細(xì)胞被支原體污染后的特征及鑒別方法

很多小伙伴都疑惑，細(xì)胞被支原體污染后的特征是什么？如何鑒別細(xì)胞被支原體污染了？今天，小愛帶大家分享兩個(gè)支原體污染的案例，共同探尋一下細(xì)胞被支原體污染后的特征。
 

圖1 感染支原體的EBTr（牛胚氣管細(xì)胞）

01 牛胚氣管細(xì)胞

先來觀察一下被支原體污染的牛胚氣管細(xì)胞（圖1），由成纖維樣逐漸變得類上皮樣；質(zhì)膜鋪展，潰爛；輪廓不清，邊界模糊。再看右圖，細(xì)胞處于邊增殖邊凋亡的狀態(tài)，漂浮凋亡細(xì)胞過多。
 

圖2 感染支原體的HT1080（人纖維肉瘤細(xì)胞）

02 人纖維肉瘤細(xì)胞

再觀察一下被支原體污染的人纖維肉瘤細(xì)胞HT1080（圖2），由上皮樣逐漸變得類成纖維樣，胞體細(xì)長，和前面的牛胚氣管細(xì)胞形態(tài)變化剛好相反；偽足伸長，出現(xiàn)明顯的拉絲現(xiàn)象，表明細(xì)胞可能在“痛苦”地遷移。使用了支原體殺除試劑（abs9375），徹底根除了支原體以后，如右圖所示，細(xì)胞逐漸恢復(fù)了上皮樣形態(tài)，拉絲減少。
 

圖3 細(xì)胞膜上的支原體集落

03 支原體集落

給大家展示貼附在細(xì)胞膜上的支原體集落（圖3），支原體是目前已知最小的原核生物，直徑大小在0.1-0.3um，比細(xì)菌還要小。支原體可在培養(yǎng)液、細(xì)胞膜、細(xì)胞內(nèi)增殖。單個(gè)支原體需要借助于電鏡才可以觀察到具體形態(tài)，圖中膜上的黑點(diǎn)為支原體集落。細(xì)胞背景干凈，形態(tài)沒有大的變化，但質(zhì)膜粗糙，布滿黑點(diǎn)。

主要特征
細(xì)胞被支原體污染
1增殖減慢；
2上清液澄澈；
3背景干凈；
4細(xì)胞形態(tài)異常（拉絲、鋪展）；
5更換新的培養(yǎng)液細(xì)胞狀態(tài)沒有恢復(fù)。

細(xì)胞被支原體污染后的共性表現(xiàn)為細(xì)胞增殖減慢、上清液澄澈、背景干凈，這3點(diǎn)可以明確地排除真、細(xì)菌污染。值得一提的是，當(dāng)給細(xì)胞的營養(yǎng)體系不佳時(shí)，細(xì)胞也會(huì)表現(xiàn)出形態(tài)異常，所以，我們可以給細(xì)胞更換新的培養(yǎng)液，如果細(xì)胞也沒有恢復(fù)正常形態(tài)，此時(shí)判斷細(xì)胞極有可能被支原體“附身”了。
 

上述的判斷方法需要豐富的經(jīng)驗(yàn)積累，日常細(xì)胞培養(yǎng)中，我們還可以用PCR擴(kuò)增試劑盒檢測細(xì)胞是否有支原體污染。

圖4 支原體檢測試劑盒（PCR法）    
產(chǎn)品優(yōu)勢：
✔ 本試劑盒檢測靈敏度高，可檢測低至20個(gè)拷貝的支原體；
✔ 實(shí)驗(yàn)時(shí)間短，3小時(shí)即可完成；
✔ 已在多個(gè)支原體品種上做過驗(yàn)證。