把腫瘤細(xì)胞、T細(xì)胞、髓系細(xì)胞拉到一起的三特異性抗體

文章來(lái)源公眾號(hào)：Bloki 作者：bloki

 

 

分享一篇三特異性抗體的文章，靶向腫瘤抗原、CD3、PD-L1，具體內(nèi)容如下：

 

 

 

公開(kāi)的各種腫瘤單細(xì)胞測(cè)序數(shù)據(jù)，把淋巴細(xì)胞“拉出來(lái)”看，不同腫瘤CD8 Tex浸潤(rùn)情況不同

 

 

 

 

TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中看不同腫瘤T細(xì)胞浸潤(rùn)情況

 

 

 

 

腫瘤部位T細(xì)胞功能性打分情況

 

 

 

 

取腫瘤部位CD8 T細(xì)胞，體外激活，有的腫瘤CD8 T可響應(yīng)激活，有的響應(yīng)差

 

 

 

 

空間組學(xué)數(shù)據(jù)，腫瘤部位T細(xì)胞功能性和PD-L1（CD274正相關(guān)），和腫瘤抗原（CD276）負(fù)相關(guān)

 

 

各種腫瘤表達(dá)B7H3

 

設(shè)計(jì)三特異性抗體：“拉”腫瘤抗原B7H3、CD3、PD-L1；Fc段突變，不結(jié)合Fc受體；還做了不結(jié)合PD-L1的雙特異性抗體

 

三特異性抗體結(jié)合B7H3、CD3、PD-L1

 

 

三特異性抗體不結(jié)合小鼠的B7H3、PD-L1，結(jié)合人的B7H3、PD-L1

 

 

三特異性抗體高效介導(dǎo)PBMC殺靶細(xì)胞

 

 

 

三特異性抗體高效介導(dǎo)PBMC殺病人源腫瘤細(xì)胞，介導(dǎo)T細(xì)胞激活、增殖、生成顆粒酶B、IFNr、分化

 

 

三特異性抗體只介導(dǎo)殺表達(dá)腫瘤抗原B7H3的細(xì)胞，不介導(dǎo)殺只表達(dá)PD-L1的細(xì)胞；殺靶細(xì)胞不依賴(lài)PD-L1

 

 

 

三特異性抗體介導(dǎo)殺病人源腫瘤細(xì)胞

 

三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞：激活、增殖、生成顆粒酶B、TNF、IFNr

 

 

另一病人源腫瘤樣品，三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞、殺腫瘤細(xì)胞

 

 

病人源腫瘤塊上，三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞、殺腫瘤細(xì)胞

 

 

 

三特異性抗體穩(wěn)定性數(shù)據(jù)

 

 

三特異性抗體藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)

 

 

人源化小鼠上，三特異性抗體抑制腫瘤生長(zhǎng)

 

 

三特異性抗體安全性

 

 

取腫瘤組織，bulk測(cè)序，三特異性抗體調(diào)動(dòng)腫瘤免疫

 

 

三特異性抗體促進(jìn)干性、記憶基因表達(dá)

 

 

病人源腫瘤細(xì)胞上，三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞、殺腫瘤細(xì)胞的效果優(yōu)于雙特異性抗體和PD-L1單抗

 

 

三特異性抗體介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的效果優(yōu)于雙特異性抗體和PD-L1單抗聯(lián)用

 

 

三特異性抗體+PBMC殺腫瘤細(xì)胞的效果優(yōu)于三特異性抗體+T細(xì)胞，暗示PBMC中其他細(xì)胞有助力作用

 

 

換腫瘤抗原，仍然是三特異性抗體+PBMC殺腫瘤細(xì)胞的效果優(yōu)于三特異性抗體+T細(xì)胞，再次暗示PBMC中其他細(xì)胞有助力作用

 

 

髓系細(xì)胞細(xì)胞（CD11b+）也表達(dá)PD-L1，加入髓系細(xì)胞助力T細(xì)胞殺腫瘤細(xì)胞

 

 

三特異性抗體促進(jìn)髓系細(xì)胞和T細(xì)胞互作

 

 

表達(dá)PD-L1利好三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞、殺靶細(xì)胞

 

 

阻斷PD-L1影響殺靶細(xì)胞

 

 

三特異性抗體主要介導(dǎo)殺腫瘤細(xì)胞，對(duì)髓系細(xì)胞影響小

 

 

 

三特異性抗體介導(dǎo)殺腫瘤細(xì)胞

 

 

分選免疫細(xì)胞，單細(xì)胞測(cè)序看三特異性抗體對(duì)免疫的調(diào)動(dòng)

 

 

單細(xì)胞測(cè)序數(shù)據(jù)中挖掘，三特異性抗體調(diào)動(dòng)T細(xì)胞

 

 

 

三特異性抗體調(diào)動(dòng)毒性、效應(yīng)基因表達(dá)

 

 

 

三特異性抗體調(diào)動(dòng)細(xì)胞周期、細(xì)胞因子活性相關(guān)通路

 

 

 

三特異性抗體起效依賴(lài)IFNr，不依賴(lài)TNF；IFNr可抑制腫瘤生長(zhǎng)

 

 

 

細(xì)胞互作分析發(fā)現(xiàn)，三特異性抗體調(diào)動(dòng)髓系細(xì)胞

 

 

 

髓系細(xì)胞中，重編程巨噬細(xì)胞

 

PBMC中、腫瘤部位髓系細(xì)胞都能助力T細(xì)胞抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)

 

 

阻斷共刺激信號(hào)不影響三特異性抗體效果

 

 

阻斷IL-15影響三特異性抗體效果

 

添加IL-15促進(jìn)三特異性抗體效果

 

三特異性抗體促進(jìn)髓系細(xì)胞生成IL-15；三特異性抗體條件培養(yǎng)基促進(jìn)IL-15表達(dá)，阻斷IFNr后抑制IL-15表達(dá)；IFNr還可以促進(jìn)CD274（PD-L1）表達(dá)，阻斷IFNr，CD274表達(dá)受限

 

 

添加IL-15 resue PD-L1封閉對(duì)殺靶細(xì)胞的影響

 

 

 

綜合起來(lái)，三特異性抗體把腫瘤細(xì)胞、T細(xì)胞、髓系細(xì)胞拉到一起，調(diào)動(dòng)T細(xì)胞殺腫瘤細(xì)胞，T細(xì)胞分泌的IFNr促進(jìn)髓系細(xì)胞生成IL-15，IL-15進(jìn)一步又助力T細(xì)胞

 

 

 

作者還設(shè)計(jì)了一個(gè)模型用于評(píng)估三特異性抗體療效，考量各種變量對(duì)療效的影響（略）

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