在生物藥研發(fā)的早期階段,快速獲取足量、高質(zhì)量的候選蛋白或抗體,是推進(jìn)靶點驗證、功能篩選和臨床前研究的關(guān)鍵。傳統(tǒng)的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建雖適用于后期大規(guī)模生產(chǎn),但其開發(fā)周期長、成本高、流程復(fù)雜,難以滿足早期研發(fā)對速度與靈活性的要求。而基于PEI或脂質(zhì)體等化學(xué)試劑的常規(guī)瞬時表達(dá)方法,盡管能在短期內(nèi)產(chǎn)出具備正確翻譯后修飾的功能性蛋白或抗體,但仍普遍存在滴度低、工藝難以線性放大、適用細(xì)胞類型有限等問題。
MaxCyte 的流式電穿孔技術(shù)為此提供了靈活高效的解決方案,通過非病毒、無殘留的高效遞送方式,可在多種細(xì)胞類型中實現(xiàn)高滴度的瞬時蛋白與抗體表達(dá),不僅大幅縮短早期研發(fā)周期,還為后續(xù)向穩(wěn)定細(xì)胞系生產(chǎn)的無縫過渡奠定堅實基礎(chǔ)。
01. 自由選用適配細(xì)胞
MaxCyte ExPERT™ 電穿孔平臺適用于多種細(xì)胞類型,能夠高效遞送多種分子,在確保高細(xì)胞存活率的同時,實現(xiàn)高滴度的重組蛋白表達(dá)?芍С侄喾N常用于蛋白生產(chǎn)的細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染結(jié)果高度可重復(fù),包括:
• CHO及其衍生細(xì)胞系
• HEK細(xì)胞
• Vero細(xì)胞
• NS0細(xì)胞
• 昆蟲細(xì)胞

02. 數(shù)日實現(xiàn)高滴度瞬時抗體表達(dá)
MaxCyte 電穿孔技術(shù)可在多種規(guī)模下支持高滴度抗體表達(dá),顯著加速抗體開發(fā)進(jìn)程。通過瞬時轉(zhuǎn)染細(xì)胞獲得的高蛋白產(chǎn)量,足以支持多項早期研究應(yīng)用,從而節(jié)省穩(wěn)定細(xì)胞株開發(fā)所需的時間與資源。

對 CHO-K1SV 細(xì)胞進(jìn)行電穿孔后,可在兩周內(nèi)實現(xiàn)超過 1g/L 的抗體滴度。
03. 快速篩選最優(yōu)瞬時表達(dá)條件
在穩(wěn)定和瞬時表達(dá)體系中,多種因素均可影響外源基因的表達(dá)水平,包括細(xì)胞類型、培養(yǎng)密度以及培養(yǎng)基和補(bǔ)料策略。借助 MaxCyte 電穿孔儀及配套耗材實現(xiàn)的高效、可重復(fù)轉(zhuǎn)染,研發(fā)人員可快速篩選并確定適用于自身體系的最優(yōu)瞬時表達(dá)條件,從而實現(xiàn)最高產(chǎn)量。

采用 MaxCyte 電穿孔技術(shù)在ExpiCHO™系統(tǒng)中已可實現(xiàn)相對較高的抗體滴度,若換用其他培養(yǎng)基,還可進(jìn)一步提升表達(dá)水平。
04. 高細(xì)胞存活率加速穩(wěn)定株開發(fā)
穩(wěn)定細(xì)胞株開發(fā)通常成本高、周期長。在確定優(yōu)選候選分子后,亟需快速獲得高產(chǎn)克隆并盡早建立主細(xì)胞庫 (MCB)。MaxCyte 電穿孔技術(shù)將高轉(zhuǎn)染效率與高細(xì)胞存活率相結(jié)合,使細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后更快恢復(fù),從而提前啟動篩選,顯著縮短開發(fā)周期。
