流式、免疫熒光、免疫組化等實驗用的抗體有什么區(qū)別？
流式、免疫熒光、免疫組化還有WB、ELISA等都是基于抗原抗體特異性反應(yīng)的實驗技術(shù)，其核心就是抗體，本質(zhì)上都是一樣的東西，只是由于儀器、原理、檢測方式的差異，抗體的特異性、靈敏度、宿主、是否標記等方面有區(qū)別。
1流式檢測
1. 主要設(shè)備
流式細胞儀：流式細胞儀是一種在液流系統(tǒng)中快速檢測單個細胞或多個微粒的多種物理和化學(xué)特性的生物醫(yī)學(xué)儀器，它結(jié)合了流體學(xué)、光學(xué)、電子學(xué)和計算機科學(xué)等多種技術(shù)，能夠?qū)毎M行多參數(shù)、定量的分析和分選。簡單來說，它可以被視為一個 “細胞的超高速拍照和分揀系統(tǒng)” ，它讓細胞排成單列逐個通過一個檢測點，在瞬間對其進行“拍照”（檢測光學(xué)信號），然后根據(jù)“照片”的特征，決定是否給這個細胞帶上電荷，從而將其分選到指定的容器中。
2. 實驗原理
通過熒光物質(zhì)直接標記抗體，與細胞懸液孵育后，通過流式細胞儀激發(fā)并檢測細胞上的熒光情況，進行結(jié)果分析或分選。屬于抗體的直接法應(yīng)用。
3. 抗體特性
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大多采用精選高靈敏度、高特異性單克隆抗體，降低非特異性反應(yīng)，提高檢出率
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多數(shù)抗體是針對細胞表面抗原，只有少數(shù)針對胞內(nèi)抗原（需破膜）
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熒光物質(zhì)直接標記，直接法檢測，無需復(fù)雜的酶標二抗、生物素等信號放大系統(tǒng)
4. 結(jié)果呈現(xiàn)
▲左：SNFA-311流式檢測直方圖 右：SNFA-311流式檢測散點圖
2、免疫熒光、免疫組化、WB及ELISA等實驗
1. 主要設(shè)備
免疫熒光：熒光顯微鏡等
免疫組化：普通光學(xué)顯微鏡等
WB：電泳儀、轉(zhuǎn)印儀、ECL發(fā)光檢測儀或膠片等
ELISA：酶標板、酶標儀等
2. 實驗原理
待樣本處理好后，先與一抗抗體孵育結(jié)合，再通過通用酶標或熒光二抗與一抗抗體孵育結(jié)合，最后通過酶標或熒光二抗與底物或者激發(fā)光激發(fā)后檢測。多屬于抗體的間接法應(yīng)用，需要配合二抗或者其他信號放大系統(tǒng)使用。
3. 抗體特性
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純化的單克隆抗體或者多克隆抗體，種屬、特異性、靈敏度要求低于流式抗體
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不同實驗技術(shù)，可以檢測胞內(nèi)、胞外、細胞膜幾乎所有部位的抗原
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多數(shù)是間接法檢測，檢測結(jié)果一定程度受二抗、信號放大系統(tǒng)影響，實驗周期長
4. 結(jié)果呈現(xiàn)
綜上，流式抗體與常規(guī)免疫熒光、免疫組化等使用的抗體雖然本質(zhì)上是一樣的，但是由于技術(shù)需求不同，實際抗體性質(zhì)、使用方式、檢測內(nèi)容等多方面參數(shù)都會有區(qū)別，需要根據(jù)自身實驗需要甄別選擇哦。
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