DNP-BSA免疫層析質(zhì)控系統(tǒng)的設(shè)計(jì)檢測(cè)原理及優(yōu)勢(shì)

DNP-BSA（AbMole，M58157）是由2,4-二硝基苯（DNP）與牛血清白蛋白（BSA）通過化學(xué)偶聯(lián)形成的人工抗原復(fù)合物。DNP-BSA目前是免疫層析技術(shù)中質(zhì)控系統(tǒng)的核心試劑之一，其應(yīng)用原理基于抗原抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，是免疫層析的重要組成元件^[1]。
 
在免疫層析和免疫色譜等快速檢測(cè)技術(shù)中，傳統(tǒng)質(zhì)控系統(tǒng)多采用動(dòng)物源性抗體如羊抗鼠IgG作為核心試劑。該類系統(tǒng)依賴于抗體間的特異性識(shí)別，雖能實(shí)現(xiàn)基本質(zhì)控功能，但存在批次差異顯著、交叉反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)及生產(chǎn)過程復(fù)雜等局限性^[2]。DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯(lián)牛血清白蛋白，AbMole，M58157）系統(tǒng)作為新型質(zhì)控試劑，與傳統(tǒng)的羊抗鼠IgG質(zhì)控系統(tǒng)相比展現(xiàn)出更優(yōu)異的性能：首先，DNP-BSA避免了動(dòng)物源性抗體可能帶來的批次差異和交叉反應(yīng)；其次，DNP-BSA的化學(xué)合成過程可控，可實(shí)現(xiàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化；最后，DNP-BSA（2,4-Dinitrophenyl-Bovine Serum Albumin）具有良好的兼容性，可與膠體金、熒光微球等多種標(biāo)記技術(shù)結(jié)合使用。在免疫層析的檢測(cè)中，當(dāng)樣本在層析作用下流經(jīng)結(jié)合墊時(shí)，會(huì)溶解標(biāo)記抗體（膠體金標(biāo)記，常稱之為金標(biāo)抗體）形成液相免疫試劑。若樣本中存在目標(biāo)分析物，金標(biāo)抗體會(huì)與之結(jié)合，形成"金標(biāo)抗體-分析物"復(fù)合物。該復(fù)合物繼續(xù)遷移至檢測(cè)線（常稱之為T線）時(shí)，被固定在檢測(cè)線處的捕獲抗體特異性識(shí)別，形成"金標(biāo)抗體-分析物-捕獲抗體"的三明治結(jié)構(gòu)，經(jīng)過不斷的累積產(chǎn)生可視信號(hào)（如紅色）^[3]。為避免假陰性結(jié)果的出現(xiàn)（證明該檢測(cè)系統(tǒng)是有效的），一般在免疫層析試紙中還要設(shè)置一條質(zhì)控線（C線）^[4]。設(shè)計(jì)原理如下：在結(jié)合墊中除了用于檢測(cè)待分析目標(biāo)的金標(biāo)抗體外，還包被有抗DNP的金標(biāo)抗體，當(dāng)層析進(jìn)行時(shí)，抗DNP標(biāo)記抗體會(huì)隨液體遷移至質(zhì)控線，隨后與固定在C線處的DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯(lián)牛血清白蛋白，AbMole，M58157）發(fā)生特異性結(jié)合，不斷累積后也會(huì)形成可視化信號(hào)。因?yàn)樯鲜鲞^程獨(dú)立于目標(biāo)分析物的存在，所以可用于證明檢測(cè)結(jié)果的有效性，即有效區(qū)分了"真陰性"與"系統(tǒng)失效導(dǎo)致的假陰性"。上述試劑均僅供科學(xué)研究和檢測(cè)使用。

參考文獻(xiàn)及鳴謝
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[2] Thomas Houts, Immunochromatography, Principles and practice of immunoassay, Springer1991, pp. 563-583.
[3] Michael G J Fresenius' journal of analytical chemistry Weller, Immunochromatographic techniques–a critical review, 366(6) (2000) 635-645.
[4] Sanghoon Ko, Sundaram Gunasekaran, JaehyuckJ Food Control Yu, Self-indicating nanobiosensor for detection of 2, 4-dinitrophenol, 21(2) (2010) 155-161.