引言
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)最早由美國(guó)學(xué)者 Richard G. M. Morris 于1981年提出,最初用于探索大腦結(jié)構(gòu)對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的調(diào)控作用。隨著研究的發(fā)展,該實(shí)驗(yàn)已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域評(píng)價(jià)動(dòng)物學(xué)習(xí)與空間記憶最經(jīng)典、最常用的實(shí)驗(yàn)范式。其實(shí)驗(yàn)原理在于:嚙齒類動(dòng)物對(duì)水環(huán)境存在天然的逃避動(dòng)機(jī),它們會(huì)努力尋找最短、最直接的路徑離開(kāi)水面。在這一過(guò)程中,動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力通過(guò)尋找平臺(tái)的效率體現(xiàn),而空間記憶則通過(guò)利用環(huán)境線索精準(zhǔn)定位并游向隱藏平臺(tái)來(lái)反映。
實(shí)驗(yàn)通常選用大鼠或小鼠。
水池:大鼠實(shí)驗(yàn)使用直徑約200 cm、高100 cm的圓形灰色或黑色水池,小鼠實(shí)驗(yàn)設(shè)備約縮小一半;
平臺(tái):直徑10 cm,置于水面下約2 cm(小鼠為1 cm);
水環(huán)境:水深約50 cm,溫度維持在22–24 ℃,并加入牛奶或奶粉攪渾,避免動(dòng)物直接看到平臺(tái);
記錄系統(tǒng):水池中央上方(約200 cm處)安裝跟蹤攝像頭,連接計(jì)算機(jī),用于記錄動(dòng)物位置、游泳軌跡、耗時(shí)及速度;
外部線索:實(shí)驗(yàn)室墻面張貼顏色鮮明、形狀各異的圖案,作為動(dòng)物定位的重要參照物。
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)通常包括三個(gè)主要階段:獲得性訓(xùn)練、探查實(shí)驗(yàn)以及對(duì)位訓(xùn)練。
1. 獲得性訓(xùn)練(Acquisition phase)將圓形水池劃分為四個(gè)象限,平臺(tái)固定在其中一個(gè)象限的中央;
動(dòng)物由東、西、南、北四個(gè)起始點(diǎn)之一隨機(jī)放入,頭部朝向池壁;
記錄其找到平臺(tái)的時(shí)間。若在60 s內(nèi)未能找到,則研究者引導(dǎo)其上平臺(tái),并在平臺(tái)上停留約10 s;
每天訓(xùn)練4次,兩次間隔15–20 min,連續(xù)進(jìn)行5天。
訓(xùn)練結(jié)束后,動(dòng)物會(huì)逐漸學(xué)會(huì)利用外部線索定位,并縮短尋找平臺(tái)的時(shí)間。
在獲得性訓(xùn)練最后一次結(jié)束后的次日進(jìn)行;
移除平臺(tái),將動(dòng)物從原平臺(tái)象限的對(duì)側(cè)放入水池;
觀察60 s內(nèi)動(dòng)物在目標(biāo)象限停留的時(shí)間及進(jìn)入次數(shù),用以評(píng)價(jià)空間記憶水平。
在探查實(shí)驗(yàn)后開(kāi)始,持續(xù)4天;
平臺(tái)移至原位置的對(duì)側(cè)象限,訓(xùn)練方式與獲得性訓(xùn)練相同;
每只動(dòng)物每天訓(xùn)練4次,記錄其逃避潛伏期、游泳路徑及速度。
在對(duì)位訓(xùn)練最后一次結(jié)束后的次日進(jìn)行;
方法同第一次探查實(shí)驗(yàn),但目標(biāo)象限改為平臺(tái)第二次所在區(qū)域;
記錄動(dòng)物在該象限停留時(shí)間和進(jìn)入次數(shù),以檢測(cè)工作記憶能力。
與食物驅(qū)動(dòng)的模型(如放射臂迷宮)相比,水迷宮的優(yōu)勢(shì)在于動(dòng)物有更強(qiáng)烈的動(dòng)機(jī)去逃離水環(huán)境,且無(wú)需禁食,特別適合老年動(dòng)物研究。
小鼠實(shí)驗(yàn)除水池與平臺(tái)縮小外,訓(xùn)練周期更短:一般3天完成獲得性訓(xùn)練,第4天為探查,第5–6天為對(duì)位訓(xùn)練,第7天進(jìn)行二次探查。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,觀察者需始終固定在同一位置,以免外部干擾。
每天在固定時(shí)段進(jìn)行操作,動(dòng)作輕柔,避免應(yīng)激。
影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素較多,包括性別、品系、水溫和泳池大小等。在用游泳速度作為指標(biāo)時(shí),還需考慮體重、年齡及肌肉發(fā)育。
老年動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)確認(rèn)其游泳能力和視力未受顯著影響?赏ㄟ^(guò)“可見(jiàn)平臺(tái)測(cè)試”驗(yàn)證:若動(dòng)物能迅速游向露出的平臺(tái),則說(shuō)明能力正常。
游泳對(duì)動(dòng)物而言是一種應(yīng)激,應(yīng)考慮其可能引起的神經(jīng)內(nèi)分泌改變。對(duì)于老年動(dòng)物,還需警惕心血管風(fēng)險(xiǎn)。必要時(shí)可提前進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練。
若使用牛奶或奶粉混濁水池,應(yīng)定期更換水,以防變質(zhì)。
Morris水迷宮因其高度的敏感性與可靠性,被廣泛用于學(xué)習(xí)與記憶研究,尤其是老年動(dòng)物的記憶衰退模型。該方法已成為評(píng)價(jià)空間學(xué)習(xí)能力的“金標(biāo)準(zhǔn)”。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,結(jié)合規(guī)范化的操作與科學(xué)的參數(shù)控制,可大幅提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和可信度。