細(xì)胞因子檢測(cè)常用方法合集速遞
瀏覽次數(shù):420 發(fā)布日期:2025-11-28
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細(xì)胞因子(cytokine,CK)是由免疫細(xì)胞(單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T/B 細(xì)胞、NK 細(xì)胞等)與非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)合成分泌的小分子蛋白質(zhì),具備廣泛生物學(xué)活性。其通過結(jié)合特異性受體,調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)分化、免疫應(yīng)答等關(guān)鍵過程,通常由免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)產(chǎn)生,功能涵蓋固有免疫與適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)、血細(xì)胞生成、APSC 多能細(xì)胞調(diào)控及損傷組織修復(fù)等。依據(jù)功能特性,細(xì)胞因子可劃分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等多個(gè)家族,是維持人體穩(wěn)態(tài)、抵御疾病的核心調(diào)節(jié)分子。

在臨床場(chǎng)景中,細(xì)胞因子檢測(cè)可廣泛應(yīng)用于疾病輔助診斷與預(yù)后評(píng)估、感染源鑒別、細(xì)胞因子風(fēng)暴預(yù)警、腫瘤免疫機(jī)制研究、自身免疫性疾病病情監(jiān)測(cè)及藥效評(píng)估,同時(shí)能實(shí)時(shí)追蹤放化療、免疫治療或術(shù)后的炎癥進(jìn)展、轉(zhuǎn)歸及治療效果;在生物藥研發(fā)領(lǐng)域,該檢測(cè)可助力免疫原性評(píng)估、藥物活性檢測(cè)、藥物相互作用研究及安全性評(píng)價(jià)等核心環(huán)節(jié)。
可見,細(xì)胞因子檢測(cè)是生物醫(yī)藥領(lǐng)域不可或缺的關(guān)鍵技術(shù),對(duì)疾病診斷治療、藥物研發(fā)創(chuàng)新均具有重要支撐意義。目前科研人員已開發(fā)多種檢測(cè)方法,以下為常用技術(shù)匯總:
1、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA,Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
作為免疫學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域的經(jīng)典技術(shù),ELISA 專為體液中細(xì)胞因子等微量蛋白質(zhì)檢測(cè)設(shè)計(jì),核心原理是將抗原 / 抗體固定于固相載體并保留其免疫活性,通過酶標(biāo)記抗原 / 抗體的特異性結(jié)合反應(yīng),最終以顯色信號(hào)定量目標(biāo)分子。該技術(shù)兼具高靈敏度、強(qiáng)特異性、操作便捷及可自動(dòng)化優(yōu)勢(shì),不僅能精準(zhǔn)檢測(cè)細(xì)胞因子的含量、亞型與受體表達(dá),還可支撐細(xì)胞因子分泌機(jī)制及功能研究,同時(shí)適用于核酸、脂質(zhì)等其他生物分子檢測(cè),廣泛應(yīng)用于臨床診斷、生物藥研發(fā)、食品安全等多個(gè)領(lǐng)域。
2、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISPOT,Enzyme-linked ImmunoSpot)
作為 ELISA 技術(shù)的進(jìn)階升級(jí)方案,ELISPOT 是聚焦單個(gè)分泌細(xì)胞的定量檢測(cè)核心技術(shù) —— 依托免疫吸附與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)融合,將目標(biāo)細(xì)胞接種于包被特異性抗體的 96 孔板,經(jīng)刺激后細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子或免疫球蛋白會(huì)被原位捕獲;移除細(xì)胞后,通過生物素標(biāo)記二抗、酶標(biāo)親和素孵育及底物顯色,單個(gè)分泌細(xì)胞會(huì)形成特征性染色斑點(diǎn),實(shí)現(xiàn)可視化定量。
該技術(shù)兼具超高靈敏度、操作便捷、成本可控等優(yōu)勢(shì),不僅能精準(zhǔn)檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子 / 免疫球蛋白的頻率,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)樣本中活細(xì)胞免疫狀態(tài),還可對(duì)於抗原刺激后的活細(xì)胞進(jìn)行功能性驗(yàn)證,憑借特異性強(qiáng)、結(jié)果直觀可信的核心特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于分泌細(xì)胞因子細(xì)胞檢測(cè)、抗體分泌細(xì)胞(ASC)測(cè)定等場(chǎng)景,成為國內(nèi)外免疫學(xué)界公認(rèn)的核心檢測(cè)技術(shù)之一。
3、蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot,WB)
作為蛋白分析領(lǐng)域的經(jīng)典常規(guī)技術(shù),WB 專為細(xì)胞 / 組織中特定蛋白質(zhì)表達(dá)檢測(cè)設(shè)計(jì),核心原理是將樣品經(jīng)凝膠電泳分離后轉(zhuǎn)印至固相膜,通過特異性抗體與目標(biāo)蛋白的免疫結(jié)合反應(yīng),結(jié)合顯色或化學(xué)發(fā)光檢測(cè),依據(jù)條帶位置與灰度值,實(shí)現(xiàn)蛋白的定性鑒定及半定量分析。
該技術(shù)流程清晰(含電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫印跡、顯色等關(guān)鍵步驟),兼具高分辨率與強(qiáng)特異性優(yōu)勢(shì),可同時(shí)對(duì)比多個(gè)樣品中同種蛋白的表達(dá)量差異,廣泛應(yīng)用于基因蛋白水平表達(dá)研究、抗體活性檢測(cè)、疾病早期診斷等生物醫(yī)藥研究及臨床相關(guān)場(chǎng)景。
4、超敏電化學(xué)發(fā)光技術(shù)(MSD,Meso Scale Discovery)
作為生物分子檢測(cè)領(lǐng)域的超高靈敏度技術(shù),MSD 以電化學(xué)發(fā)光為核心原理 —— 通過電化學(xué)信號(hào)激發(fā)特異性標(biāo)記物產(chǎn)生強(qiáng)光信號(hào),結(jié)合信號(hào)放大機(jī)制實(shí)現(xiàn)對(duì)低濃度目標(biāo)分子的精準(zhǔn)捕獲,尤其適用于生物標(biāo)志物等微量生物分子檢測(cè)。
該技術(shù)兼具高靈敏度、寬線性范圍、強(qiáng)特異性及低背景干擾等核心優(yōu)勢(shì),更支持多靶點(diǎn)并行檢測(cè),能高效實(shí)現(xiàn)低豐度目標(biāo)分子的定量分析,在生物標(biāo)志物篩查、藥物高通量篩選及免疫分析等場(chǎng)景中表現(xiàn)突出。目前已廣泛應(yīng)用于臨床診斷與生物醫(yī)藥研究:臨床端可精準(zhǔn)檢測(cè)腫瘤、感染性疾病、心血管疾病等標(biāo)志物,為診療決策提供可靠依據(jù);研發(fā)端可支撐生物分子互作研究、新藥活性評(píng)價(jià)及免疫學(xué)機(jī)制解析,為新藥研發(fā)與基礎(chǔ)科研提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。
5、Luminex 液相芯片檢測(cè)技術(shù)
作為多因子檢測(cè)領(lǐng)域的核心技術(shù),Luminex 融合微球編碼與流式細(xì)胞儀原理,通過微球內(nèi)部三種免疫熒光的不同配比,可實(shí)現(xiàn)數(shù)百種特異性微球的精準(zhǔn)區(qū)分,每種微球均能靶向捕獲一種目標(biāo)蛋白。檢測(cè)時(shí),儀器通過雙激光系統(tǒng)完成定性與定量分析:635nm 紅色激光識(shí)別微球編碼,明確對(duì)應(yīng)靶標(biāo)類型;532nm 綠色激光檢測(cè) PE 熒光基團(tuán)信號(hào)強(qiáng)度,精準(zhǔn)反映靶標(biāo)蛋白結(jié)合量。
該技術(shù)兼具多重檢測(cè)優(yōu)勢(shì)與超高靈敏度,既實(shí)現(xiàn) pg 級(jí)絕對(duì)定量(性能媲美多重 ELISA),又支持單次實(shí)驗(yàn)同時(shí)檢測(cè)多種蛋白指標(biāo),大幅提升檢測(cè)效率與樣本利用率。配套試劑盒覆蓋人類、非人靈長(zhǎng)類、小鼠、大鼠、犬、豬等多個(gè)物種,廣泛適用于多因子聯(lián)合檢測(cè)、生物標(biāo)志物篩查、藥物研發(fā)等生物醫(yī)藥研究場(chǎng)景。
6、Olink 技術(shù)
作為突破蛋白檢測(cè)多重性、特異性與靈敏度瓶頸的核心平臺(tái),Olink 聚焦超靈敏多重蛋白標(biāo)志物檢測(cè)、無偏靶向蛋白質(zhì)組學(xué)及精準(zhǔn)蛋白組學(xué)三大核心方向,通過技術(shù)創(chuàng)新推動(dòng)蛋白標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)、藥物研發(fā)、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究及多組學(xué)整合的落地應(yīng)用。
該平臺(tái)檢測(cè)服務(wù)兼具高靈敏度、強(qiáng)穩(wěn)定性與高準(zhǔn)確性優(yōu)勢(shì),配套超微量蛋白標(biāo)志物開發(fā)、蛋白互作分析等多元化方案,可適配精準(zhǔn)醫(yī)療、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)等廣泛研究場(chǎng)景。同時(shí),其在生物標(biāo)志物篩查、疾病預(yù)測(cè)診斷等領(lǐng)域的應(yīng)用,為臨床診療決策與科研創(chuàng)新提供高效技術(shù)支撐,加速醫(yī)學(xué)研究向臨床轉(zhuǎn)化的進(jìn)程。
7、Cytometric Bead Array(CBA)系統(tǒng)
作為流式細(xì)胞術(shù)與蛋白定量技術(shù)的融合創(chuàng)新,CBA 系統(tǒng)是針對(duì)微量樣本設(shè)計(jì)的多指標(biāo)檢測(cè)技術(shù),核心原理是利用微米級(jí)熒光編碼微球 —— 每種微球偶聯(lián)特異性抗體,與樣本中目標(biāo)細(xì)胞因子 / 蛋白質(zhì)結(jié)合形成免疫復(fù)合物,經(jīng)洗滌去除未結(jié)合成分后,通過流式細(xì)胞儀實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)。
該技術(shù)兼具多重檢測(cè)與高效分析優(yōu)勢(shì):?jiǎn)未螌?shí)驗(yàn)可同步定量單個(gè)樣本中多種指標(biāo),且具備高靈敏度、強(qiáng)特異性特點(diǎn),同時(shí)操作快速簡(jiǎn)便、檢測(cè)通量高,成為免疫學(xué)研究與臨床診斷的關(guān)鍵工具。臨床端可精準(zhǔn)檢測(cè)免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等疾病標(biāo)志物,支撐早期診斷、病情監(jiān)測(cè)及療效評(píng)估;研發(fā)端可助力細(xì)胞因子表達(dá)規(guī)律、分子互作機(jī)制及疾病關(guān)聯(lián)研究,為新藥研發(fā)與免疫學(xué)基礎(chǔ)研究提供可靠數(shù)據(jù)支撐。
8、質(zhì)譜法(Mass Spectrometry,MS)
作為蛋白分析領(lǐng)域的高分辨率技術(shù),MS 通過質(zhì)譜儀精準(zhǔn)測(cè)量離子質(zhì)荷比,可直接獲取細(xì)胞因子的分子量、氨基酸序列等核心信息。其核心優(yōu)勢(shì)在于兼具超高靈敏度、強(qiáng)特異性與高分辨率,既能實(shí)現(xiàn)低濃度細(xì)胞因子的精準(zhǔn)檢出,又能有效區(qū)分不同細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)差異,為蛋白鑒定與特性分析提供直接依據(jù)。
綜上,細(xì)胞因子檢測(cè)是貫穿生物醫(yī)藥領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)支撐,廣泛賦能疾病診斷監(jiān)測(cè)、治療預(yù)后評(píng)估、藥物研發(fā)篩選、疫苗設(shè)計(jì)評(píng)估及基礎(chǔ)機(jī)制研究等核心場(chǎng)景。伴隨檢測(cè)技術(shù)的持續(xù)迭代與應(yīng)用場(chǎng)景的不斷拓展,細(xì)胞因子檢測(cè)必將在未來生物醫(yī)藥領(lǐng)域中發(fā)揮更為核心的引領(lǐng)作用。
細(xì)胞因子檢測(cè)服務(wù)哪個(gè)公司提供?
細(xì)胞因子檢測(cè)選樂備實(shí)(LabEx)!提供 ELISA、ELISPOT、MSD、Luminex、Olink、CBA等多種核心技術(shù),覆蓋多維度細(xì)胞因子檢測(cè)需求,助力科研與臨床轉(zhuǎn)化!
| 小鼠炎癥10因子Panel |
LXLBM10-1 |
10 |
IL-1 β/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6 ,IL-10,IL-12p70,CXCL1/GRO/α/KC/CINC-1,IFN-γ,TNF-α |
| 人炎癥10因子Panel |
LXMH10-1 |
10 |
IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,TNF-α |
樂備實(shí)是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測(cè)以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實(shí)不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺(tái)已擴(kuò)展到單細(xì)胞測(cè)序、空間多組學(xué)、流式檢測(cè)、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測(cè)、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè),建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測(cè)體系。