文章分享：T細(xì)胞靶向LNP通過遞送DNA在小鼠體內(nèi)實(shí)現(xiàn)CAR-T制備

文章來源公眾號(hào)：bloki 作者：bloki

又看到一篇LNP體內(nèi)制備CAR-T的文章，10.3分，文章不復(fù)雜，放松下，整理分享之，具體內(nèi)容如下：

作者用LNP遞送mCherry mRNA或GFP minicircle DNA (mcDNA)到T細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)LNP無法有效遞送mcDNA

作者制備了CD7、CD3抗體修飾的LNP以靶向T細(xì)胞，表征T細(xì)胞靶向LNP

抗體修飾的T細(xì)胞靶向LNP可有效遞送mcDNA，驅(qū)動(dòng)GFP表達(dá)（在激活的T細(xì)胞上遞送效率更高）

CD3抗體修飾使得LNP引起T細(xì)胞激活

體外，LNP作用在PBMC上，看哪些細(xì)胞攝取、表達(dá)了LNP中的貨物，發(fā)現(xiàn)CD7、CD3兩種抗體修飾更利于靶向T細(xì)胞，驅(qū)動(dòng)貨物表達(dá)

前面是用熒光蛋白測(cè)試，開始遞送正式的貨物：兩種抗體修飾的T細(xì)胞靶向LNP遞送SB100x轉(zhuǎn)座酶mRNA和CAR mcDNA - 靶向LNP把貨物送到T細(xì)胞，轉(zhuǎn)座酶把CAR基因整合進(jìn)T細(xì)胞基因組，實(shí)現(xiàn)靶向T細(xì)胞持久穩(wěn)定表達(dá)CAR（左側(cè)轉(zhuǎn)座酶示意圖來源于網(wǎng)絡(luò)）

體外介導(dǎo)CAR長(zhǎng)時(shí)間表達(dá)（沒有轉(zhuǎn)座酶SB100x不行）

體外，CAR-T響應(yīng)靶細(xì)胞分泌細(xì)胞因子、殺靶細(xì)胞

無需提前激活T細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)CAR長(zhǎng)時(shí)間表達(dá)

作者的LNP在小鼠體內(nèi)實(shí)現(xiàn)CAR-T制備

作者的LNP抑制腫瘤生長(zhǎng)、延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間

LNP介導(dǎo)CAR表達(dá)、抑瘤量效

又做了CD19、CD22雙靶點(diǎn)CAR-T，體外響應(yīng)靶細(xì)胞分泌IFNr、殺靶細(xì)胞

體內(nèi)實(shí)現(xiàn)雙靶點(diǎn)CAR-T制備（作者沒提供他的LNP遞送CAR mRNA體內(nèi)制備CAR-T效果的數(shù)據(jù)，只是引用文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)比，說自己的LNP+mcDNA更能持久的體內(nèi)制備CAR-T）

抑制腫瘤生長(zhǎng)、延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間

CAR-T和T分化、疲勞情況