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常用細胞培養(yǎng)包被試劑種類和使用方法及注意事項
瀏覽次數(shù):1764 發(fā)布日期:2025-3-24 來源:本站
僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
什么是包被細胞培養(yǎng)瓶試劑?
包被試劑是一種用于處理培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿表面的化學物質(zhì),能夠模擬細胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,
促進細胞的附著、鋪展和增殖
。通過包被處理,培養(yǎng)表面可以更好地支持細胞的生長和功能表達。
本文將為您詳細介紹幾種常用的包被試劑及其特點,并分享包被操作的注意事項,助您輕松提升細胞培養(yǎng)效果!
常見的包被試劑種類
和使用方法
01
明膠(Gelatin)
CSP132
常用于包被細胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿,以促進細胞的貼壁和增殖,具有良好的生物相容性和細胞黏附性。
適用細胞
:胚胎干細胞、間充質(zhì)干細胞、內(nèi)皮細胞等。
特點
:價格低廉,易于使用,能夠
提供良好的細胞附著支持。
使用范圍:
常用于包被細胞
培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿
,以促進細胞的貼壁和增殖,具有良好的生物相容性和細胞黏附性。
使用濃度:
1-20mg/ml 即1mg/ml-20mg/ml
包被體積:
通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準,通常為 T-25瓶2.5ml, T-75瓶7.5ml
包被條件:
37°C 孵育≥2小時,或 4°C 過夜。
接種細胞:
使用前吸除多余明膠溶液,pbs洗1-2次后可以接種細胞。
0
2
多聚賴氨酸
(PLL)
CSP073
相對分子量為 70,000~300,000 的 PLL 可作為細胞培養(yǎng)的生長基質(zhì),能夠
促進細胞粘附和貼壁,
是細胞培養(yǎng)中常用的細胞粘附劑。
適用細胞
:神經(jīng)元細胞、原代細胞、懸浮細胞等。
特點
:通過靜電作用增強細胞附著,
適合難以貼壁的細胞。
常用濃度:
0.01% 至 0.1% (w/v),即 0.1mg/ml 至 1mg/ml。
包被條件:
37°C 孵育
≥2小時
,或 4°C 過夜
。通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準,使用前吸除多余溶液,用無菌 PBS 沖洗 1-2 次。
0
3
重組人纖連蛋白(FN)
CSP044
是一種重要的細胞外基質(zhì)蛋白,具有多種生物學功能。它是一種高分子量的糖蛋白,能夠
與細胞表面和細胞外基質(zhì)中的多種組分結合,
如膠原蛋白、纖維蛋白、肝素、DNA和肌動蛋白等。
適用細胞
:
干細胞、間充質(zhì)干細胞、內(nèi)皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞、成纖維細胞。
特點:
作為細胞培養(yǎng)基質(zhì),提高細胞貼壁率,增強細胞代謝水平,縮短細胞生長時間
。
常用濃度:
1µg/cm² 至 10µg/cm²。
包被條件:
37°C 孵育≥2小時,或 4°C 過夜。
包被體積:
如下列表
04
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型包被液(
1m
g/mL)
CSP145
鼠尾膠原蛋白是膠原蛋白的一種,主要為Ⅰ型膠原蛋白,廣泛適用于內(nèi)皮細胞、肝細胞、肌肉細胞和多種其他細胞類型的培養(yǎng),
能夠模擬細胞外基質(zhì)的環(huán)境。
適用細胞:上皮細胞、肝細胞、肌細胞。
特點:
可以制備成一種清晰的凝膠,
提供 3D 基質(zhì)或表面涂在組織培養(yǎng)板上,促進細胞貼壁和增殖。
常用濃度
:
1-5ug/cm²包被體積。
包被體積:
T-25瓶2.5ml去離子水+50ul ( 1MG/ML 鼠尾膠原蛋白Ⅰ ),隨后將培養(yǎng)瓶放置4度過夜,吸出鼠尾膠原蛋白Ⅰ溶液,pbs洗2-3次后可加入細胞。
包被注意事項
1.
無菌操作:
所有操作應在無菌條件下進行,避免污染。
2.
均勻覆蓋:
確保包被試劑均勻分布在培養(yǎng)瓶底部,避免局部過厚或過薄。
3.
濃度優(yōu)化:
根據(jù)細胞類型和實驗需求優(yōu)化包被試劑的濃度。
4.
孵育時間:
根據(jù)試劑和實驗要求調(diào)整孵育時間,確保充分包被。
5.
儲存條件:
包被后的培養(yǎng)瓶可短期儲存于 4°C,但建議盡快使用以保證最佳效果。
通過選擇合適的包被試劑并遵循正確的包被步驟,可以有效提高細胞貼附和生長,為后續(xù)實驗提供可靠的細胞模型。
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發(fā)布者:
上海中喬新舟生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-56760351
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