酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot) 的原理及應(yīng)用

瀏覽次數(shù)：273　發(fā)布日期：2026-2-5　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

生物醫(yī)學(xué)不斷突破，精準(zhǔn)解析、量化免疫系統(tǒng)功能的重要性日益凸顯。作為免疫檢測(cè)領(lǐng)域的高效利器，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ELISpot）成為解鎖免疫奧秘的關(guān)鍵手段 —— 它能精準(zhǔn)捕捉單個(gè)免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子等分子，為免疫應(yīng)答研究打開全新思路。

小備帶你走進(jìn) ELISpot 的世界，一同揭開免疫反應(yīng)背后的神秘面紗！

一、ELISpot技術(shù)介紹
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（Enzyme Linked ImmunoSpot Assay，ELISpot）是在ELISA 基礎(chǔ)上迭代創(chuàng)新的單細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù)。其技術(shù)溯源至 1978 年，牛津大學(xué) Don Mason 教授率先建立 “膠片斑點(diǎn)技術(shù)”，實(shí)現(xiàn)抗體分泌細(xì)胞的初步檢測(cè)；1983 年，J.D. Sedgwick 與 C. Czerkinsky 分別獨(dú)立完成技術(shù)升級(jí)，引入酶聯(lián)免疫反應(yīng)體系，顯著提升檢測(cè)實(shí)用性與靈敏度。

ELISpot 可單細(xì)胞水平定量分析細(xì)胞因子 / 抗體分泌水平，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本活細(xì)胞免疫狀態(tài)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與功能評(píng)估。檢測(cè)原理如圖所示：細(xì)胞接種于包被特異性捕獲抗體的 PVDF 微孔板，分泌的靶標(biāo)蛋白被原位捕獲；去除細(xì)胞后加入生物素標(biāo)記二抗，經(jīng)酶促顯色反應(yīng)形成可見顯色斑點(diǎn)（Spot）。

該技術(shù)兼具高靈敏度、高通量、活細(xì)胞功能解析、操作便捷等核心優(yōu)勢(shì)，已廣泛應(yīng)用于疫苗研發(fā)、藥物篩選、感染性疾病診療 [5]、腫瘤免疫 [6]、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)及移植排斥預(yù)警等免疫相關(guān)研究領(lǐng)域。

ELISpot原理圖（圖源網(wǎng)絡(luò)，侵刪）

二、ELISpot與ELISA對(duì)比

從技術(shù)核心原理來看，ELISpot 與 ELISA 均依托雙抗體夾心法建立檢測(cè)體系，但二者檢測(cè)維度存在本質(zhì)差異：ELISA 旨在對(duì)樣本溶液中游離靶標(biāo)蛋白進(jìn)行總量定量分析，而 ELISpot 則聚焦于活細(xì)胞層面，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞免疫功能狀態(tài)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與功能評(píng)估，具體對(duì)比如下。

以上是ELISpot 憑借原理優(yōu)勢(shì)與性能特點(diǎn)，在疫苗研發(fā)、腫瘤免疫治療等領(lǐng)域展現(xiàn)出廣闊應(yīng)用前景與巨大研究?jī)r(jià)值。伴隨生物技術(shù)的持續(xù)迭代與突破，ELISpot 技術(shù)將進(jìn)一步拓展應(yīng)用邊界，為人類健康事業(yè)發(fā)展提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。

三、Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)檢測(cè)服務(wù)哪里有？

樂備實(shí)LabEx提供Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)檢測(cè)服務(wù)：

貨號(hào)	產(chǎn)品名
LXEMS01-1	小鼠IFN-γ單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測(cè)服務(wù)
LXEHS01-1	人IFN-γ單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測(cè)服務(wù)
LXEHS02-1	人IL-2單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測(cè)服務(wù)

樂備實(shí)（上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司旗下全資子公司），是國(guó)內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測(cè)以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家，自2018年成立以來，樂備實(shí)不斷尋求突破，公司的服務(wù)技術(shù)平臺(tái)已擴(kuò)展到單細(xì)胞測(cè)序、空間多組學(xué)、流式檢測(cè)、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測(cè)、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè)，建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測(cè)體系。

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