活細(xì)胞成像監(jiān)控NK細(xì)胞：突破傳統(tǒng)檢測，讓細(xì)胞監(jiān)測變成“直播”

前言：
自然殺傷（NK）細(xì)胞是先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其無需事先敏化即可識別并消滅惡性或病毒感染細(xì)胞。在前臨床研究中，NK細(xì)胞殺傷實驗用于評估NK細(xì)胞療法的效果。這些實驗通過將NK細(xì)胞與熒光標(biāo)記的靶細(xì)胞共培養(yǎng)，測量靶細(xì)胞裂解程度以評估NK細(xì)胞活性。然而，傳統(tǒng)染料如Calcein-AM的快速泄漏影響了實驗的準(zhǔn)確性。本研究采用綠色熒光染料CellTracker CMFDA及Celloger^® Pro自動活細(xì)胞成像系統(tǒng)，改善了檢測精度。
 
材料與方法：
靶細(xì)胞制備：

• 使用U-2OS細(xì)胞，分三種條件：
  • 穩(wěn)定表達(dá)EGFP標(biāo)記的H2B；
  • 使用Calcein-AM染色；
  • 使用CellTracker CMFDA染色。
• 各組細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中染色后，于48孔板中以3×10⁴密度接種，并與NK-92效應(yīng)細(xì)胞按不同效應(yīng)/靶（E:T）比（5:1、10:1、20:1）共培養(yǎng)。
• 通過4倍物鏡的 Celloger^® Pro 在24h內(nèi)每間隔1h采集圖像，使用 Celloger^® 分析軟件對實驗結(jié)果進(jìn)行分析，通過紅綠熒光強度比值以評估NK細(xì)胞毒性。

 
結(jié)果：

• 熒光標(biāo)記細(xì)胞： GFP-H2B靶細(xì)胞的實驗表明，隨著E:T比增加，紅熒光（死亡細(xì)胞）強度上升，綠熒光（活細(xì)胞）下降，且細(xì)胞聚集增多。
• 染料比較： CellTracker CMFDA在染料保持性及長時間追蹤方面優(yōu)于Calcein-AM。CMFDA熒光信號穩(wěn)定超過12小時，避免了Calcein-AM的快速泄漏引起的誤差。
• 優(yōu)點總結(jié)： CellTracker CMFDA具有更高靈活性，適合快速高效的實驗設(shè)置，而GFP表達(dá)細(xì)胞系雖精確但制備耗時且成本高。

 
亮點總結(jié)
1️⃣ 創(chuàng)新監(jiān)測方法：使用Celloger^® Pro自動化活細(xì)胞成像系統(tǒng)，結(jié)合優(yōu)化染色試劑，實現(xiàn)更精準(zhǔn)的NK細(xì)胞毒性分析。
2️⃣ 穩(wěn)定性對比：實驗顯示CellTracker CMFDA染劑相較傳統(tǒng)Calcein-AM染劑，具有更高的細(xì)胞內(nèi)保留率和更低的漏染，確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
3️⃣ 實時觀察：Celloger^® Pro可直接觀測細(xì)胞形態(tài)變化及死亡過程，為細(xì)胞毒性研究提供更深層次的洞察。

• 實現(xiàn)實時動態(tài)分析，突破傳統(tǒng)方法的局限。
• 節(jié)省實驗時間，提升效率，科研好搭子！

>>>>>產(chǎn)品介紹：
使用康和達(dá) Celloger^® Pro 進(jìn)行實時細(xì)胞監(jiān)測和分析，提高科研效率。無需將細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，即可進(jìn)行復(fù)雜的研究和數(shù)據(jù)分析。在保證實驗質(zhì)量的同時為您節(jié)約寶貴時間。

• 輕松實現(xiàn)實時監(jiān)測

遠(yuǎn)程監(jiān)控培養(yǎng)箱內(nèi)的活細(xì)胞，不干擾適合細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境�？梢詫崟r監(jiān)控細(xì)胞，也可以利用延時拍攝功能，自動拍攝細(xì)胞圖像，只需點擊即可輕松制作延時視頻。

• 多孔位延時成像功能

Celloger^® Pro 通過自動移動的集成相機和固定在平臺的培養(yǎng)耗材和樣本，在多個位點進(jìn)行細(xì)胞成像。這樣確保了細(xì)胞的穩(wěn)定環(huán)境，從而提高了圖像質(zhì)量和研究準(zhǔn)確性。

• 熒光和明場鏡頭

憑借雙色熒光和明場鏡頭，Celloger^® Pro可以拍攝高質(zhì)量和高分辨率圖片。

• 可更換的物鏡

Celloger^® Pro為用戶提供可更換的物鏡，為研究人員的不同需求提供靈活性。有2X，4X和10X的物鏡供選擇，用戶可以自由切換。

• 兼容多種培養(yǎng)容器

Celloger^® Pro 適配多種holder以適用多種不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)容器，包括孔板、T形瓶、載玻片。

• Celloger^® Pro 應(yīng)用場景