Lonza 4d-Nucleofector X小體積轉(zhuǎn)染應用分享

4D-Nucleofector® X Unit 是4D-Nucleofector®系統(tǒng)四個功能模塊之一，用于2 × 104到2 × 107細胞量的轉(zhuǎn)染，X模塊中不同的電極模式（電極板或電極條）可選用相同的電轉(zhuǎn)程序，系統(tǒng)可自動轉(zhuǎn)化應用于不同模塊的參數(shù)，客戶無需進行額外操作，實現(xiàn)實驗的方便性與靈活性最大化。

4D-Nucleofector® X Unit 特點

1.4D Nucleofector 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)X模塊可同時轉(zhuǎn)染2個100μL電極杯或1個16孔電極板條（每孔20μL）。

2.電極杯和電極板條可以選用相同的電轉(zhuǎn)程序。

3.每個電轉(zhuǎn)杯、每個孔可獨立設置程序。

4.操作簡單靈活。

1）20ul與100ul）使用相同的操作手冊。

2）100ul 轉(zhuǎn)染細胞數(shù)量最多可達2 x 107。

3）20ul 轉(zhuǎn)染細胞數(shù)量最少到2 x 104。

5.通量多元化。

1）細胞通量的1-16個樣。

2）可預設50個以上參數(shù)，針對100ul 體系。

3）可根據(jù)您的要求選擇20ul體系減少試劑費用支出。

6.轉(zhuǎn)染原代細胞。

1）5種試劑盒可覆蓋所有原代細胞類型。

2）轉(zhuǎn)染優(yōu)化實驗更加簡易便宜（如果您的細胞在數(shù)據(jù)庫中沒有需要自行優(yōu)化）。

應用案例分享

一，原代小鼠和人T細胞的KO

1.小鼠和人類T細胞中CRISPR/Cas9介導的基因KO效率高達90%以上

2.各種細胞表面受體（CTLA4，PD1），TF和細胞因子的KO

3.可以以類似的效率生成雙基因KO

二，原代人T細胞的KI

1.激活2d后進行電轉(zhuǎn)，CD3/28

2.90 g，10 min

3.Solution P3，4D 96 well unit

4.EH 115

5.one million T cells/20 μL

6.2.5 μL RNP（50 pmol）+2μL HDR（4 μg）