無(wú)血清添加劑B-27的基礎(chǔ)特性及在神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)與類器官研究中的應(yīng)用

• 維生素類：生物素、DL-α-生育酚乙酸酯、DL-α-生育酚、維生素A（醋酸酯）
• 蛋白質(zhì)組分：無(wú)脂肪酸BSA（Fraction V）、過(guò)氧化氫酶、人重組胰島素、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、超氧化物歧化酶
• 其他組分：皮質(zhì)酮、D-半乳糖、乙醇胺HCl、谷胱甘肽（還原型）、L-肉堿HCl、亞油酸、亞麻酸、孕酮、腐胺2HCl、亞硒酸鈉、T3（三碘甲狀腺原氨酸）

• 成分明確：避免了血清批次間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾
• 專用優(yōu)化：各組分濃度經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專為神經(jīng)細(xì)胞設(shè)計(jì)
• 功能全面：同時(shí)支持細(xì)胞存活、生長(zhǎng)和功能表達(dá)

• 原代神經(jīng)元培養(yǎng)：支持大鼠海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元的長(zhǎng)期培養(yǎng)，無(wú)需星形膠質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)層
• 低密度神經(jīng)元培養(yǎng)：即使在高稀釋度下仍能支持神經(jīng)元存活和生長(zhǎng)
• 長(zhǎng)期培養(yǎng)：維持神經(jīng)元數(shù)周的健康狀態(tài)，支持神經(jīng)突網(wǎng)絡(luò)發(fā)育和突觸蛋白表達(dá)

研究表明，在B-27 Plus添加劑中培養(yǎng)三周的原代大鼠皮層神經(jīng)元表現(xiàn)出高活性的神經(jīng)突網(wǎng)絡(luò)和突觸蛋白的高表達(dá)，顯示出優(yōu)異的成熟度和功能性。

• 神經(jīng)干細(xì)胞擴(kuò)增：使用去除維生素A的B-27添加劑可促進(jìn)神經(jīng)祖細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞的增殖，而不誘導(dǎo)分化
• 胚胎干細(xì)胞定向分化：支持胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)元譜系（神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞）的分化
• 干細(xì)胞來(lái)源神經(jīng)元的分化和維持：使用標(biāo)準(zhǔn)B-27添加劑或B-27 Plus添加劑支持干細(xì)胞來(lái)源神經(jīng)元的成熟和功能維持

• 中腦類器官：從神經(jīng)上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)分化人類中腦特異性類器官（hMOs），用于研究神經(jīng)退行性疾病
• 肝臟類器官：使用不含維生素A的B-27添加劑支持肝細(xì)胞來(lái)源的類器官長(zhǎng)期培養(yǎng)
• 肺臟類器官：在無(wú)血清分化培養(yǎng)基（含B-27）中從人類干細(xì)胞培養(yǎng)肺芽類器官（LBOs）
• 乳腺類器官：建立來(lái)自正常和癌變?nèi)祟惾橄俳M織的類器官培養(yǎng)，保留復(fù)雜的上皮譜系

這些3D培養(yǎng)系統(tǒng)在研究胚胎發(fā)育、疾病機(jī)制、藥物篩選和再生醫(yī)學(xué)方面顯示出巨大潛力。

• 阿爾茨海默癥模型：使用B-27系列產(chǎn)品基于人類iPSC開(kāi)發(fā)自動(dòng)化、一致性好和時(shí)間持久的干細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái)，模擬AD特征性變化
• 帕金森病模型：利用中腦類器官構(gòu)建G2019S-LRRK2散發(fā)性帕金森病模型
• 癌癥模型：建立乳腺癌、肝癌等多種癌癥類器官模型，用于腫瘤生物學(xué)研究和藥物測(cè)試

• B-27 Supplement (50X, Serum-free)：2 mL
• 200mM L-Gln/L-Ala-Gln：0.25 mL
• Neurobasal Medium：97.75 mL
• 總體積：100 mL

注意事項(xiàng)：

• 用于原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞初次接種時(shí)，需在完全培養(yǎng)基中額外添加終濃度為25μM的L-谷氨酸
• 培養(yǎng)至第4天，需使用不添加L-谷氨酸的完全培養(yǎng)基用于后續(xù)培養(yǎng)
• 配制好的完全培養(yǎng)基可放置于2-8°C避光保存，建議2-4周內(nèi)使用

1. 培養(yǎng)表面包被：使用多聚賴氨酸溶液對(duì)培養(yǎng)表面在室溫下包被1-2小時(shí)或過(guò)夜
2. 表面沖洗：用無(wú)菌超純水反復(fù)沖洗兩次，徹底去除殘留的多聚賴氨酸
3. 表面干燥：在超凈工作臺(tái)中通風(fēng)吹干培養(yǎng)表面
4. 細(xì)胞接種：按照150-200 cells/mm²的密度接種神經(jīng)元細(xì)胞
5. 培養(yǎng)基更換：
   • 培養(yǎng)4-24小時(shí)后，更換一半體積的新鮮完全培養(yǎng)基
   • 對(duì)于原代海馬神經(jīng)元，第4天需用不含L-谷氨酸的完全培養(yǎng)基更換一半培養(yǎng)基
   • 后續(xù)每三天更換一次培養(yǎng)基

• 標(biāo)準(zhǔn)化：提供了成分明確、批次間一致性高的培養(yǎng)環(huán)境，增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性
• 專業(yè)化：針對(duì)不同神經(jīng)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求的專業(yè)配方，提升了實(shí)驗(yàn)效率和質(zhì)量
• 創(chuàng)新賦能：支持從傳統(tǒng)2D培養(yǎng)到復(fù)雜3D類器官的技術(shù)革新，拓展了研究邊界

隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷進(jìn)步，特別是類器官和器官芯片等前沿領(lǐng)域的發(fā)展，B-27添加劑將繼續(xù)在神經(jīng)科學(xué)研究、疾病模型構(gòu)建、藥物篩選和個(gè)性化醫(yī)療中發(fā)揮關(guān)鍵作用。