STAT3作為JAK-STAT信號通路的核心轉(zhuǎn)錄因子,其磷酸化水平是評價該通路活化的關(guān)鍵指標,在免疫、腫瘤及藥物研發(fā)中備受關(guān)注。瑞孚迪(Revvity)基于成熟的HTRF®與AlphaLISA®均相檢測平臺,正式推出STAT3檢測高性能(HP)升級方案,并新增STAT3 Ser727磷酸化檢測,為研究人員提供靈敏度更高、信號更強、適用模型更廣的解決方案。
HTRF平臺
STAT3 p-Tyr705檢測性能顯著提升
WEICHILAB
01靈敏度優(yōu)化
可在約1500個HeLa細胞中穩(wěn)定檢測STAT3 p-Tyr705,信噪比達2.7(圖1)。

圖1. 經(jīng)IFNα2b刺激后不同HeLa細胞密度的STAT3 p-Y705檢測結(jié)果
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02信噪比增強
在JAK抑制劑梯度實驗中,信噪比提升至10.1,更好呈現(xiàn)劑量依賴性抑制(圖2)。

圖2. JAK抑制劑處理的HeLa細胞中STAT3 p-Y705的檢測結(jié)果
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03模型適用性擴展
即使在低磷酸化背景的PBMC模型中,也能清晰捕捉IL-6誘導(dǎo)的STAT3 p-Tyr705劑量依賴性升高。

圖3. 經(jīng)IL-6刺激的PBMC細胞中STAT3 p-Y705和Total檢測結(jié)果
AlphaLISA平臺
STAT3 Total與p-Tyr705檢測同步升級
WEICHILAB
01信噪比大幅提高
在THP-1細胞中,較老版本試劑盒,p-Tyr705 HP試劑盒信噪比提升近3倍,Total HP信號提升約20倍(圖4)。

圖4. STAT3 Total和STAT3 p-Y705新/老試劑盒的比較
WEICHILAB
02動態(tài)范圍更寬
可檢測低至約50個A431細胞裂解液中的STAT3 Total和p-Tyr705信號(圖5)。

圖5. 不同A431細胞密度的STAT3 Total和STAT3 p-Y705檢測結(jié)果
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03細胞兼容性廣
覆蓋各類貼壁與懸浮細胞,適應(yīng)不同表達水平(圖6)。

圖6. 不同細胞系STAT3檢測結(jié)果
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04更全面的驗證數(shù)據(jù)
不同細胞的磷酸化刺激或抑制實驗均有良好的信噪比(圖7)。更多驗證數(shù)據(jù)詳見瑞孚迪官網(wǎng)(www.revvity.cn)。

圖7. IFNα刺激(左)和Ruxolitinib抑制(右)后THP-1細胞中STAT3 Total和STAT3 p-Y705的檢測結(jié)果
AlphaLISA平臺新增STAT3 Ser727磷酸化位點
全面覆蓋STAT3關(guān)鍵磷酸化位點,助力多維度信號機制研究。該試劑盒具備寬動態(tài)范圍與高信噪比,適用于多種細胞模型(圖8),更多的驗證數(shù)據(jù)詳見瑞孚迪官網(wǎng)(
www.revvity.cn)。

圖8. AlphaLISA STAT3 p-Ser727試劑盒的檢測范圍(左)和A431細胞模型檢測結(jié)果(右)
總結(jié)Summary
HP版本在靈敏度、信噪比和穩(wěn)健性方面全面提升,支持在更低細胞量、更復(fù)雜生理模型(如原代細胞)中實現(xiàn)可靠檢測,推動基礎(chǔ)研究向轉(zhuǎn)化應(yīng)用邁進。
新增產(chǎn)品列表
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