為什么選擇優(yōu)愛的THP-1極化方案?
✅ 高效穩(wěn)定
專為THP-1細(xì)胞優(yōu)化,M1/M2極化誘導(dǎo)效率高,批次間重復(fù)性好。
✅ 操作便捷
標(biāo)準(zhǔn)化流程,減少實驗摸索,快速構(gòu)建炎癥、腫瘤、代謝等疾病研究模型。
✅ 應(yīng)用廣泛
支持免疫調(diào)控機(jī)制、抗炎藥物篩選、腫瘤微環(huán)境等研究場景。
M1/M2誘導(dǎo)
1.M1誘導(dǎo):
用M0誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含100 ng/mL PMA),將THP-1(狀態(tài)良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接種于10 cm 培養(yǎng)皿(10 mL),培養(yǎng)24h,構(gòu)建為巨噬細(xì)胞M0(細(xì)胞貼壁,偽足延伸)。預(yù)溫PBS輕柔洗滌1-2次,去除PMA。更換為M1誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含100 ng/mL LPS、20 ng/mL IFN-γ),培養(yǎng)48h。
陰性對照:用M0誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含100 ng/mL PMA),將THP-1(狀態(tài)良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接種于10 cm 培養(yǎng)皿(10 mL),培養(yǎng)24h,構(gòu)建為巨噬細(xì)胞M0(細(xì)胞貼壁,偽足延伸)。預(yù)溫PBS輕柔洗滌1-2次,去除PMA。更換為完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)48h。建議用Accutase收樣送檢。
2.M2誘導(dǎo):
用M0誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含100 ng/mL PMA),將THP-1(狀態(tài)良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接種于10 cm 培養(yǎng)皿(10 mL),培養(yǎng)24h,構(gòu)建為巨噬細(xì)胞M0(細(xì)胞貼壁,偽足延伸)。預(yù)溫PBS輕柔洗滌1-2次,去除PMA,更換為完全培養(yǎng)基,靜息24h。然后更換為M2誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13),培養(yǎng)24h。
陰性對照:用M0誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1640完全培養(yǎng)基,含100 ng/mL PMA),將THP-1(狀態(tài)良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接種于10 cm 培養(yǎng)皿(10 mL),培養(yǎng)24h,構(gòu)建為巨噬細(xì)胞M0(細(xì)胞貼壁,偽足延伸)。預(yù)溫PBS輕柔洗滌1-2次,去除PMA,更換為完全培養(yǎng)基,靜息24h。建議用Accutase收樣送檢。
4.應(yīng)用場景