通過下一代技術(shù)監(jiān)測(cè)記憶B細(xì)胞ImmunoSpot，提供對(duì)體液免疫的洞察

通過下一代技術(shù)監(jiān)測(cè)記憶B細(xì)胞ImmunoSpot@ 提供對(duì)體液免疫的洞察，而循環(huán)抗體檢測(cè)無法揭示這一點(diǎn)

摘要
記憶B細(xì)胞(Bmem)在特異性抗原刺激下提供適應(yīng)性體液宿主防御的第二道防線�？贵w首次遇到障礙時(shí)重新發(fā)起挑戰(zhàn)，保持連貫性響應(yīng)，失敗。這是一種情況，因?yàn)槲姆瓭娠@，季節(jié)性流感的發(fā)病率很高。雖然在這些情況下，可能會(huì)發(fā)生再感染，但在兩種情況下，原有的Bmem迅速參與召回反應(yīng)仍然可以提供免疫保護(hù)。眾所周知，Bmem在宿主防御中起著關(guān)鍵作用，但它們的評(píng)估尚未成為標(biāo)準(zhǔn)免疫監(jiān)測(cè)的一部分。在這里，我們描述了新一代的B細(xì)胞ELISPOT/FluoroSpot(統(tǒng)稱為lmmunoSpot)方法，適用于在單細(xì)胞分辨率下解剖體外Bmem譜系，揭示其免疫球蛋白類/亞類利用情況及其對(duì)原始病毒和變異病毒/抗原的親和分布。 由于此類全面的 B細(xì)胞免疫斑點(diǎn)·}檢測(cè)僅需極少的細(xì)胞樣本即可進(jìn)行且具有可擴(kuò)展性和可靠性，因此它們非常適合用于常規(guī)的免疫監(jiān)測(cè)。

引言
臨床免疫診斷目前僅限于檢測(cè)血清和其他體液中的特異性抗體。目前，通過血清抗體滴度的測(cè)量，可以推斷出一個(gè)人是否感染了某種病毒或接種了某種疫苗并隨后產(chǎn)生了免疫力，以及隨之而來的免疫反應(yīng)的程度。在本章中，我們將描述為什么有必要將記憶B細(xì)胞（Bmem）測(cè)量納入這些考慮，以及如何通過執(zhí)行B細(xì)胞ELISPOT/FluoroSpot（統(tǒng)稱為“ImmunoSpot®”）檢測(cè)，以最小的細(xì)胞材料和勞動(dòng)力可靠地實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)（見注1）。迄今為止，對(duì)抗原特異性Bmem監(jiān)測(cè)的主流努力尚未得到充分實(shí)施，這有其概念和實(shí)際原因。也就是說，抗體滴度測(cè)量直接反映Bmem頻率已經(jīng)被廣泛接受。這個(gè)概念是基于一個(gè)過時(shí)的假設(shè)，即在B細(xì)胞對(duì)抗原的反應(yīng)過程中，長(zhǎng)壽命的Bmem和長(zhǎng)壽命的漿細(xì)胞（PC）以固定的比例出現(xiàn)。因此，人們認(rèn)為利用脆弱活細(xì)胞材料檢測(cè)Bmem的繁瑣測(cè)試是不必要的，因?yàn)檠�清中穩(wěn)定蛋白的簡(jiǎn)單測(cè)量可以可靠地提供所需的信息。然而，最近對(duì)B細(xì)胞譜系分化途徑的理解進(jìn)展意味著需要一種不同的方法。這個(gè)主題最近已經(jīng)成為幾篇精彩評(píng)論的主題[1—3]，僅在下節(jié)中簡(jiǎn)要概述........

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