗(yàn)證的 “可靠搭檔”
本研究的核心驗(yàn)證環(huán)節(jié) —— 多重免疫熒光實(shí)驗(yàn),關(guān)鍵依賴(lài) Absin 的兩款核心產(chǎn)品,確保了染色信號(hào)的特異性與穩(wěn)定性:
1. 產(chǎn)品清單與應(yīng)用場(chǎng)景
貨號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 研究中的應(yīng)用
abs50015 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒 用于組織切片的多重標(biāo)志物染色,實(shí)現(xiàn)多靶點(diǎn)同時(shí)檢測(cè)
abs994 抗體洗脫液
2. 產(chǎn)品在研究中的核心作用
信號(hào)放大與特異性保障: HRP 標(biāo)記二抗(abs50015)與特異性一抗結(jié)合后,可高效催化 TSA 熒光底物沉積,將微弱抗原信號(hào)放大,確保低表達(dá)標(biāo)志物(如 AVE 的 OTX2、PGCs 的 SOX17)也能被清晰檢測(cè)(原文圖 3f、4d)。
多重染色兼容性: TSA 7-colour kit(abs50015-100T)支持多輪染色與信號(hào)洗脫,搭配 abs994 抗體洗脫液可在同一張切片上檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn),避免珍貴人類(lèi)胚胎樣本浪費(fèi),這也是研究能同時(shí)驗(yàn)證多個(gè)細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)志物的關(guān)鍵(原文圖 5e 中 PECAM1、CD68、CD44 的共染色)。
結(jié)果可重復(fù)性: 產(chǎn)品經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,染色背景低、批次穩(wěn)定性高,abs994 洗脫液可反復(fù)使用不影響組織完整性,研究中免疫熒光實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3 次均獲得一致結(jié)果,為結(jié)論可靠性提供了堅(jiān)實(shí)支撐。

3. 關(guān)鍵圖文對(duì)應(yīng)

原文圖 3f:OTX2 蛋白的免疫熒光染色結(jié)果,證實(shí) AVE 在胚胎前中央?yún)^(qū)域的定位,染色過(guò)程使用 Absin HRP 二抗(abs50015)與 TSA 試劑盒(abs50015-100T),信號(hào)清晰且定位精準(zhǔn)


原文圖 4d:SOX17 與 TFAP2C 雙陽(yáng)性染色,識(shí)別 PGCs 細(xì)胞,依賴(lài) TSA 試劑盒的多重染色能力,實(shí)現(xiàn)兩個(gè)標(biāo)志物的同時(shí)檢測(cè)


原文圖 5e:卵黃囊組織中 PECAM1、CD68、CD44 的共染色,驗(yàn)證造血相關(guān)細(xì)胞的定位,Absin 產(chǎn)品確保了多靶點(diǎn)染色的信號(hào)區(qū)分度與穩(wěn)定性

四、結(jié)語(yǔ):Absin 助力科研突破,賦能生命科學(xué)探索
人類(lèi)早期胚胎發(fā)育研究的每一步進(jìn)展,都離不開(kāi)精準(zhǔn)可靠的實(shí)驗(yàn)工具。本研究憑借空間轉(zhuǎn)錄組與免疫熒光的創(chuàng)新組合,刷新了我們對(duì)原腸胚形成的認(rèn)知,而 Absin 的 TSA 多重染色試劑盒、抗體洗脫液(abs994)與 HRP 二抗,正是這一突破背后的 “幕后功臣”—— 從信號(hào)放大到多重兼容,從樣本節(jié)約到結(jié)果穩(wěn)定,全方位滿(mǎn)足珍貴樣本的高要求實(shí)驗(yàn)需求。

未來(lái),Absin 將持續(xù)深耕生命科學(xué)試劑領(lǐng)域,以更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品支持更多前沿研究,助力科學(xué)家破解生命發(fā)育的核心謎題,推動(dòng)人類(lèi)健康與再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步!

文中使用產(chǎn)品:

貨號(hào) 名稱(chēng) 規(guī)格
abs50015 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs994 抗體洗脫液(mIHC專(zhuān)用) 30mL
更多多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒
貨號(hào) 商品名 規(guī)格
abs50086 雙色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗) 100T
abs50087 雙色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 100T
abs50088 三色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗) 100T
abs50089 三色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 100T
abs50012 四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50168 四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒B(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50013 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50029 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50014 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50030 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50048 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(plus)(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50049 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(plus)(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50015 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50031 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50037 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(plus)(鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50038 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(plus)(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50165 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(770染料增強(qiáng)版)(抗兔二抗) 20T/50T/100T
abs50166 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(770染料增強(qiáng)版)(抗鼠兔通用二抗) 20T/50T/100T
abs50018 十色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒 100T
abs50083 肺癌腫瘤微環(huán)境多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)試劑盒(I) 20T
abs50084 肺癌腫瘤微環(huán)境多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)試劑盒(II) 20T

【免責(zé)聲明】本文內(nèi)容基于《Nature Cell Biology》(DOI: 10.1038/s41556-024-01597-3)原文獻(xiàn),由 AI 解讀整理;文中涉及的原文獻(xiàn)圖片、數(shù)據(jù)等知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸原期刊及研究團(tuán)隊(duì)所有。若存在侵權(quán)情形,敬請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我方刪除,我方將積極配合處理。
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