文章：巨噬細(xì)胞功能調(diào)控與代謝重編程在乳腺癌和抗PD-1治療中的應(yīng)用

 作為天然免疫的核心樞紐與代謝可塑性的 “典范細(xì)胞”，巨噬細(xì)胞的功能調(diào)控與代謝重編程已成為生命科學(xué)研究的 “黃金賽道”—— 不僅連續(xù)多年蟬聯(lián)國自然基金熱點(diǎn)，更憑借機(jī)制創(chuàng)新與轉(zhuǎn)化潛力成為頂刊高級(jí)選題。今天小優(yōu)就為大家解讀兩篇最新的巨噬+代謝雙熱點(diǎn)文章，助力您的國自然選題和深入研究。

文章一

2025 年 6 月，浙江省腫瘤醫(yī)院，中國科學(xué)院杭州醫(yī)學(xué)研究所胡海教授團(tuán)隊(duì)在國際著名期刊 Cancer Cell 雜志上發(fā)表題為 Cancer cell-derived arginine fuels polyamine biosynthesis in tumor-associated macrophages to promote immune evasion 的研究論文，闡明了乳腺癌細(xì)胞分泌的精氨酸可誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）向促腫瘤表型極化，進(jìn)而抑制 CD8⁺ T 細(xì)胞的抗腫瘤活性的分子機(jī)制，為靶向 “精氨酸 - 多胺 - TDG” 代謝軸重塑腫瘤免疫微環(huán)境、提升乳腺癌免疫治療療效提供了新的理論依據(jù)與潛在靶點(diǎn)。

文章整體思路
該研究聚焦腫瘤微環(huán)境（TME）中精氨酸代謝的細(xì)胞間調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，核心圍繞 “癌細(xì)胞 - 巨噬細(xì)胞” 的代謝互作展開。通過臨床分析、scRNA-seq和動(dòng)物模型，先明確精氨酸在乳腺癌進(jìn)展中的異常積累及癌細(xì)胞為主要來源；進(jìn)而探究精氨酸對(duì)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）極化的調(diào)控作用；深入解析 “精氨酸 - 多胺 - TDG-PPARG” 的分子通路；最終驗(yàn)證靶向該代謝軸的抗腫瘤治療潛力，揭示精氨酸代謝通過重塑免疫微環(huán)境促進(jìn)腫瘤免疫逃逸的關(guān)鍵機(jī)制，為乳腺癌治療提供新靶點(diǎn)。文章按照疾病挖掘，表型驗(yàn)證，機(jī)制研究，體內(nèi)療效驗(yàn)證四個(gè)步驟逐層展開。

01 疾病挖掘：精氨酸代謝與人類乳腺癌惡性進(jìn)展相關(guān)
為了研究氨基酸代謝在乳腺癌進(jìn)展中的作用，作者分析了608例乳腺癌患者的循環(huán)氨基酸水平，結(jié)果顯示，精氨酸濃度與腫瘤 TNM 分期、N 分期呈正相關(guān)，且晚期患者血清精氨酸水平顯著高于早期患者。

單細(xì)胞 RNA 測(cè)序及免疫組化證實(shí)，精氨酸合成關(guān)鍵酶 ASS1 主要在癌細(xì)胞中表達(dá)，占 TME 中精氨酸產(chǎn)生的 48.5%，且晚期腫瘤 ASS1 表達(dá)更高。

ASS1 表達(dá)與患者血清精氨酸濃度正相關(guān)，ASS1 高表達(dá)的基底樣乳腺癌和淋巴結(jié)陽性乳腺癌患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 - free 生存率更低。

圖1. 精氨酸與人類乳腺癌的惡性進(jìn)展有關(guān)

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
70720S	ASS1 (D4O4B) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IP、IHC、IF、F

02 表型驗(yàn)證：精氨酸介導(dǎo)的乳腺癌惡性進(jìn)展與巨噬細(xì)胞促腫瘤極化相關(guān)
在免疫健全小鼠中，精氨酸處理可促進(jìn) 4T1、EO771 乳腺癌移植瘤生長，而 ASS1 敲低則抑制腫瘤生長，但該效應(yīng)在免疫缺陷裸鼠中消失。

單細(xì)胞測(cè)序分析表明，癌細(xì)胞與巨噬細(xì)胞間的精氨酸代謝通訊是 TME 中主導(dǎo)的細(xì)胞間互作，且巨噬細(xì)胞 ASS1 表達(dá)極低，依賴外源性精氨酸。

精氨酸處理可劑量依賴性上調(diào)巨噬細(xì)胞 TGFB1、IL10 等促腫瘤細(xì)胞因子表達(dá)，CD163（M2 巨噬細(xì)胞標(biāo)志物）在晚期乳腺癌中高表達(dá)且與血清精氨酸水平正相關(guān)。

圖2. 精氨酸通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)促進(jìn)乳腺癌的進(jìn)展

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
93498s	CD163 (D6U1J) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IHC

03機(jī)制研究1：癌細(xì)胞分泌的精氨酸誘導(dǎo) TAM 極化以抑制 CD8+ T 細(xì)胞活化
癌細(xì)胞條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)的 TAMs 中精氨酸代謝增強(qiáng)，且癌細(xì)胞 ASS1 敲低會(huì)減少精氨酸分泌，抑制 TAM 標(biāo)志物（CD163、TGFB1）表達(dá)，補(bǔ)充精氨酸可恢復(fù)該表型。

同位素示蹤實(shí)驗(yàn)證實(shí)，巨噬細(xì)胞無法從頭合成精氨酸，依賴癌細(xì)胞分泌的精氨酸進(jìn)行代謝。

TAMs 可抑制 CD8+ T 細(xì)胞 CD25、GZMB 等活化標(biāo)志物表達(dá)，上調(diào) PD-1、TIM3 等耗竭標(biāo)志物，而 ASS1 敲低可減弱該抑制作用。

圖3. 癌細(xì)胞分泌精氨酸誘導(dǎo)TAM極化抑制CD8+ T細(xì)胞活化

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
567882	BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD163	25/100 Tests	Flow cytometry
567214	BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD25	25/100 Tests	Flow cytometry

04 機(jī)制研究2：精胺通過TDG 介導(dǎo)的 DNA 去甲基化促進(jìn) TAMs 的促腫瘤極化
同位素追蹤證實(shí) TAMs 以精氨酸為底物主動(dòng)合成多胺，精胺是多胺中促進(jìn) TAM 極化的關(guān)鍵分子，可顯著上調(diào) TGFB1、IL10 等表達(dá)，增強(qiáng) TAMs 對(duì) CD8+ T 細(xì)胞的抑制作用。

DNA 甲基化芯片顯示，TAMs 中存在大量低甲基化基因，精胺處理可降低 PPARG 基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平，上調(diào) PPARG 表達(dá)，PPARγ 拮抗劑 GW9662 可逆轉(zhuǎn)精胺誘導(dǎo)的 TAM 極化。

胸腺嘧啶 DNA 糖基化酶（TDG）在 TAMs 中高表達(dá)且活性增強(qiáng)，TDG 敲低可抑制 PPARG 表達(dá)及 TAM 促腫瘤極化，緩解對(duì) CD8+ T 細(xì)胞的抑制。

圖4. 精胺通過TDG介導(dǎo)的DNA去甲基化促進(jìn)TAM促腫瘤極化

05 機(jī)制研究3：精胺通過激活 p53 信號(hào)通路增強(qiáng) TDG 表達(dá)
通路富集分析顯示，精胺處理的巨噬細(xì)胞中 p53 信號(hào)通路顯著富集，且精胺可上調(diào) p53 靶基因 P21、GADD45A 表達(dá)。

p53 敲低可顯著降低精胺誘導(dǎo)的 TDG 表達(dá)及 TAM 促腫瘤細(xì)胞因子分泌， luciferase 報(bào)告基因及 ChIP 實(shí)驗(yàn)證實(shí) p53 可直接結(jié)合 TDG 啟動(dòng)子。

圖5. 精胺通過激活 p53 信號(hào)通路增強(qiáng) TDG 表達(dá)

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
99105S	TDG (E5T5G) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB

06 體內(nèi)療效驗(yàn)證：靶向 TDG 和多胺合成抑制乳腺癌生長
在人源化免疫小鼠模型中，巨噬細(xì)胞 TDG 敲低可顯著抑制 MDA-MB-231 移植瘤生長，且外源性精胺處理無法逆轉(zhuǎn)該抑瘤效應(yīng)。

TDG 敲低腫瘤中 CD163+ TAMs 比例降低，CD8+ T 細(xì)胞浸潤增加，免疫微環(huán)境得到改善。

多胺合成抑制劑 DFMO 處理可抑制 4T1 乳腺癌移植瘤生長，降低腫瘤組織中 CD163 + 巨噬細(xì)胞比例，增加 CD8+ T 細(xì)胞浸潤，但對(duì)裸鼠腫瘤無明顯作用。

圖6. 靶向多胺- TDG軸抑制乳腺癌體內(nèi)生長

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
93498S	CD163 (D6U1J) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IHC
98941S	CD8 alpha (D4W2Z) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IHC

文章總結(jié)
本研究整合了臨床隊(duì)列分析、單細(xì)胞核糖核酸測(cè)序（scRNA-seq）、細(xì)胞共培養(yǎng)及動(dòng)物模型等多種技術(shù)手段，探究了精氨酸代謝在乳腺癌進(jìn)展過程中的作用及相關(guān)機(jī)制。研究結(jié)果表明，精氨酸可通過誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）向促腫瘤表型極化，在體內(nèi)發(fā)揮促進(jìn)乳腺癌生長的作用。腫瘤細(xì)胞分泌的精氨酸會(huì)為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的多胺生物合成提供原料，維持其促腫瘤極化狀態(tài)，并以此抑制 CD8⁺ T 細(xì)胞的抗腫瘤活性。本研究證實(shí)，腫瘤細(xì)胞與巨噬細(xì)胞之間的互作是精氨酸介導(dǎo)腫瘤進(jìn)展的核心驅(qū)動(dòng)因素，同時(shí)揭示了乳腺癌腫瘤微環(huán)境（TME）中一種獨(dú)特的、可促進(jìn)腫瘤發(fā)展的細(xì)胞間作用機(jī)制。

文章二

2024年5月，中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心王紅艷研究員聯(lián)合上海大學(xué)生科院魏濱教授，復(fù)旦大學(xué)生科院唐惠儒教授及上海交通大學(xué)葉幼瓊研究員在Immunity雜志上發(fā)表題為25-Hydroxycholesterol regulates lysosome AMP kinase activation and metabolic reprogramming to educate immunosuppressive macrophages的研究論文，闡明了腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）中 CH25H-25HC 通過溶酶體AMPKα 信號(hào)通路調(diào)控 STAT6 Ser564 磷酸化、誘導(dǎo)免疫抑制表型的分子機(jī)制，為提升抗 PD-1 治療療效提供了新的理論依據(jù)與潛在靶點(diǎn)。

文章整體思路
該研究聚焦腫瘤微環(huán)境（TME）中膽固醇代謝異常對(duì)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）功能的調(diào)控作用，核心圍繞膽固醇 - 25 - 羥化酶（CH25H）及其產(chǎn)物 25 - 羥基膽固醇（25HC）展開。通過細(xì)胞模型驗(yàn)證 25HC 對(duì)巨噬細(xì)胞免疫抑制表型的調(diào)控作用，進(jìn)而通過臨床隊(duì)列與 scRNA-seq 分析，鎖定腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）中 CH25H 高表達(dá)及 25HC 異常積累與癌癥患者不良預(yù)后的關(guān)聯(lián)，進(jìn)而深入解析了 “25HC-GPR155-mTORC1-AMPKα-STAT6” 的分子通路及代謝重編程機(jī)制，最終證實(shí)靶向 CH25H 可將 “冷腫瘤” 轉(zhuǎn)化為 “熱腫瘤”，并與抗 PD-1 治療協(xié)同提升抗腫瘤效果。文章按照表型驗(yàn)證，疾病挖掘，機(jī)制研究，體內(nèi)療效驗(yàn)證四個(gè)步驟逐層展開。

01 表型驗(yàn)證：TAMs 或 M2 樣巨噬細(xì)胞重編程膽固醇代謝以在 TME 中富集 25HC
前期的研究表明，膽固醇代謝可以調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的功能，抑制炎癥小體的激活。為了研究膽固醇代謝是如何被調(diào)節(jié)并影響巨噬細(xì)胞極化，作者使用了三種策略來誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化，三種誘導(dǎo)方式（IL-4/IL-13 刺激、肝癌細(xì)胞條件培養(yǎng)基處理、腫瘤組織分選）獲得的免疫抑制性巨噬細(xì)胞均表現(xiàn)出膽固醇合成相關(guān)酶表達(dá)降低，膽固醇流出和酯化相關(guān)酶表達(dá)升高。

CH25H 在上述三種巨噬細(xì)胞中均顯著上調(diào)，且通過 LC-MS 檢測(cè)證實(shí) 25HC 在這些巨噬細(xì)胞及 MC38 腫瘤組織中大量積累。

圖1. TAMs或M2樣巨噬細(xì)胞重編程膽固醇代謝以豐富TME中的25HC

02 疾病挖掘：CH25H 高表達(dá) TAM 亞群與腫瘤患者生存呈負(fù)相關(guān)
接下來，作者分析了來自人類癌癥的單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）數(shù)據(jù)，表明CH25H 在多種免疫抑制性巨噬細(xì)胞亞群（如卵巢癌 MARCO + 巨噬細(xì)胞、腎癌 LYVE1 + 巨噬細(xì)胞等）中高表達(dá)。

為了探討CH25H在癌癥患者中的表達(dá)和功能，作者收集了癌癥患者的樣本，表明肝癌和結(jié)直腸癌患者腫瘤組織中的巨噬細(xì)胞 / 單核細(xì)胞 CH25H 表達(dá)顯著高于癌旁組織，且與 M2 樣巨噬細(xì)胞標(biāo)志物（MRC1、IL-10）表達(dá)正相關(guān)。

圖2. scRNA-seq顯示CH25Hhi TAM亞群與腫瘤患者的生存呈負(fù)相關(guān)

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
78588S	CD3 epsilon (E4T1B) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IP、IHC、IF
97778S	CD68 (E3O7V) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IP、IHC、IF

03 機(jī)制研究1：TME 中的乳酸、酸性 pH、IL-4 和 IL-13 上調(diào) Ch25h 表達(dá)
IL-4 和 IL-13 通過轉(zhuǎn)錄因子 STAT6 直接結(jié)合 Ch25h 啟動(dòng)子，顯著誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞 Ch25h 表達(dá)。TME 中的乳酸（通過 MCT1 轉(zhuǎn)運(yùn)）和酸性 pH（pH=6.0）可增強(qiáng) Ch25h 表達(dá)，靶向 STAT6 或 MCT1 可阻斷 TME 誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞 Ch25h 表達(dá)。

圖3. TME 中的乳酸、酸性 pH、IL-4 和 IL-13 上調(diào) Ch25h 表達(dá)

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
abs126218	Rabbit anti-CH25H Polyclonal Antibody	100ul	WB、IHC、IF
91992	CD206/MRC1 (E2L9N) Rabbit Monoclonal Antibody	20ul/100ul	WB、IHC、IF

04 機(jī)制研究2：CH25H 和 25HC 調(diào)控 TAMs 和 M2 樣巨噬細(xì)胞的免疫抑制功能
Ch25h 敲除巨噬細(xì)胞無法積累 25HC，且 IL-4/IL-13 刺激后 Arg1、Mrc1 等免疫抑制標(biāo)志物表達(dá)降低，STAT6（Tyr641）磷酸化水平下降。

外源性 25HC 處理可增強(qiáng) Ch25h 敲除巨噬細(xì)胞中 Arg1、Mrc1 的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)其免疫抑制功能缺陷。

Ch25h 敲除巨噬細(xì)胞與 CD8+ T 細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，對(duì) T 細(xì)胞增殖的抑制作用顯著減弱，而補(bǔ)充 25HC 可恢復(fù)其抑制能力。

圖4. CH25H和25HC調(diào)節(jié)TAMs和M2樣巨噬細(xì)胞的免疫抑制功能

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
561824	BD Pharmingen™ PE Hamster Anti-Mouse CD3e	25ug/0.1mg	Flow cytometry
561837	BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Mouse CD4	25ug/0.1mg	Flow cytometry
561966	BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD8a	25ug/0.1mg	Flow cytometry
561047	BD Pharmingen™ PerCP Rat Anti-Mouse CD45	25ug/0.1mg	Flow cytometry

05 機(jī)制研究3：25HC 激活 AMPKα，進(jìn)而磷酸化 STAT6 以促進(jìn) STAT6 激活
25HC 處理可激活巨噬細(xì)胞 AMPKα（Thr172 磷酸化）及其下游靶點(diǎn) ACC1（Ser79 磷酸化）。AMPKα 缺陷可阻斷 25HC 對(duì) Arg1 表達(dá)的促進(jìn)作用，而 AMPKα 激動(dòng)劑 GSK621 可恢復(fù) Ch25h 敲除巨噬細(xì)胞的 Arg1 表達(dá)。

質(zhì)譜分析和突變體實(shí)驗(yàn)證實(shí)，AMPKα 直接磷酸化 STAT6 的 Ser564 位點(diǎn)，該位點(diǎn)突變（S564A）會(huì)降低 STAT6 的轉(zhuǎn)錄活性和 Tyr641 磷酸化水平。STAT6（S564A）突變體無法有效促進(jìn)巨噬細(xì)胞 Arg1 表達(dá)。

溶酶體積累的25HC 結(jié)合 GPR155 后抑制其與 GATOR1 復(fù)合物亞基 NPRL2 的相互作用，進(jìn)而抑制 mTORC1 及其下游 S6K 的激活，解除對(duì) AMPKα 的抑制。

圖5. 25HC激活A(yù)MPKa，增強(qiáng)線粒體功能，促進(jìn)OXPHOS

部分相關(guān)產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	應(yīng)用
5397S	Rabbit anti-STAT6	20ul/100ul	WB、IP、CHIP
9361S	Rabbit anti-pSTAT6 Tyr641	20ul/100ul	WB、IP、IF
5831S	Rabbit anti-AMPKa	20ul/100ul	WB、IP
2531S	Rabbit anti-pAMPKa Thr172	20ul/100ul	WB
9202S	Rabbit anti-S6K	20ul/100ul	WB、IP
9234S	Rabbit anti-pS6K Thr389	20ul/100ul	WB
2983S	Rabbit anti-mTOR	20ul/100ul	WB、IP、IF、IHC
5536S	Rabbit anti-pmTOR Ser2448	20ul/100ul	WB、IP、IF

06 體內(nèi)療效驗(yàn)證：靶向 Ch25h 單獨(dú)或與抗 PD-1 聯(lián)合增強(qiáng)免疫治療效果
Ch25h 敲除小鼠的 MC38 腫瘤體積顯著減小，腫瘤組織中 25HC 濃度降低，TAMs 的 Mrc1、Vegfa 等抑制性基因表達(dá)下調(diào)，M1 樣巨噬細(xì)胞比例升高。

Ch25h 敲除小鼠腫瘤組織中 CD4+、CD8+ T 細(xì)胞浸潤增多，IFN-γ+、TNF-α+ 效應(yīng) T 細(xì)胞比例升高，CD8+ T 細(xì)胞 PD-1 表達(dá)上調(diào)。

靶向 Ch25h 與抗 PD-1 治療聯(lián)合使用時(shí)，對(duì) MC38 和 B16F10（冷腫瘤模型）的抑瘤效果顯著優(yōu)于單一治療，可將冷腫瘤轉(zhuǎn)換為熱腫瘤。

圖6. 單獨(dú)靶向Ch25h或聯(lián)合抗PD-1可提高免疫治療效果

文章總結(jié)
本研究通過三種免疫抑制性巨噬細(xì)胞模型，篩選膽固醇代謝相關(guān)酶的表達(dá)特征，發(fā)現(xiàn)這類巨噬細(xì)胞會(huì)調(diào)控膽固醇的合成與轉(zhuǎn)運(yùn)過程，維持細(xì)胞內(nèi)低膽固醇水平。與之形成對(duì)比的是，25 - 羥基膽固醇（25HC）在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）及腫瘤微環(huán)境（TME）中均呈高濃度積累。膽固醇 - 25 - 羥化酶（CH25H）可將膽固醇轉(zhuǎn)化為 25HC，進(jìn)一步明確了 25HC 作為一種促腫瘤代謝物，如何在溶酶體中影響 AMPKα 和 mTORC1 的激活。尤為重要的是，本研究發(fā)現(xiàn) STAT6 的絲氨酸 564（Ser564）位點(diǎn)是 AMPKα 的新增磷酸化靶點(diǎn)。靶向 CH25H 以打破這一代謝檢查點(diǎn)，可重塑巨噬細(xì)胞功能，將 “冷腫瘤” 轉(zhuǎn)化為 “熱腫瘤”，且與抗 PD-1 治療聯(lián)合使用時(shí)能進(jìn)一步提升抗腫瘤療效。

巨噬細(xì)胞代謝相關(guān)熱門研究思路解讀

01 腫瘤細(xì)胞與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）之間的串?dāng)_

（1）促炎細(xì)胞因子和趨化因子的分泌機(jī)制：TAM分泌IL-6、IL-8、IL-10 等促炎因子，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞遷移與耐藥，IL-8對(duì)T細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用；

（2）免疫逃逸機(jī)制：CD47/SIRPα、CD24/Siglec-10及 LILRB1/MHC-I抑制巨噬細(xì)胞吞噬功能;PD-1/PD-L1、B7-H3 等通路，進(jìn)一步抑制免疫活性。

（3）外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制：外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)mRNA，circRNA，IncRNA,miRNA等分子實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間的信息交流；ApoE轉(zhuǎn)運(yùn)至腫瘤細(xì)胞后，進(jìn)而激活PI3K-AKT信號(hào)通路，促進(jìn)EMT及腫瘤細(xì)胞的遷移；

（4）旁分泌&自分泌作用：CD44是一種高效吞噬受體，可影響炎癥反應(yīng)、吞噬作用及腫瘤多藥耐藥性；IL-33可通過IL-1RL1維持腫瘤干細(xì)胞的干性，同事誘導(dǎo)TGF-β促進(jìn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的增殖和耐藥。

02 巨噬細(xì)胞M1&M2極化

（1）M1極化(促炎)
M1型巨噬細(xì)胞在發(fā)育與成熟過程中，會(huì)表達(dá)TLRs，識(shí)別LPS等病原體相關(guān)分子模式，激活下游包括NF-κB、p38 MAPK、JAK/STAT1、PI3K/Akt/Fos/Jun 等信號(hào)通路，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型極化；細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子如 SOCS1/3 可下調(diào)M1極化；

（2）M2極化（免疫抑制）
由 IL-4/IL-6/TGF-β 等激活，相關(guān)通路包括 JAK/STAT3/6、PI3K/Akt/mTOR\、Smad2/3、PPARγ，Wnt/β-catenin,Notch 信號(hào)等促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2型極化；SOCS3可下調(diào)M2極化；

（3）巨噬細(xì)胞M1/M2代謝特征
巨噬細(xì)胞的代謝重編程(尤其是糖酵解與氧化磷酸化的動(dòng)態(tài)平衡)是調(diào)控其免疫表型和功能的核心機(jī)制，這一過程在感染、腫瘤、炎癥性疾病和代謝紊亂中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

M1型巨噬細(xì)胞在受到病原體或炎癥因子刺激時(shí)，會(huì)迅速增強(qiáng)糖酵解速率，同時(shí)抑制氧化磷酸化，產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)和ROS，從而發(fā)揮抗感染作用;

M2型巨噬細(xì)胞則主要依賴氧化磷酸化和脂肪酸氧化，支持細(xì)胞修復(fù)和抗炎功能。

03 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)思路設(shè)計(jì)

04 TAM和代謝重編程

（1）TAM呈現(xiàn)出獨(dú)特的代謝特征，其葡萄糖與脂肪酸代謝水平顯著增強(qiáng)，為自身的免疫抑制作用和促腫瘤活性提供代謝支撐。TAM的糖酵解、三羧酸循環(huán)、氧化磷酸化過程均被激活，脂肪酸氧化及膽固醇外排過程也同步增強(qiáng)。此外，在響應(yīng)微環(huán)境信號(hào)的過程中，TAM特有的代謝通路（尤其是涉及特定氨基酸的代謝通路），是其功能異質(zhì)性形成的核心分子基礎(chǔ)。

（2）腫瘤微環(huán)境信號(hào)驅(qū)動(dòng)TAM的各代謝通路相互關(guān)聯(lián)、協(xié)同調(diào)控，最終促成其功能與表型的多樣性。該調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的核心組分包括GLUT1、LDHA，以及參與脂質(zhì)和氨基酸代謝的各類酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

部分相關(guān)產(chǎn)品：

巨噬細(xì)胞樣品制備

貨號(hào)	名稱
130-095-926	Spleen Dissociation Kit, mouse
abs47048001-100mg	膠原酶 II型
LS004188	Collagenase, Type 4
130-110-443	Anti-F4/80 MicroBeads UltraPure, mouse
17544202	FICOLL PAQUE PREMIUM
17144002	FICOLL PAQUE PLUS
130-093-235	gentleMACS Dissociator
130-090-101	Dead Cell Removal Kit
130-109-398	Debris Removal Solution
130-094-183	Red Blood Cell Lysis Solution (10×)
abs7232	70 μm篩網(wǎng)

巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)分化與培養(yǎng)

貨號(hào)	名稱
130-050-201	CD14 MicroBeads, human
130-113-806	CD11b Antibody, anti-mouse, PE, REAfinity
130-117-509	F4/80 Antibody, anti-mouse, FITC, REAfinity
SH30809.01	RPMI1640
UA040128	M-CSF
abs47014848-5mg	LPS
UA040065	IFN-γ
UA040192	IL-4
UA040158	IL-13
abs9592	β-巰基乙醇
abs9107	PMA

巨噬細(xì)胞鑒定

貨號(hào)	名稱
130-113-811	CD11b Antibody, anti-mouse, REAfinity
130-132-896	CD14 Antibody, anti-human, PE-Vio® 670, REAfinity
130-113-393	CD16 Antibody, anti-human, PE, REAfinity
130-112-855	CD68 Antibody, anti-mouse, FITC, REAfinity
130-131-632	F4/80 Antibody, anti-mouse, Vio® R667, REAfinity
130-130-555	CD80 Antibody, anti-human, Vio® Bright B515, REAfinity
130-116-165	CD86 Antibody, anti-human, Vio®  Bright B515, REAfinity
130-112-129	CD163 Antibody, anti-human, APC, REAfinity
130-133-375	CD206 Antibody, anti-human, REAfinity