探討組織學(xué)石蠟與冰凍切片的優(yōu)缺點(diǎn)

在組織學(xué)中，最常用到的有石蠟切片與冰凍切片。兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)，在實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用上也有所不同，比如石蠟切片常用于進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，冰凍切片常用于免疫熒光實(shí)驗(yàn)。而兩個(gè)實(shí)驗(yàn)都是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。

1、要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片。因?yàn)樽鍪�蠟切片時(shí)要高溫烤片，可能會(huì)破壞組織的抗原性，如果組織 的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。

2、冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易 形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可能會(huì)使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí)，目 錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫著兩者都可，那就都能做。

3、石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80 度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止 RNA 降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到 4 微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。