人可溶性環(huán)氧化合物水解酶/FABP3/CD40 ELISA試劑盒操作說明書

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷

檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被adropin（AD）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的adropin（AD）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒組成

名稱	96孔配置	48孔配置	備注
微孔酶標板	12孔×8條	12孔×4條	無
標準品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	無
樣本稀釋液	6mL	3mL	無
檢測抗體-HRP	10mL	5mL	無
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說明書進行稀釋
底物A	6mL	3mL	無
底物B	6mL	3mL	無
終止液	6mL	3mL	無
封板膜	2張	2張	無
說明書	1份	1份	無
自封袋	1個	1個	無

• 注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、25、50、100、200、400 pg/mL
  試劑盒保存：2-8℃
• 有效期：6個月

樣品收集、處理及保存方法
1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

• 酶標儀（450nm）
• 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱

操作步驟
 
操作注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標板被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)( ×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
6.嚴格按照説明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
7.底物請避光保存。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用
 
溫馨提示：本公司提供代測服務(wù)，凡購買本公司Elisa試劑盒均可享受免費的Elisa代測服務(wù)。詳情請咨詢銷售經(jīng)理或在線客服。