《細(xì)胞探險(xiǎn)隊(duì)》旅程更新！繼T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴細(xì)胞系、單核-巨噬細(xì)胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）的培養(yǎng)合集后，這次探索的是NK細(xì)胞系！緊跟《細(xì)胞探險(xiǎn)隊(duì)》，開啟細(xì)胞培養(yǎng)的奇妙之旅：覆蓋上百種細(xì)胞系，積累干貨經(jīng)驗(yàn)和技巧，讓細(xì)胞培養(yǎng)不再難！各位童鞋，如果有想要了解的細(xì)胞系或者遇到哪些問題，也歡迎留言~
NK-92
1. 名稱：NK-92（人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞）
2. 別稱：NK92、Natural Killer-92、NK-92.05、Neukoplast、aNK12
3. 簡(jiǎn)介：NK-92是從一名50歲男性非霍奇金淋巴瘤患者的外周血單核細(xì)胞中分離并建立，經(jīng)EB病毒（EBV）轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)永生化，從而形成持續(xù)增殖的NK細(xì)胞系。
4. 種屬：人
5. 組織來源：外周血
6. 生長(zhǎng)特性：懸浮細(xì)胞
7. 應(yīng)用：腫瘤免疫治療研究；CAR-NK開發(fā)；藥物篩選；臨床前研究等。
8. 細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
圖片來源于ATCC
9. 培養(yǎng)條件：
（1）完全培養(yǎng)基配方：MEMα（SH30265.01）＋12.5%FBS（SV30208.02）+100-200 U/ml IL-2（UA040057-50μg）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 換液頻率：2-3次/周，可通過補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基（半量換液）或者離心換液兩種方式進(jìn)行換液
11. 傳代周期： 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1-2*10^6/mL可進(jìn)行傳代
12. 傳代比例：1:2-1:3
13. 凍存液配方：90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）
14. 注意事項(xiàng)：
（1）培養(yǎng)基中必須持續(xù)補(bǔ)充IL-2（濃度≥100 U/mL），否則細(xì)胞48小時(shí)內(nèi)死亡；
（2）NK-92輕度聚集為正�，F(xiàn)象，但大面積結(jié)塊可能提示狀態(tài)不佳，可輕柔吹打（避免劇烈震蕩或過濾）或降低細(xì)胞密度（高密度易加劇聚集）來減輕結(jié)塊現(xiàn)象；
（3）避免過度離心：離心速度≤300×g。
NK-92MI
1. 名稱：NK-92MI (人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)
2. 別稱：NK-92 MI、NK-92 mi、NK92-MI
3. 簡(jiǎn)介：NK-92MI細(xì)胞是轉(zhuǎn)染得到的源自NK-92細(xì)胞的IL-2非依賴的NK細(xì)胞株。
4. 種屬：人
5. 組織來源：外周血
6. 生長(zhǎng)特性：懸浮細(xì)胞
7. 應(yīng)用：三維細(xì)胞培養(yǎng)；免疫學(xué)。
8. 細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
圖片來源于ATCC
9. 培養(yǎng)條件：
a) （1）完全培養(yǎng)基配方：MEMα（SH30265.01）＋12.5%FBS（SV30208.02）＋12.5%馬血清（abs989）+0.2mM Inositol（abs816057）＋0.1mM β-巰基乙醇（abs9592-100mL）＋0.02mM Folic Acid（abs812845）＋1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 換液頻率：2-3次/周，可通過補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基（半量換液）或者離心換液兩種方式進(jìn)行換液
11. 傳代周期：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1*10^6個(gè)/mL時(shí)進(jìn)行傳代，維持細(xì)胞密度2-3*10^5個(gè)/Ml
12. 傳代比例：1:3
13. 凍存液配方：90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）
14. 注意事項(xiàng)：
（1）細(xì)胞偏圓或偏橢圓，透亮，成團(tuán)生長(zhǎng)。只有成團(tuán)的細(xì)胞有增殖活性，單個(gè)的細(xì)胞基本沒有增殖活力；
（2）細(xì)胞剛復(fù)蘇或密度較低時(shí)，可以先把培養(yǎng)瓶立起來，促進(jìn)細(xì)胞聚團(tuán)。當(dāng)細(xì)胞正常聚團(tuán)后，可以將培養(yǎng)瓶平放培養(yǎng)細(xì)胞，以增大空氣交換面積；
（3）傳代時(shí)可將大的細(xì)胞團(tuán)輕輕吹散成小團(tuán)，但是不要吹散成單個(gè)細(xì)胞（單個(gè)細(xì)胞基本沒有增殖活力）。
YT
1. 名稱：YT（人NK細(xì)胞白血病細(xì)胞）
2. 別稱：YT-0
3. 簡(jiǎn)介：YT細(xì)胞是從人NK細(xì)胞白血病患者的外周血中分離出的自然殺傷（NK）細(xì)胞系，具有快速增殖特性。
4. 種屬：人
5. 組織來源：外周血
6. 生長(zhǎng)特性：懸浮細(xì)胞
7. 應(yīng)用：NK細(xì)胞功能；免疫治療；血液腫瘤研究。
8. 細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣
圖片來源于網(wǎng)絡(luò)
9. 培養(yǎng)條件：
（1）完全培養(yǎng)基配方：RPMI-1640（SH30809.01）+10%FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 換液頻率：2-3次/周，可通過補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基（半量換液）或者離心換液兩種方式進(jìn)行換液
11. 傳代比例：1:2-1:3
12. 凍存液配方：55% RPMI-1640+40%FBS+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）
13. 注意事項(xiàng)：
（1）細(xì)胞易聚集成團(tuán)，傳代前可輕輕吹打分散；
（2）若添加IL-2，需定期更換培養(yǎng)基以維持細(xì)胞活性。
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