熒光-PCR法樣本處理及要求方法

熒光-PCR法樣本處理及要求
   
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
   
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
   
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
   
注：標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

熒光-PCR法技術(shù)原理：

(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而
結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。