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通過CASY獲得準(zhǔn)確的T細(xì)胞存活率驗(yàn)證CRISPR篩選

瀏覽次數(shù):525 發(fā)布日期:2025-9-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

Lin and Levi et. al. Multimodal stimulation screens reveal unique and shared genes limiting T cell fitness, Cancer Cell. 2024 Apr 8;42(4):623–645.

挑戰(zhàn): 
在CRISPR篩選中識(shí)別出潛在的基因“靶點(diǎn)”后,研究人員需要一種高度準(zhǔn)確且可重復(fù)的方法來驗(yàn)證這些發(fā)現(xiàn),即在不同刺激條件下定量測(cè)定存活的T細(xì)胞數(shù)量。

CASY的貢獻(xiàn): 
CASY細(xì)胞計(jì)數(shù)器因其基于電場(chǎng)排斥原理的客觀、無標(biāo)記活細(xì)胞測(cè)量技術(shù)而被選中。CASY的精準(zhǔn)數(shù)據(jù)與流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合計(jì)數(shù)微球的方法相當(dāng),證實(shí)了敲除Dap5基因在強(qiáng)烈的急性及慢性刺激條件下顯著增加了活T細(xì)胞的數(shù)量。
  

OLS CASY 細(xì)胞計(jì)數(shù)器
 

對(duì)研究的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì):
§ §無與倫比的準(zhǔn)確性:獲得實(shí)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義所需的精確細(xì)胞計(jì)數(shù),并自信地驗(yàn)證基因敲除效應(yīng)。
§ §無標(biāo)記分析:基于細(xì)胞膜完整性評(píng)估細(xì)胞存活率,無需染料或標(biāo)記物,節(jié)省時(shí)間并消除潛在的偽影。
§ §高通量效率:快速客觀地并行分析多個(gè)基因靶點(diǎn)和條件,加速功能驗(yàn)證。
§ §可靠的基因組篩選驗(yàn)證:生成確認(rèn)功能基因組學(xué)篩選結(jié)果所需的可靠增殖數(shù)據(jù)。

 

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