親和層析中生物素和親和素的特點及應用

生物素（biotin，B）廣泛分布于動、植物組織中，常從含量較高的卵黃和肝組織中提取，分子量244．31Da．生物素分子有兩個環(huán)狀結構（如圖1），其中Ⅰ環(huán)為咪唑酮環(huán)，是與親和素結合的主要部位；II環(huán)為噻吩環(huán)，C2上有一戊酸側鏈，其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的唯一結構，經(jīng)化學修飾后，生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素�；罨�生物素可以在蛋白質交聯(lián)劑的介導下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)，包括蛋白質，核酸，多糖，脂類等。

親和素（avidin，AV）亦稱抗生物素蛋白、卵白素，是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的堿性糖蛋白，分子量為68kD，等電點pI=10.5；耐熱并耐受多種蛋白水解酶的作用．尤其是與生物素結合后，穩(wěn)定性更好。生物素與親和素間的作用是已知強度最高的非共價作用，親和常數(shù)（K）為1015mol/L，比抗原與抗體間的親和力（K=105～1011mol/L）至少高1萬倍。并且，二者的結合穩(wěn)定性好專一性強，不受試劑濃度，PH環(huán)境，抑或蛋白變性劑等有機溶劑影響。由于每個親和素能結合4個分子的生物素，這一特點可以用于構建一個多層次信號放大系統(tǒng)。因此，BAS即可用于微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究，亦可制成親和介質用于上述各類反應體系中反應物的分離、純化。

低耐壓：生物素瓊脂糖微球
生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產(chǎn)品，生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的，最大限度避免配基脫落。
這種結合非常緊密，可以應用于不可逆結合（如：從某個樣本中去除親和素組分）

ABT Streptavidin 6HC 是用于固定生物素化的生物分子，重組鏈霉親和素通過高度交聯(lián)固定在 6% 的瓊脂糖微球上。